张建业
- 作品数:91 被引量:345H指数:10
- 供职机构:山东大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学政治法律社会学更多>>
- 分枝杆菌的分子生物学诊断被引量:6
- 2002年
- 分枝杆菌生长缓慢,传统方法分离、鉴定和药敏试验需几周或更长的时间,导致诊断与治疗延误。近年来,PCR、探针杂交、DNA测序等分子生物学方法已用于分枝杆菌的直接检测、鉴定以及分析耐药突变,极大缩短了诊断时间。
- 李婧王怀明张建业
- 关键词:结核病分枝杆菌分子生物学
- VP-16诱导PC-3细胞凋亡和p53基因表达的研究被引量:2
- 2000年
- 目的 研究VP16 诱导雄激素非依赖型前列腺癌细胞PC3 凋亡和抑癌基因p53 表达的关系。 方法 以末端标记法(TUNEL) 和流式细胞术(FCM) 研究PC3 细胞凋亡及细胞周期分布;以免疫组化方法研究p53 蛋白的表达。 结果 末端标记法显示凋亡的PC3 细胞呈明显的形态学改变,流式细胞术和免疫组化检测结果表明,随VP16 作用浓度的增加和作用时间的延长,PC3 细胞的凋亡率和其p53 基因表达阳性的细胞百分率逐渐增高。 结论 VP16 能够诱导PC3 细胞凋亡和增加p53 基因表达,且具有作用浓度和作用时间依赖性。
- 李登欣张建业张莲英何维敬
- 关键词:前列腺肿瘤细胞凋亡P53基因表达
- 中国汉族群体RhD阴性个体D基因外显子多态性研究被引量:27
- 2001年
- 目的 研究中国汉族 Rh D阴性 [Rh D(- ) ]个体 Rh血型系统 D基因 8个外显子的构成情况。方法 应用聚合酶链反应 -序列特异性引物 (PCR- SSP)方法 ,对 5 0名汉族人 Rh D(- )个体 RHD基因及 RHCE基因进行了研究。扩增 RHD基因的第 2、3、4、5、6、7、9、10外显子和内含子 4,以及 RHCE基因的第 1、2、4、5外显子和内含子 4。结果 5 0名 Rh D(- )供者的 Rh表型为 ccdee2 2人 ,Ccdee2 2人 ,ccd Ee3人 ,Ccd Ee3人。在表型为 ccdee或 ccd Ee的 2 5人中 ,D基因 8个外显子全部缺失 ;在表型为 Ccdee或 Ccd Ee的 2 5人中 ,RHD基因则表现出多态性 :9人存在全部 D基因 8个外显子 ,7人缺失全部 D基因 8个外显子 ,5人存在 D基因第 2外显子 ,3人存在 D基因第 6外显子 ,1人存在 D基因第 2、6、10外显子。结论 中国汉族 Rh D(- )个体 D基因外显子具有多态性。 Rh表型为 cc的个体 D基因 8个外显子全部缺失 ,在表型为 Cc的个体中观察到 5种 D基因多态性。中国汉族人 D基因结构不同于高加索人 ,故在应用 RHD基因定型结果时 。
- 徐群张世训张建业司桂玲宋永红王玫李京王潍聂向民
- 关键词:聚合酶链反应-序列特异性引物RH-HR血型系统基因定型汉族群体
- VP-16诱导PC-3细胞凋亡和bcl-2及c-myc基因表达的研究被引量:1
- 2000年
- 目的 研究 VP- 1 6诱导 PC- 3细胞凋亡和癌基因 bcl- 2及 C- myc表达的关系。方法 用末端标记法(TUNEL )和流式细胞术 (FCM)研究 PC- 3细胞凋亡 ,以免疫组化方法研究 bcl- 2及 C- myc蛋白的表达。结果 TUNEL和FCM检测表明 ,PC- 3细胞的凋亡率随 VP- 1 6作用浓度增加和作用时间延长而升高 ;免疫组化结果显示 :bcl- 2和 c- myc基因表达的阳性百分率随 VP- 1 6作用浓度增加和作用时间延长而降低。结论 VP- 1 6能够诱导 PC- 3细胞凋亡和抑制其bcl- 2和 c- myc基因的表达 ,且具有作用浓度和作用时间依赖性。
- 李登欣董素芹张建业张莲英何维敬
- 关键词:细胞凋亡PC-3细胞BCL-2基因
- 人同源盒基因NKX3·1对前列腺癌细胞的诱导凋亡作用被引量:7
- 2006年
- 构建人同源盒基因NKX3·1cDNA真核表达载体,研究其在前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中的表达及对细胞的促凋亡作用.以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RT-PCR扩增NKX3·1基因全长编码片段,将NKX3·1cDNA重组到真核表达载体pcDNA3·1(+)中;将pcDNA3·1-NKX3·1表达载体瞬时转染前列腺癌细胞PC-3和LNCaP细胞,用RT-PCR和Western印迹检测NKX3·1cDNA在转录水平和蛋白水平的表达;绘制细胞生长曲线,观察NKX3·1对前列腺癌细胞增殖的抑制作用;用DNA/ladder和流式细胞术检测NKX3·1对前列腺癌细胞凋亡的影响,进一步用RT-PCR检测凋亡相关基因caspase3、caspase8、caspase9、Apaf1、survivin和Bcl2表达的变化.人同源盒基因NKX3·1cDNA真核表达载体pcDNA3·1-NKX3·1经酶切及测序鉴定正确.pcDNA3·1-NKX3·1转染PC-3和LNCaP细胞后,经RT-PCR和Western印迹证明能有效表达NKX3·1.生长曲线显示,前列腺癌细胞转染NKX3·1cDNA后细胞增殖受到抑制;前列腺癌细胞转染NKX3·1cDNA48h后,DNA电泳呈现具有凋亡特征的DNAladder;流式细胞术检测出现明显凋亡峰;RT-PCR检测凋亡相关基因.结果显示,caspase3、caspase8、caspase9基因表达明显增加,Bcl2基因表达明显减少.本研究成功构建了真核表达载体pcDNA3·1-NKX3·1,转染PC-3和LNCaP细胞后能有效表达,并对细胞具有诱导凋亡作用.
- 刘闻闻于春晓崔福爱张鹏举陈蔚文胡晓燕姜安丽张建业
- 关键词:真核表达载体前列腺癌细胞细胞凋亡
- 山东省莒南县居民死亡状况分析
- 1997年
- 1995年山东省莒南县居民粗死亡率为5.47‰,年龄别死亡率呈形变化,15岁组死亡率最低。不同年龄组死因不同,影响居民健康的前3位死因依次为呼吸系统疾病、。心脑血管病及肿瘤,占全死因的74.55%。同时去除该3类主要死因后,男、女平均预期寿命分别增加14.63岁及13.20岁。前2位死因的死亡时间有较明显的季节性,均集中于冬季,其角均数分别为3O.03度及1.87度,分别相当于一年中的1.月30日和1月1日。为提高居民健康水平,必须重点防治危害人群健康的主要死因,对高危人群及高发季节尤应采取积极防治措施。
- 庞维秋张建业王淑艳
- 关键词:死亡率死因顺位
- 人NKX3.1基因启动子的克隆及在不同肿瘤细胞系中启动子活性的测定(英文)
- 2006年
- 目的:克隆NKX3.1基因启动子并检测其启动子活性,为研究NKX3.1基因转录调控的基本机制奠定基础。方法:采用PCR方法从人基因组中扩增NKX3.1基因上游1.04 kb启动子片段并分别克隆到报道基因载体pGL3-basic和pEGFP-1中,通过转染细胞、荧光素酶活性测定及荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,检测其启动子活性。结果:DNA测序结果证实克隆的1.04 kb启动子片段序列正确;pGL3-1.04 kb启动子转染LNCaP细胞后,双荧光素酶活性测定M1/M2=2.7,为pGL3-control活性的1.5倍,为pGL3-basic活性的50倍。表明克隆的人NKX3.1基因上游1.04 kb片段具有较强的启动子活性。为检测此1.04 kb启动子在不同组织细胞中的活性,分别将pGL3-1.04 kb启动子和pEGFP-1.04 kb启动子转染入不同的肿瘤细胞系,检测荧光素酶和绿色荧光蛋白的表达。结果显示1.04 kb启动子在前列腺癌细胞LNCaP中活性最高。采用TRANSFAC数据库分析,发现在1 040 bp片段内含有多种顺式作用元件,它们的功能性将需要进一步实验证明。结论:克隆的人NKX3.1基因上游1.04 kb片段具有较强的启动子活性,并且在前列腺癌细胞LNCaP中活性最高。
- 姜安丽张鹏举胡晓燕陈蔚文贺美兰孔峰张建业
- 关键词:启动子细胞系
- 前列腺特异抗原基因启动子RF15调节元件的初步研究
- 1996年
- 前列腺特异抗原(PSA)基因受雄激素调节,其雄激素应答元件(ARE)位于—170附近。ARE上游RF15序列的丢失和变异可降低雄激素对PSA基因的诱导作用。用RF15DNA片段和人前列腺肿瘤细胞LNcap或PC—3的核蛋白进行体外结合实验,结果表明RF15可与这些细胞中的某些调节蛋白结合。而且RF15对调节蛋白的结合能力受Zn^(2+)的影响。RF15可能是PSA启动子中的一个新的附属调节元件,与之结合的调节蛋白可能通过与雄激素受体的相互作用促进雄激素的诱导作用。
- 张建业庞维秋张莲英王鑫Y. F. Young
- 关键词:前列腺特异抗原雄激素前列腺癌启动子
- 9-顺维甲酸对人肺癌组织CyclinD1、Cdk4、P16转录的影响被引量:4
- 2003年
- 目的:检测9-顺维甲酸(9-cis-RA)处理前后体外培养的人肺癌组织及其对照组织细胞周期蛋白因子CyclinD1、细胞周期蛋白依赖性激酶Cdk4、细胞周期蛋白酶抑制因子P16转录水平的变化。探讨其抑制肺癌组织细胞生长的作用机制。方法:采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析CyclinD1、Cdk4、P16转录的变化。结果:9-cis-RA既可降低体外培养的人肺癌组织Cdk4的转录,又可升高其P16的转录。对肺癌组织和正常肺组织CyclinD1的转录的影响无统计学意义。对正常肺组织Cdk4、P16的转录的影响也无统计学意义。结论:9-cis-RA抑制肺癌组织细胞增殖的作用机理与其调节Cdk4、P16的转录有关。
- 贺美兰刘晓黎戴洪海胡国强张建业于雪艳
- 关键词:维甲酸CDK4P16细胞周期蛋白
- 尿液Ⅳ型胶原与尿微量蛋白变化预测糖尿病早期肾脏损害的临床价值被引量:11
- 2005年
- 目的探讨尿液Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)与尿微量蛋白变化预测糖尿病(DM)患者早期肾脏损害的临床价值。方法根据微量尿白蛋白/肌酐(mA lb/C r)比值,将72例DM患者分为正常白蛋白尿组(A组)、微量白蛋白尿组(B组)和大量白蛋白尿组(C组),检测各组尿Ⅳ-C、mA lb、转铁蛋白(TRF)和α1-微球蛋白(α1-M G)含量,分析Ⅳ-C/C r与mA lb/C r、TRF/C r、α1-M G/C r的相关性。结果A组尿Ⅳ-C/C r高于正常,B、C组尿Ⅳ-C/C r、mA lb/C r、TRF/C r和α1-M G/C r均显著高于正常(P<0.05,<0.01)。DM各组比较,C组各项指标显著高于B组,B组显著高于A组(P<0.05,<0.01)。Ⅳ-C/C r与mA lb/C r、TRF/C r、α1-M G/C r呈显著性正相关(r分别为0.3237、0.3749、0.4328)。结论尿Ⅳ-C作为DM患者早期肾脏损伤的敏感指标优于尿微量蛋白,尿Ⅳ-C/C r、mA lb/C r、TRF/C r和α1-M G/C r进行性升高反映肾脏损害程度,联合检测对预测DM早期肾脏损害的发生和进展具有重要意义。
- 王谦孙淑玉展凤霞张建业王立水
- 关键词:糖尿病早期肾脏损害微量白蛋白Α1-微球蛋白