张士宝
- 作品数：12 被引量：17H指数：2
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- 表达NT4-SAC-HA2-TAT融合肽的重组腺伴随病毒载体的构建及鉴定
- 研究背景及目的：
前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见恶性肿瘤，近年来发病率迅速增加。雄激素阻断疗法是前列腺癌各个阶段最主要的治疗手段之一。但是，多数前列腺癌在平均12～18个月后逐渐对雄激素阻断疗法失去反应，转变为...
- 张士宝
- 关键词：融合肽重组腺病毒载体
- 文献传递
- 人肾癌鸡胚模型的建立及其肿瘤生物学特性的研究被引量：7
- 2012年
- 目的建立人肾癌鸡胚模型,探讨其形态及生物学特性。方法将肾癌细胞系RLC-310接种于鸡胚绒毛尿囊膜,观察影响肾癌鸡胚移植瘤成活的因素、移植瘤生长特性、形态学特征和生物学性状。结果成功建立了人肾癌鸡胚移植瘤模型;移植瘤易于生长并具有较强的血管诱导作用;光镜下移植瘤具有与人肾癌类似的组织结构。结论该模型容易建立,能动态观察肾癌诱导血管生成的全过程,可用于肾癌的实验研究。
- 张斌阮喜云陈杰张士宝刘双庆王全颖杨广笑刘庆勇
- 关键词：肾癌鸡胚绒毛尿囊膜动物模型血管生成
- SAC重组腺相关病毒载体的构建及其对前列腺癌CAM移植瘤的抑制作用被引量：1
- 2012年
- 目的构建携带NT4-SAC-HA2-TAT融合基因的重组腺相关病毒载体,并感染前列腺癌鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)移植瘤,观察目的基因前列腺凋亡反应基因-4(par-4)选择性癌细胞凋亡结构域(SAC)的表达及其对CAM移植瘤的生长抑制作用。方法利用磷酸钙共沉淀法将包装质粒pAAV/Ad、腺病毒辅助质粒pFG140及重组穿梭质粒pSSCMV/NT4-SAC-HA2-TAT共转染293细胞,制备重组腺相关病毒(rAAV),斑点杂交法检测病毒滴度。取孵育9 d龄健康鸡胚,CAM接种前列腺癌细胞系PC-3细胞,建立前列腺癌的CAM移植瘤模型,接种3 d后挑选成瘤鸡胚随机分为3组:空白对照组(PBS),空病毒组(AAV)和重组病毒组(rAAV),观察瘤体生长情况,上述处理4 d后测量比较不同组移植瘤体积,并切片染色病理检查。免疫荧光法检测移植瘤中SAC融合肽的表达。结果酶切鉴定结果证实成功构建pSSCMV/NT4-SAC-HA2-TAT,斑点杂交法检测重组病毒滴度约为3.34×1010～3.34×1011cfu/mL。免疫荧光法证实SAC融合肽表达。移植瘤能在CAM上生长,可见瘤周围丰富毛细血管汇集,rAAV组瘤体显著缩小,病理HE染色可见瘤细胞局限及侵袭抑制。结论成功构建SAC重组腺相关病毒载体并感染前列腺癌CAM移植瘤,重组病毒表达分泌的SAC融合肽对前列腺癌CAM移植瘤具有诱导细胞凋亡、抑制肿瘤细胞侵袭性增殖等作用。
- 于张健张士宝刘庆勇阮喜云杨广笑王全颖
- 关键词：重组腺相关病毒鸡胚绒毛尿囊膜雄激素非依赖性前列腺癌移植瘤
- 男性原发性膀胱颈梗阻的尿动力学特点被引量：2
- 2013年
- 目的评价原发性男性膀胱颈梗阻的尿动力学表现。方法回顾性分析23例男性原发性膀胱颈梗阻之尿动力学改变，包括尿流率、残余尿量及多通道尿动力学检查，并结合排尿期膀胱尿道造影、膀胱镜检查进行分析。结果所有病例尿流率异常，可表现为最大尿流率降低，尿流曲线为钟型达峰时间延长或低平型。压力-流率检查可出现三型：高压-低流、正常压-低流、低压-低流，膀胱颈开放时间延迟在三型中均有出现。结合排尿期膀胱尿道造影、膀胱镜检查分析对确定诊断有重要意义。结论普通尿动力学检查对原发性膀胱颈梗阻可作出初步诊断，明确诊断需结合排尿期膀胱尿道造影。
- 李宗武张龙洋贾淑丽杨伯平郭峰张士宝吴衍麟王岳勇
- 关键词：膀胱颈梗阻尿动力学
- 腔内手术治疗双输尿管畸形合并上尿路结石
- 2015年
- 目的探讨双输尿管畸形合并上尿路结石腔内手术治疗的临床效果。方法回顾性分析2006年3月-2014年10月我科确诊并治疗的37例双输尿管畸形合并上尿路结石患者的临床资料,其中完全重复输尿管14例,不完全重复输尿管23例。合并肾结石7例,输尿管结石30例。本组37例患者均行腔内碎石术,其中15例行经皮肾微造瘘碎石术,22例行输尿管镜下碎石术。结果本组行输尿管镜下碎石术的22例中,20例碎石成功,2例因输尿管狭窄,其中1例应用6.3/7.5F输尿管镜碎石成功,1例改行经皮肾微造瘘碎石术取净结石。行经皮肾微造瘘碎石术的15例患者,除2例术后复查有残石（〈0.7 cm）外,其余患者均清除结石。所有患者无输尿管穿孔、撕脱、断裂、大出血、胸膜及肠道损伤发生。结论对于双输尿管畸形合并上尿路结石患者,腔内手术安全、有效。
- 李宗武张士宝刘双庆周蕾郭峰张龙洋
- 关键词：泌尿生殖系统畸形重复输尿管输尿管镜检查
- 长链非编码RNA PCGEM1促进前列腺癌细胞增殖的实验研究
- 目的： 去势抵抗性前列腺癌目前尚无有效的治疗方法，是前列腺癌致死的重要原因，迫切需要寻求新的治疗策略。关于PCGEM1在前列腺癌中的生物学作用及其参与的分子机制，目前尚不清楚。本研究主要通过检测PCGEM1在前列腺癌组...
- 张士宝
- 关键词：前列腺癌病理机制基因表达细胞增殖
- hTRX-PR39融合基因cDNA克隆的构建及鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的研究人硫氧还蛋白(hTRX)和抗菌肽PR39基因在脑缺血疾病治疗中的作用,构建hTRX-PR39cDNA融合基因。方法设计合成PR39、hTRX正向和反向引物,采用PCR方法,扩增获得两端具有BamHI和Ecor721、Eco721和EcoI酶切位点的PR39 cDNA和hTRXcDNA片段,并分别克隆到pGEM-Teasy中,转化细菌,筛选阳性克隆,酶切鉴定并测序。BamHI和EcoR721双酶切pGEM-T-hTRX和pGEM-T-PR39,将获取的PR39/BamHI,EcoR721片段克隆到pGEM-T-hTRX/BamHI,EcoR721载体中,构建pGEM-T-hTRX-PR39载体。结果经DNA测序证实,修饰过的hTRXcDNA、PR39 cDNA片段的核酸序列和推导的氨基酸同数据库资料一致。重组质粒pGEM-T-hTRX-PR39酶切图谱证实hTRX-PR39融合肽cDNA已克隆到pGEM-T表达载体中。结论成功克隆出具有EcoR721和EcoRI、BamHI和EcoR721酶切位点的hTRXcDNA和PR39 cDNA片段,并构建pGEM-T-hTRX-PR39载体。
- 阮喜云毕建忠刘庆勇张士宝杨广笑王全颍
- 关键词：脑缺血硫氧还蛋白基因融合
- NT_4-SAC-HA_2-TAT融合基因表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的构建NT4-SAC-HA2-TAT融合肽cDNA克隆,探讨前列腺凋亡反应基因-4(Par-4)核心区凋亡肽(SAC)作为目的基因对前列腺癌的治疗作用。方法应用互为引物模板法合成两端具有NaeI和KpnI酶识别位点的SACcDNA片段。将所得SAC和已有HA2-TAT片段克隆到具有相应酶切位点的pBV220-NT4质粒,得到pBV220-NT4-SAC-HA2-TAT重组质粒。PCR扩增NT4-SAC-HA2-TATcDNA片段,并将其克隆到pGEM-T easy中,转化细菌筛选阳性克隆,酶切鉴定,序列测定分析。结果经DNA测序、限制性内切酶酶切等证实,PCR获得了编码NaeI和KpnI酶切位点的SAC cDNA片段,并将NT4、SAC、HA2-TAT亚克隆于pBV220内。结论成功构建了NT4-SAC-HA2-TAT融合基因的原核表达载体pBV220-NT4-SAC-HA2-TAT。
- 张士宝刘庆勇阮喜云陈杰张建军李宗武杨广笑王全颖
- 关键词：融合肽基因疗法
- NT4-TAT-6×His-VHLβ结构域肾癌抑制融合肽cDNA克隆的构建被引量：2
- 2009年
- 目的构建VHL蛋白(von Hippel-Lindau protein,pVHL)β结构域肾癌抑制融合肽cDNA,并将其应用于肾癌的微基因治疗。方法分别设计合成pVHLβ结构域104-123短肽cDNA的正向和反向引物以及编码TAT-6×His cD-NA的正、反向引物,使用互为引物模板PCR方法,扩增获得具有NaeI/Eco72I酶识别位点的TAT-6×His cDNA片段和具有Eco72I/BamH I酶识别位点的VHLβ抑制肽cDNA片段,将两个片段分别克隆到pGEM-T easy中,使用双脱氧终止法测序,通过DNASIS软件分析同数据库资料一致性和编码的氨基酸序列。用NaeI和BamH I双酶切获取的TAT-6×His-VHLβcDNA片段插入到具有NT4信号肽的pBV220载体中,构建了pBV220-NT4-TAT-6×His-VHLβ质粒。结果经DNA测序证实,获得了编码TAT-6×His cDNA片段和编码VHLβ抑制肽的cDNA片段,分析证实核酸序列和推导的氨基酸同数据库资料一致。重组质粒pBV220-NT4-TAT-6×His-VHLβ酶切图谱证实已将NT4-TAT-6×His-VHLβ融合肽cDNA克隆到pBV220原核表达载体中。结论成功扩增了编码TAT膜渗透肽和6×His标签肽以及VHL抑癌基因β结构域肾癌抑制肽的cDNA片段,构建了具有NT4信号肽的TAT-6×His-VHLβ融合肽cDNA。
- 陈杰刘庆勇阮喜云张士宝张建军李宗武杨广笑王全颖
- 关键词：融合肽微基因
- CT滚动图像诊断输尿管中、下段结石的价值被引量：3
- 2012年
- 目的探讨CT滚动图像在输尿管中、下段结石诊断中的价值。方法回顾性分析2009年7月-2011年12月在本院就诊螺旋CT平扫33例可疑输尿管中、下段结石患者，在CT显示器上通过滚动图像进一步诊断并通过输尿管镜验证。结果33例患者均通过输尿管镜得到证实。结论对于可疑输尿管中、下段结石，CT滚动图像对明确诊断具有重要意义。
- 李宗武郭峰张士宝王岳勇贾淑丽张龙洋杨伯平
- 关键词：输尿管结石
