李劲松
- 作品数：29 被引量：20H指数：3
- 供职机构：上海科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科委重大科技攻关项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 核移植与供体细胞被引量：2
- 2009年
- "多莉"羊的诞生是生物界的一个里程碑,它之所以引起如此大的轰动主要是因为它来源于培养的成年绵羊乳腺上皮细胞,这是人类第一次证明分化的体细胞可以被重编程后恢复全能性并最终分化发育成一个动物个体。这说明哺乳动物分化的体细胞核仍具有全套的遗传物质并能够被卵母细胞逆转恢复全能性。然而,关于多莉的供体细胞来源却一直是克隆领域的一个谜。由于体细胞克隆的效率非常低,而用于核移植的供体细胞悬液中往往含有多种类型的细胞,这使得我们很难确切地知道最终获得的克隆动物是来源于哪一种细胞。这种不确定性给我们研究核移植诱导体细胞重编程的机制带来了很大的困难,因此,对供体细胞的研究也是核移植研究领域的一个重要课题,这包括各种组织来源的体细胞是否均可以用于核移植,终末分化的体细胞是否能够用于核移植,组织干细胞是否更有利于体细胞重编程,供体细胞的分化状态是否与核移植的效率有关,死亡的体细胞是否也可以用于核移植等等。本文综述了核移植中与供体细胞相关的最新研究进展。
- 林江维李劲松
- 关键词：核移植供体细胞胚胎干细胞
- CRISPR-Cas9技术介导的白内障遗传疾病治疗
- 重编程与胚胎发育具有密切的关系，重编程的异常会导致胚胎发育的失败，研究重编程与胚胎发育的关系对揭示重编程机制、发展和完善重编程方法、以及促进重编程方法在再生医学中的应用具有重要的意义。
- 李劲松
- 生殖干细胞介导的基因编辑
- 李劲松
- 细胞重编程与胚胎发育
- 重编程与胚胎发育具有密切的关系，重编程的异常会导致胚胎发育的失败，研究重编程与胚胎发育的关系对揭示重编程机制、发展和完善重编程方法、以及促进重编程方法在再生医学中的应用具有重要的意义。我们针对重编程与胚胎发育的关系，开展...
- 李劲松
- 关键词：细胞重编程核移植胚胎发育
- “人造精子”介导基因编辑技术的建立与应用被引量：1
- 2019年
- "人造精子",即小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞,是一种可在体外长期培养扩增和进行遗传操作的细胞,因其具备胚胎干细胞自我更新和多向分化的特性,并拥有代替精子使卵母细胞"受精",产生半克隆小鼠的能力,而被广泛应用于生命科学研究的各个领域。与CRISPR-Cas9技术相结合,"人造精子"能够同时实现细胞水平和动物水平的复杂基因编辑,因此可作为一个有力的研究工具。本文就"人造精子"技术的建立与改进、在基因编辑方面的应用,以及全基因组标签计划的提出与进展展开综述。
- 张麟李劲松
- 不同年龄小鼠精原干细胞系的建立
- 2014年
- 精原干细胞（spennatogonial stem cells，SSCs）是雄性动物体内能进行终生自我更新并能将亲代基因遗传给予子代的一类细胞。不同年龄段的小鼠有不同的建系方法。6-7d幼鼠，可以用差异贴壁或直接贴壁法；5-6周成年鼠，一般采用差异贴壁法；31周老年鼠，最好种于饲养层细胞上。通过对精原干细胞系的甲基化和特异基因分析以及睾丸体内移植验证分析，成功建立了具有功能的不同年龄段的小鼠精原干细胞系。
- 周海伍春莲李劲松
- 关键词：精原干细胞睾丸体外培养
- “人造精子”与CRISPR-Cas被引量：1
- 2015年
- 小鼠单倍体胚胎干细胞系的建立为遗传学的正反向筛选提供了一种简便而又有效的工具。除此之外,孤雄单倍体胚胎干细胞能替代精子使卵母细胞"受精"这一特性,更是实现了从细胞水平向动物水平的完美转变。无论是从制备多基因遗传操作动物模型的角度,还是在小鼠个体水平遗传筛选的层面,孤雄单倍体胚胎干细胞的出现都将为基因功能学研究带来新的生命力。然而,孤雄单倍体的"受精"能力极其有限,其产生健康半克隆小鼠的效率仅约2%,这也成为孤雄单倍体在个体水平广泛应用所面临并且亟需突破的一大瓶颈。通过正反面的实验验证,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所李劲松课题组发现,雄性印记区域H19-DMR和IG-DMR的异常去甲基化是半克隆小鼠发育异常的"祸根"。通过敲除这两个DMR,成功将半克隆小鼠的出生效率提高至20%,为利用孤雄单倍体获得多基因遗传操作动物模型提供了最根本有力的保障。最后,结合CRISPR-Cas9技术,他们创建了孤雄单倍体的sg RNA文库,并成功将此"细胞文库"转化成携带基因突变的"小鼠文库",由此创建了"个体水平"遗传筛选的新方法、新思路。
- 钟翠青李劲松
- 关键词：胚胎干细胞系发育异常单倍体水平向
- microRNAs和体细胞重编程被引量：3
- 2010年
- 体细胞重编程与microRNAs(miRNAs)均为近年来研究的热点问题。到目前为止,能成功诱导体细胞形成多能性干细胞的体细胞重编程方法有核移植(nuclear transfer,NT)和外源因子诱导形成多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSc)两种,这两种方法让人们看到了体细胞重编程在细胞治疗方面具有诱人的应用前景。miRNAs是真核生物中存在的一类长度为22nt左右起调控作用的内源性非编码RNA,它在转录后水平调节靶基因的表达,是细胞内基因表达的基本调控机制之一。近年的研究结果表明,miRNAs在干细胞干性维持和分化过程中具有重要的调节作用,从miRNAs角度研究体细胞重编程机理将对体细胞重编程的应用具有重要意义。
- 张璇金由辛李劲松
- 关键词：核移植体细胞重编程MIRNAS
- 一种孤雄单倍体胚胎干细胞及其制备与应用
- 本发明涉及一种孤雄单倍体胚胎干细胞及其制备与应用。本发明提供了一种孤雄单倍体胚胎干细胞，所述孤雄单倍体胚胎干细胞的H19 DMR及IG‑DMR被敲除。本发明还进一步提供了所述孤雄单倍体胚胎干细胞的制备方法，以及所述孤雄单...
- 李劲松吴宇轩钟翠青尹奇谢振飞白梅竹
- 文献传递
- 一种高通量蛋白质分析方法及其适用文库
- 本发明涉及生物领域，提供了一种高通量蛋白质分析方法及其适用文库。本发明的高通量蛋白质分析方法，为采用带标签的半克隆小鼠文库，以一个或数个标签蛋白抗体对多个不同感兴趣目标蛋白进行平行指示分析，所述带标签的半克隆小鼠文库中，...
- 李劲松蒋婧白梅竹晏萌康俊炎李林李党生
- 文献传递
