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李淑芳: 作品数：23 被引量：51H指数：4; 供职机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

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鸡血清非特异性凝集1%戊二醛固定的鸡红细胞的研究: 2016年; 为了验证鸡血清是否可以非特异性凝集1%戊二醛固定的鸡红细胞,用鸡传染性鼻炎三价灭活疫苗免疫鸡血清、SPF鸡血清和健康猪血清,参照中华人民共和国农业行业标准NY/T 538—2002《鸡传染性鼻炎诊断技术》,进行了1%戊二醛固定的鸡红细胞和1%新鲜鸡红细胞的凝集试验。结果表明:鸡血清可以非特异性凝集1%戊二醛固定的鸡红细胞而不凝集1%新鲜鸡红细胞,说明鸡传染性鼻炎疫苗免疫鸡只的HI抗体只能作为免疫效果的参考值。; 龚玉梅张培君王宏俊贺云霞李淑芳侯婷; 关键词：鸡传染性鼻炎鸡血清戊二醛鸡红细胞

副猪嗜血杆菌转铁结合蛋白研究进展被引量：3: 2012年; 副猪嗜血杆菌是猪革拉泽氏病的病原体,该病是近年来严重危害养猪业的细菌性传染病之一,呈世界性分布。副猪嗜血杆菌相关致病性毒力因子的研究目前很少,关于转铁结合蛋白更是鲜为人知。在此对副猪嗜血杆菌转铁结合蛋白的结构、形成机制、影响因素及其免疫原性进行综述,对阐明致病菌的慢性感染机理有一定的生物学意义。; 李淑芳张培君龚玉梅侯娜赵兴绪贺云霞; 关键词：副猪嗜血杆菌

表达副鸡禽杆菌外膜蛋白的重组乳酸乳球菌的构建及其免疫原性研究被引量：1: 2018年; 为构建表达副鸡禽杆菌外膜蛋白的重组乳酸乳球菌,本试验按照乳酸乳球菌表达的偏好性,优化合成副鸡禽杆菌外膜蛋白p9的编码碱基序列,将其接入表达载体pNZ8149的多克隆位点并导入食品级乳酸乳球菌NZ3900。将重组乳酸乳球菌灭活后经肌肉注射免疫SPF鸡,免疫后攻毒测定乳酸乳球菌的保护效果,检测血清中IgG抗体和鼻黏膜sIgA抗体水平并检验免疫效果。PCR结果显示,成功构建了含p9片段的重组乳酸乳球菌,Western-blot检测显示,p9片段可在重组乳酸乳球菌内表达。重组菌最佳诱导表达条件：Nisin浓度为20 ng/mL、诱导时间为4 h。鸡肌肉注射免疫后可产生p9蛋白特异性的血清Ig G和鼻黏膜sIgA抗体。乳酸乳球菌重组疫苗免疫鸡对副鸡禽杆菌攻毒的保护率为60%-80%。结果表明,本研究成功构建了重组乳酸乳球菌pNZ8149-p9/NZ3900,该重组菌作为免疫原免疫鸡,对副鸡禽杆菌攻毒具有较好的免疫保护作用。; 梅晨李淑芳孙爱华龚玉梅王宏俊; 关键词：副鸡禽杆菌 IGG SIGA

副鸡禽杆菌外膜囊泡的生物学活性分析被引量：1: 2020年; 为研究副鸡禽杆菌(Apg)外膜囊泡(OMVs)的生物活性,提取了A型副鸡禽杆菌的外膜囊泡。纯化后的OMVs用透射电镜观察其形态结构;将OMVs加入到鸡巨噬细胞(HD-11)培养液中,检测一氧化氮(NO)产生量的变化;用荧光定量PCR(qPCR)检测HD-11各炎症相关因子的表达量变化情况;将OMVs经肌肉注射接种SPF鸡,检测鸡血清IgG抗体产生情况,并用3种血清型的副鸡禽杆菌强毒菌株攻击免疫鸡,测定其免疫保护率。结果显示,电镜下的副鸡禽杆菌OMVs呈球形,直径在20~300 nm;OMVs可极显著提高HD-11中NO产量;qPCR结果显示,OMVs作用可显著上调鸡巨噬细胞IL-2、IL-6、 IL-1β、IL-10、iNOs等炎症相关因子的表达。免疫鸡可以产生特异性的IgG抗体。用A型副鸡禽杆菌攻毒,免疫保护率为70%,对异种血清型交叉保护性较弱,仅有10%~30%。本研究为深入研究副鸡禽杆菌外膜囊泡的功能奠定了基础。; 梅晨孙爱华李淑芳龚玉梅王宏俊; 关键词：副鸡禽杆菌活性分析

副猪嗜血杆菌HigB和HigA基因的原核表达及功能分析: 2016年; 副猪嗜血杆菌属于条件性致病菌,可引起猪的格拉泽病,表现为多发性浆膜炎和关节炎。毒素抗毒素系统(TA)广泛存在于细菌中,其参与各种应激状态下的生理调节,利于机体适应复杂环境。克隆编码副猪嗜血杆菌的HigBA毒素抗毒素蛋白的基因,并对其进行原核表达和分析鉴定。结果发现,HigB对生长有抑制作用,而HigA可以中和这种作用,HigBA构成一对毒素抗毒素系统。HigB在高温和高密度时,表达量显著增加,显示其参与逆境环境下的生理调控。; 徐玉智李淑芳张培君龚玉梅王宏俊; 关键词：副猪嗜血杆菌实时荧光定量PCR

副鸡禽杆菌外膜蛋白GcbG的表达及免疫效果研究被引量：6: 2016年; 为研究副鸡禽杆菌外膜蛋白GcbG的免疫原性,克隆了副鸡禽杆菌荚膜蛋白合成相关的编码基因gcbG,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-gcbG,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中进行诱导表达。结果表明,重组菌在28℃培养条件下经1mmol/L的IPTG诱导6h可分泌表达GcbG蛋白,且其表达量最高。Western-blot分析表明,所表达的蛋白能与副鸡禽杆菌阳性血清发生特异性免疫印迹反应,说明所表达的蛋白具有较好的反应原性。动物试验表明,所表达的蛋白能为鸡提供较好的保护力。上述试验结果为进一步研究荚膜蛋白的生物学特性及亚单位疫苗的开发奠定了基础。; 赵成全路明华李淑芳张培君龚玉梅王宏俊; 关键词：副鸡禽杆菌原核表达动物试验

副鸡禽杆菌LAMP检测方法的建立被引量：2: 2018年; 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了快速特异的检测副鸡禽杆菌的方法。利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0,针对副鸡禽杆菌16SRNA基因序列设计两组LAMP引物,并对副鸡禽杆菌特异性DNA的扩增条件进行优化,评价所建立LAMP的特异性和灵敏性。结果显示,优化后的反应条件为65℃恒温反应60min,内引物1.60pmol/μL、外引物0.20pmol/μL。该LAMP对13株副鸡禽杆菌均发生了扩增反应,而对大肠埃希菌、禽多杀性巴氏杆菌、空肠弯曲杆菌等14株其他病原微生物没有扩增反应;该LAMP最低检出量为0.17pg/反应,敏感性远高于常规PCR的56pg/反应。结果表明,所建立的副鸡禽杆菌LAMP具有快速、高效、方便操作等特点,适用于基层兽医部门进行副鸡禽杆菌的快速检测。; 梅晨李淑芳徐玉智张培君龚玉梅王宏俊; 关键词：副鸡禽杆菌 RRNA 环介导等温扩增

副鸡禽杆菌的分离鉴定被引量：7: 2015年; 副鸡禽杆菌（Avibacterium paragallinarum）是鸡传染性鼻炎的病原菌。早在1920年,Beach首先报道鸡传染性鼻炎,1932年De Blieck就首次分离到该菌,并将其命名为鸡嗜血红蛋白鼻炎芽孢杆菌,在后来的很长一段时间内都称之为副鸡嗜血杆菌。Blaclall于2005年又将其重新命名为副鸡禽杆菌^（[1]）。本病的发病特点是潜伏期短、传播迅速,短时间内便可波及全群。; 李淑芳龚玉梅王宏俊张培君; 关键词：育成鸡血清型鉴定革兰染色细菌分离

副猪嗜血杆菌单因子血清的制备被引量：1: 2014年; 利用副猪嗜血杆菌(Hps)的15个血清型的参考菌株分别制备相应的兔抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,得到15个血清型的单因子血清,不同血清型的单因子血清不与其他血清型抗原发生反应。应用这15种单因子血清对临床分离到的9株副猪嗜血杆菌进行血清型的鉴定,结果表明,其中6株为5型,2株为4型,1株为7型。; 路明华王雪敏李淑芳路迎迎张培君龚玉梅王宏俊; 关键词：副猪嗜血杆菌

绵羊卵母细胞核成熟、卵丘扩展与激素浓度关系的研究被引量：2: 2012年; 为了研究绵羊卵母细胞核成熟、卵丘扩展与激素浓度的关系,利用不同激素浓度处理卵丘-卵母细胞复合体(COCs)并记录不同激素浓度处理下的卵母细胞核成熟率和卵丘扩展率.结果表明:E2可显著提高卵母细胞核成熟率(P<0.05),但并不影响卵丘扩展率;E2可显著提高卵丘扩展的卵母细胞成熟率(P<0.05),但不影响卵丘未扩展的卵母细胞核成熟率;卵母细胞核成熟和卵丘扩展之间没有相互依赖的关系,但在一定激素浓度条件下卵母细胞核成熟率和卵丘扩展率成正比.E2对绵羊卵母细胞核成熟的调节作用可能不由卵丘细胞介导,而是直接作用于卵母细胞;绵羊卵丘扩展可能与卵丘细胞自回分泌的卵丘扩展因子有关;在激素浓度一定的条件下,绵羊卵丘扩展率可以作为卵母细胞核成熟率的判定标准.; 林雍峰赵兴绪张勇赵国顺李淑芳; 关键词：绵羊激素

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