- 含线粒体促凋亡蛋白基因人膀胱移行上皮特异性表达载体的构建及表达被引量:1
- 2006年
- 目的构建含线粒体促凋亡蛋白基因(Smac)、人尿路斑块蛋白Ⅰb(UpⅠb)启动子调控的真核表达载体,检测其在膀胱癌细胞的表达。方法MluI+XbaI分别双酶切含Smac的真核表达质粒pcDNA3.1-Smac和UpⅠb启动子片段,T4DNA连接酶环化目的片段构建新质粒,酶切凝胶电泳和测序鉴定。新质粒转染12孔BIU-87细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测6孔的Smac mRAN表达,免疫组织化学过氧化酶标记的链霉卵白素(SP)法检测另6孔的Smac蛋白表达。结果pcDNA3.1-Smac中人巨细胞病毒启动子(CMV)和T7噬菌体启动子(T7)被成功替换为UpⅠb启动子,构建新质粒pcDNA3-UpⅠb promoter-Smac;转染后BIU-87细胞Smac mRNA表达增强2.1倍、71%癌细胞中Smac蛋白表达增强(P<0.05)。结论UpIb启动子调控含Smac的真核表达载体构建成功,且能在膀胱癌细胞中有效表达。
- 廖贵益曾甫清岳相辉汪良卢银平朱朝辉
- 关键词:线粒体促凋亡蛋白启动子真核表达载体
- 血小板反应素-1在前列腺癌患者中的表达
- 宋明山亓春花石运芝刘志峰阮政刘迅陈峰岳相辉孙新六赵爱华
- 前列腺癌是欧美国家男性高发肿瘤之一,随着诊断水平的提高,我国前列腺癌的发病率逐渐增高,但前列腺癌治疗措施局限,易于转移,五年生存率较低,因而对其发病机理进行进一步研究有重要意义。研究表明TSP-1在抑制前列腺癌细胞增殖方...
- 关键词:
- 关键词:前列腺癌血小板
- 重组pcDNA3-UpIb promoter-Smac质粒转染靶向膀胱癌的促凋亡效应被引量:1
- 2006年
- 目的:探讨转染新构建的UpIb启动子调控携Smac基因的真核表达质粒pcDNA3-UpIbpromoter-Smac对膀胱癌细胞的促凋亡效用。方法:用脂质体将质粒转染到膀胱癌BIU-87细胞系中,24h后用RT-PCR检测Smac的表达,以低剂量丝裂霉素C诱导凋亡,利用倒置光学显微镜、Wrighs-Gimesa染色、DNA凝胶电泳技术、TUNEL-荧光标记技术、流式细胞术检测凋亡。结果:丝裂霉素C处理的各组在倒置光学显微镜和Wrighs-Gimesa染色油镜下可见到典型的凋亡形态学改变,DNA凝胶电泳呈特征性的梯形条带。TUNEL-荧光标记技术及流式细胞术检测转染pcDNA3-UpIbpromoter-Smac组凋亡率显著高于单用丝裂霉素C组。结论:转染pcDNA3-UpIbpromoter-Smac能够通过提高Smac的表达而有效促进丝裂霉素C诱导的膀胱癌细胞凋亡,提示该质粒配合凋亡诱导药物可能成为膀胱癌新的靶向基因治疗手段。
- 廖贵益曾甫清岳相辉陆鹏
- 关键词:SMAC基因
- 膀胱移行细胞癌复发预测的研究
- 岳相辉宋明山牛瑞仙杨晓红阮政岳屹囡刘志峰陈峰
- 为提高膀胱移行细胞癌的疗效,改善患者的预后,减少复发,长期以来人们一直在研究影响其预后的主要因素,并试图寻找到一种简便易行的预测方法。文献报道的影响膀胱移行细胞癌保留膀胱手术后复发的因素主多为单因素分析,对各因素间的复杂...
- 关键词:
- 关键词:膀胱移行细胞癌复发预测术后复发
- 中国人Uroplakin Ib组织特异性研究及其启动子的克隆与鉴定
- 目的:研究中国人Uroplakin Ib的组织特异性并克隆与鉴定其启动子。方法:RT-PCR检测32 例膀胱癌、16例正常膀胱粘膜、15例正常小肠粘膜、16例正常食道粘膜、19例正常肾实质、20例正常肝实质、8例正常皮肤...
- 曾甫清廖贵益岳相辉卢银平董继华
- 关键词:启动子组织特异性
- 文献传递
- 尿路斑块蛋白Ib启动子启动Smac表达的膀胱癌特异性及活性被引量:2
- 2005年
- 目的:研究尿路斑块蛋白Ib启动子启动Smac表达的膀胱癌特异性及活性。方法:采用RT-PCR和免疫组化方法分别检测膀胱癌细胞株BIU-87和其他多种非膀胱癌细胞株在转染含尿路斑块蛋白Ib启动子和Smac基因的真核表达质粒pcDNA3-UpIb promoter-Smac前后Smac mRNA和蛋白质的表达变化。结果:BIU-87在转染后Smac mRNA的表达比转染前增强约2.1倍,Smac蛋白表达阳性细胞率也由转染前的约25.6%增加为转染后的约70.5%;非膀胱癌细胞株转染前后SmacmRNA及蛋白的表达没有显著性变化。结论:尿路斑块蛋白Ib启动子启动Smac表达具有膀胱癌靶向性及相当启动活性,为膀胱癌的靶向基因治疗研究奠定了基础。
- 廖贵益曾甫清岳相辉杜岳锋汪良
- 关键词:线粒体促凋亡蛋白膀胱癌膀胱肿瘤
- 细胞打印的可行性研究被引量:3
- 2006年
- 目的:探讨初步建立一个细胞打印系统,进行细胞无损伤打印的可行性。方法:常规培养人类宫颈癌细胞株Hela细胞,收获后做成细胞悬液代替喷墨封装入墨盒,改装喷墨打印机进行细胞打印,检测打印后细胞的活性,并与未经打印组细胞对照。结果:经过喷墨打印后细胞能够快速、精确的定位于目标区域,并且能够维持正常细胞形态、保持生物活力并继续生长、分裂增值。结论:细胞无损伤打印是可行的,为进一步的器官打印研究提供依据、探索方法。
- 岳相辉曾甫清陈宏翔杨晓红董继华
- 膀胱移行细胞癌复发预测的研究
- 目的:应用已建立的膀胱移行细胞癌复发预测的数学模型。预测肿瘤的复发,从而指导临床工作。材料方法:本组对象为泰安市中心医院医院2005年1月~2008年12月期间手术治疗的膀胱移行细胞癌中随访资料齐全的76
- 岳相辉宋明山阮政赵永伟
- 文献传递
- 单侧多功能外固定架治疗重度开放性胫腓骨折19例
- 2004年
- 岳相辉杨晓红尹彦军
- 关键词:外固定架胫腓骨折疗效观察
- 中国人尿路斑块蛋白Ib组织特异性及其启动子的克隆与鉴定
- 2005年
- 目的:研究中国人尿路斑块蛋白Ib的组织特异性并克隆与鉴定其启动子。方法:RT-PCR检测32例膀胱癌、16例正常膀胱粘膜、15例正常小肠粘膜、16例正常食道粘膜、19例正常肾实质、20例正常肝实质、8例正常皮肤及8例正常心肌标本中尿路斑块蛋白Ib的表达。以人正常膀胱粘膜为材料提取基因组DNA,克隆尿路斑块蛋白Ib启动子片段,并凝胶电泳和测序鉴定。结果:所有正常膀胱粘膜标本、16例分化Ⅰ级膀胱癌中有15例(93.8%)、9例分化Ⅱ级膀胱癌中有7例(77.8%)、7例分化Ⅲ级膀胱癌中有4例(57.1%)检测到尿路斑块蛋白Ib表达,而正常食道粘膜、小肠粘膜、肾实质、肝实质、皮肤、心肌标本均未检测到尿路斑块蛋白Ib表达。中国人尿路斑块蛋白Ib234bp的启动子被克隆并完成鉴定。结论:中国人尿路斑块蛋白Ib具有高度尿路移行上皮特异性,加上其启动子短小,尿路斑块蛋白Ib启动子非常适合膀胱癌的靶向基因治疗研究。我们成功克隆出中国人尿路斑块蛋白Ib启动子片段,为后续研究奠定了基础。
- 曾甫清廖贵益岳相辉卢银平董继华
- 关键词:膀胱肿瘤克隆基因表达