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DNA甲基化在热休克诱导细胞周期素D1表达水平降低中的转录调控机制被引量：1: 2012年; 目的研究DNA甲基化在热休克诱导的人细胞周期素D1基因启动子活性下降调控中的作用。方法 DNA甲基化通过甲基化特异性PCR方法检测。甲基化位点突变采用Stratagene公司定点突变试剂盒。甲基化位点的作用通过报告基因技术分析启动子活性确认。结果热休克处理可能造成细胞周期素D1基因启动子+65/67位点发生DNA甲基化,而突变该位点逆转了由报告基因活性分析研究的热休克效应。结论启动子+65/67位点的DNA甲基化可能调控细胞周期素D1的热休克效应。; 郭志义郝小惠高雯雯姜雪莲赵丹丹陈远杨方; 关键词：DNA甲基化甲基化特异性PCR 热休克细胞周期素D1

细胞周期素D_2启动子曲古菌素A效应区域的研究: 2011年; 目的研究在曲古菌素A(trichostatin A,TSA)处理条件下细胞周期素D2的调控机制。方法细胞周期素D2的mRNA水平通过RT-PCR方法检测。细胞周期素D2的启动子片段以A549细胞基因组DNA为模板,通过高保真PCR扩增获得,并克隆到pGL3-BASIC载体中;并以此为基础通过高保真PCR扩增出不同长度的启动子片段。启动子相对活性通过萤火虫酶报告基因方法确定。结果在TSA处理条件下,细胞周期素D2的mRNA水平上升。共构建4个以不同长度细胞周期素D2启动子片段驱动的报告基因质粒,分别命名为pGL3-1816CD2-LUC、pGL3-1358CD2-LUC、pGL3-720CD2-LUC和pGL3-524CD2-LUC。在TSA处理条件下,启动子活性的变化在-524 bp删切质粒时消失。结论 TSA条件下细胞周期素D2 mRNA水平上升是启动子依赖的;细胞周期素D2启动子的TSA效应区域在-720～-524 bp之间。; 郭志义郝小惠田炜谭菲菲姜雪莲李潇婷胡倩倩杨方; 关键词：启动子报告基因曲古菌素A

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姜雪莲