孔蕴
- 作品数：17 被引量：27H指数：3
- 供职机构：山东大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人N-乙酰半乳糖胺转移酶Ⅲ(huGALNT3)的异源表达及抗体制备
- 糖链及其缀合物具有重要的生理作用和病理意义。肿瘤细胞中的糖链与正常细胞相比有明显变化。糖链的合成没有模板，而是通过一系列定位有序的糖基转移酶完成的，糖基转移酶表达差异将直接导致糖链结构的变化。因此，从糖基转移酶入手可以从...
- 孔蕴
- 文献传递
- 蛋白糖基化修饰在结直肠癌发病及治疗中的作用
- 2023年
- 结直肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一,发病率和死亡率居高不下。蛋白糖基化修饰异常是人类肿瘤的普遍特征,在肿瘤的发病、发展和治疗等过程中具有重要作用。肿瘤的特异性糖基化修饰异常可以被应用于肿瘤的筛查、病理分期和治疗等。本综述通过对结直肠癌中特异性的异常糖基化修饰、糖基化为基础的结直肠癌诊断和病理分期生物标记物,以及糖基化修饰在结直肠癌治疗中的作用进行总结,为进一步研究结直肠癌的发病机制、新型肿瘤筛查生物标记物和治疗靶点提供参考。
- 孔德才王圣钧孔蕴
- 关键词：结直肠肿瘤肿瘤分期
- 环丙沙星单克隆抗体的制备和性质鉴定被引量：1
- 2010年
- 为了制备抗环丙沙星单克隆抗体,首先采用碳二亚胺法合成了环丙沙星与载体蛋白偶联的免疫抗原和包被抗原,免疫BALB/c小鼠,取效价最高的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,HAT培养基筛选,有限稀释法克隆化,获得1株稳定分泌抗环丙沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株。检测结果显示,杂交瘤细胞染色体数目平均102条,培养上清的效价为1∶1.28×103,单抗腹水效价达1∶1.024×106,IC50为68.31 ng/mL,属于IgM型,轻链kappa,CI-ELISA法显示单抗对环丙沙星有高度的选择性,提示获得的单抗可望用于环丙沙星残留物的免疫化学检测。
- 顾黎孔蕴刘围郜海涛郗日沫王鹏
- 关键词：环丙沙星药物残留单克隆抗体
- 新一代生物芯片“糖芯片”的制备与应用
- 糖链是继蛋白质、核酸之后的第三条生命之链,是一种极为重要的信息分子,所承载的生物信息比核酸和蛋白质大几个数量级。糖类的功能与目前很多生命科学的研究热点息息相关,比如受精过程及生长发育、糖尿病及肿瘤等疾病、各种病毒的感染与...
- 王鹏陈敏张厚程刘军刘现伟房俊强孔蕴
- 文献传递
- 一株重组大肠杆菌及其在制备抗志贺氏菌的糖疫苗中的应用
- 本发明公开了一种能表达痢疾志贺氏菌1型病原菌的脂多糖合成酶基因簇的重组大肠杆菌，该菌含有痢疾志贺氏菌1型病原菌rfb基因簇中的rfbR(rhamnosyltransferase)，rfbQ(rhamnosyltransf...
- 陈敏孔蕴曲亚军
- 糖蛋白的生物酶法合成及糖基化位点对糖蛋白疫苗的影响
- 在自然界中,糖可以与蛋白质、脂类形成糖蛋白、糖脂等各种糖缀合物,参与多种生命过程,如信号转导、细胞间的相互作用和免疫应答等。糖缀合物,已经成为药物研发和疫苗开发的重要靶点,在预防和治疗疾病中发挥着重要作用。糖缀合物合成最...
- 陈敏马中瑞李江胡发远王圣钧孔蕴王鹏
- 文献传递
- 重组人GALNT3-sol蛋白在毕赤酵母中的高效表达和活性鉴定
- 2012年
- 目的:为了获得有催化活性的人乙酰半乳糖胺转移酶3(GALNT3),构建了GALNT3可溶性区域(GALNT3-sol)的真核分泌表达载体,在巴斯德毕赤酵母中表达并纯化GALNT3-sol蛋白,体外检测其转糖基活性。方法:以构建好的pET15b/GALNT3-sol为模板进行PCR,扩增编码人GALNT3-sol的cDNA片段(1 755 bp),将其克隆至真核表达载体pPIC9K,载体线性化后采用电击法转化毕赤酵母GS115。通过MD平板和G418平板筛选出阳性高拷贝重组菌株。阳性菌株经过甲醇诱导表达人GALNT3-sol重组蛋白,表达上清进行Ni-NAT分离纯化。分别采用SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化的重组蛋白,并使用HPLC和MALDI-TOF/MS分析其转糖基化反应的活性。结果:成功构建了能够分泌表达GALNT3-sol的毕赤酵母菌株。阳性表达菌株在BMMY培养基(pH 6.0)中20℃培养,经0.5%甲醇诱导表达96 h,摇瓶表达量可达5mg/L。SDS-PAGE和Western blot结果显示表达重组蛋白为糖基化形式。活性检测显示表达的重组蛋白具有转糖基活性。结论:成功获得可以高效分泌表达具有活性的人GALNT3-sol蛋白的毕赤酵母菌株,为进一步研究人GALNT3的性质及其应用提供了基础。
- 孔蕴郜海涛李树芳王鹏顾国锋顾黎
- 关键词：毕赤酵母分泌表达活性
- 单克隆抗体药物的研究进展被引量：17
- 2008年
- 通过淋巴细胞杂交瘤技术或基因工程技术制备单克隆抗体药物,已经成为生物制药领域的一个重要方面,由于单克隆抗体药物专一性强、疗效显著,因此成为近年来研究的热点药物之一。此文就单抗药物的分类、应用进行了综述,并对其应用前景及存在的不足作了概述。
- 潘萌孔蕴陈畅顾黎
- 关键词：单克隆抗体药物抗肿瘤靶向
- 人GALNT3-sol蛋白的原核表达和抗体制备被引量：3
- 2011年
- 目的:构建人乙酰半乳糖胺转移酶3可溶性区域(GALNT3-sol)的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化GALNT3-sol蛋白,制备小鼠抗人GALNT3-sol多克隆抗体,并对抗体的基本特性进行了检测。方法:RT-PCR扩增编码人GALNT3-sol的cDNA片段(1755bp),将其克隆至原核表达载体pET15b中,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,诱导表达人GALNT3-sol重组蛋白。将变性、复性和电泳纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗血清。分别采用ELISA和Western blot检测抗体的效价和特异性。结果:成功构建了pET15b/GALNT3-sol原核表达载体,转化BL21(DE3)后可高效表达重组蛋白GALNT3-sol,获得的小鼠抗人GALNT3-sol多克隆抗血清效价达1∶25600,并有良好的特异性。结论:成功获得人GALNT3-sol蛋白,得到了效价和特异性良好的小鼠抗人GALNT3-sol抗体,为进一步研究人GALNT3在肿瘤组织中的表达提供了可靠的材料。
- 孔蕴郜海涛李树芳王鹏顾黎
- 关键词：大肠杆菌多克隆抗体
- 一种糖苷内切酶在水解高甘露糖型N-糖蛋白中的应用
- 本发明属于生物技术领域，涉及一种糖苷内切酶在水解高甘露糖型N‑糖蛋白中的应用。所述糖苷内切酶能够识别并水解高甘露糖型N‑糖蛋白；所述糖苷内切酶为Endo‑LB，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；水解温度为4～60...
- 孔蕴王圣钧毛伟安
