崔晓云 作品数:8 被引量:26 H指数:2 供职机构: 首都医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
GM-CSF作为Ⅱ型登革病毒E蛋白免疫佐剂的免疫效果观察 2017年 目的观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)作为II型登革病毒E蛋白免疫佐剂的保护效果,评估GM-CSF作为蛋白疫苗免疫佐剂的可行性。方法提取GM-CSF质粒(pCAG-GM)、将表达II型登革病毒E蛋白的重组质粒(E/pGEX-6P-1)进行诱导,表达产物用亲和层析纯化。将BALB/c小鼠随机分为E蛋白组、佐剂组(E蛋白+GM-CSF)和对照组进行免疫,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗体终点效价;采用蚀斑减少中和试验(PRNT)检测II型登革病毒中和抗体水平;酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测小鼠免疫后细胞因子的水平;用攻毒试验观察各组小鼠保护率。结果 E蛋白组和佐剂组小鼠血清中抗体终点效价、中和抗体水平均在免疫后有一定的升高,差异无统计学意义(P>0.05);佐剂组细胞因子(IFN-γ和IL-10)水平较E蛋白组均有明显上升,差异具有统计学意义(P<0.05);但攻毒试验显示,佐剂组小鼠全部死亡,生存率为0,而E蛋白组的小鼠保护率为33%。结论 GM-CSF免疫佐剂可抑制II型登革病毒E蛋白的免疫保护作用,其作为蛋白疫苗免疫佐剂仍需慎重。 崔晓云 房树玉 范东瀛 吴艳花 安静关键词:登革病毒 E蛋白 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 佐剂 抗Ⅱ型登革病毒蛋白抗体的制备和特点分析 2015年 本研究旨在制备和鉴定小鼠抗Ⅱ型登革病毒(DENV‐2)10种蛋白的抗体,为后续相关研究提供实验材料。利用真核表达载体pReceiver构建DENV‐210种蛋白的重组质粒,提取质粒 DNA ,肌内注射免疫小鼠,共免疫4次。末次免疫后2周取小鼠血清,利用DENV‐2感染的Vero细胞和DENV‐2各蛋白的稳定表达细胞,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光法(IFA)和蛋白免疫印迹法评价免疫效果,分析抗体的特点。DNA免疫小鼠后获得抗DENV‐210种蛋白的抗血清,抗体效价波动于1∶400~1∶16127之间,以抗E蛋白抗体效价最高,达1∶16127,而抗NS3、NS4b、NS5蛋白抗体效价较低,仅为1∶400。利用DENV‐2感染的Vero细胞和稳定表达病毒蛋白的EAhy926细胞进行IFA染色,抗DENV‐2各蛋白的抗血清均可特异性识别DENV‐2抗原。蛋白免疫印迹结果显示,抗E、NS1、NS4b和NS5蛋白抗体能识别热变性蛋白,其他抗血清未呈现阳性反应条带。本研究提示,DNA免疫小鼠所获得的抗DENV‐2各蛋白抗体能特异性识别自然感染或模拟自然感染状态下的DENV‐2蛋白,可为后续相关研究提供工具,也表明DNA免疫法可作为抗体制备的一种策略。 魏建春 崔晓云 吴娜 安静关键词:登革病毒 结构蛋白 非结构蛋白 抗体 登革病毒和登革热 被引量:16 2014年 登革热(Dengue fever,DF)是由登革病毒(Dengue virus,DV)引起的一种虫媒传染病,主要在热带亚热带地区流行,全世界将近一半的人口有罹患DF的风险。DF在临床上分为DF和重症登革(severe Dengue),后者包括登革出血热(Dengue hemorrhagic fever,DHF)和登革休克综合征(Dengue shock syndrome,DSS)。每年重症登革病例达500 000例,其中大多数患者为儿童。2014年DF在我国的南方地区出现历史上最严重的疫情,对人类健康和社会经济造成了严重损失。为此,本文对DV和DF的概况作一综述,供广大同行参考。 崔晓云 吴艳花 安静关键词:登革热 登革病毒 Ⅱ型登革病毒prME及NS1-2aDNA的免疫原性及免疫保护作用的研究 登革病毒(dengue virus,DENV)为黄病毒属单股正链RNA,感染后可引起登革热,登革出血热和登革休克综合征。病毒基因组共编码10 种蛋白,其中prME 蛋白和NS1 蛋白在病毒感染和免疫中起到重要作用。 崔晓云 房树玉 吴艳花 安静关键词:登革病毒 免疫原性 GM-CSF在Ⅱ型登革病毒E蛋白免疫中的作用 目的:探讨粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)作为免疫佐剂对登革病毒E蛋白免疫保护的影响,评估GM-CSF作为免疫佐剂的多面性。方法 实验共设3组,分别为E蛋白组、E蛋白+pCAG-GM组(表达GM-CSF)和对... 崔晓云 房树玉 范东瀛 吴艳花 安静关键词:登革病毒 E蛋白 GM-CSF 登革病毒包膜蛋白的原核表达及免疫原性研究 被引量:2 2014年 登革病毒感染引起的登革热和登革出血热/登革休克综合征是目前流行最为广泛的虫媒病毒病,但其发病机制不明,也无疫苗和特异性抗病毒药物用于防治。登革病毒包膜蛋白(E蛋白)在病毒致病和免疫过程中发挥重要作用。本研究构建了登革病毒2型E蛋白基因的重组质粒E/pGEX-6P-1,并优化表达条件,获得登革病毒E蛋白的高效可溶性表达;用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和层析柱纯化,获得纯度较高的蛋白。该蛋白具有较好的免疫原性,免疫小鼠后可获得高效价抗体。本研究为进一步了解登革病毒E蛋白的功能及其在相关疾病中的应用奠定了基础。 房树玉 吴艳花 崔晓云 范东瀛 安静关键词:登革病毒 包膜蛋白 原核表达 免疫原性 寨卡病毒分子生物学特征与寨卡病毒病的主要临床症状 被引量:8 2018年 寨卡病毒病(Zika virus disease,ZVD)是由寨卡病毒(Zika Virus,ZIKV)感染引起的一种发热性自限性疾病,近几年来ZVD疫情在全球呈现暴发的势态,由“无名小卒”迅速成长为严重威胁全球公共卫生的“主力”。本文拟对ZIKV的流行病学特点,生物学特征以及引起的主要临床症状进行综述,以期为广大临床工作者在诊断ZIKV感染时做一提示。 崔晓云 吴艳花 安静关键词:分子生物学特征 临床症状 病毒病 流行病学特点 自限性疾病 Ⅱ型登革病毒prME及NS1-2a DNA的免疫原性及免疫保护作用的研究 登革病毒(dengue virus,DENV)为黄病毒属单股正链RNA,感染后可引起登革热或登革出血热和登革休克综合征.病毒基因组共编码10种蛋白,其中prME蛋白和NS1蛋白在病毒感染和免疫中起到重要作用.本研究旨在探... 崔晓云 房树玉 吴艳花 安静关键词:登革病毒 免疫原性