周飞
- 作品数：10 被引量：19H指数：3
- 供职机构：汕头大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 15例Xp22.3微缺失/微重复胎儿的临床诊断和分子遗传学分析
- 2024年
- 目的:探讨Xp22.3微缺失/微重复的基因型与临床表型的相关性。方法:对15例SNP-array检测结果为Xp22.3微缺失/微重复病例的分子遗传学特征、临床表型和随访信息进行回顾性分析。结果:15例Xp22.3微缺失/微重复胎儿中,8例为微缺失病例(8/15),片段大小165~5.1Mb,片段内基因包括SHOX、ARSE、STS、ANOS1、NLGN4X、GPR143等30个OMIM基因,其中SHOX、ARSE、STS、ANOS1为单倍剂量不足基因。7例(7/15)为微重复病例,片段大小为229~1.7Mb,片段内基因包括SHOX、ARSE、ANOS1、STS、NLGN4X、GPR143等23个OMIM编码基因,不含三倍剂量敏感基因。8例微缺失病例中7例诊断为致病性拷贝数变异(CNV),1例诊断为临床意义不明(VOUS);7例微重复病例均诊断为VOUS。15例胎儿中7例(7/15)超声发现异常特征,其中四肢短小3例(3/7),唇腭裂1例(1/7),心血管异常1例(1/7),侧脑室增宽1例(1/7),鼻骨缺如1例(1/7)。对12例病例进行了亲本来源验证,5例(5/12)为母源性遗传,3例为父源性遗传(3/12)。15病例中4例(4/15)微缺失选择终止妊娠,1例稽留流产,均为男性胎儿;10例(10/15)选择继续妊娠,除1例新生儿左耳听力受损外,其余随访均无异常。结论:Xp22.3微缺失因涉及SHOX、ARSE、STS、ANOS1等单倍剂量敏感基因,为致病性CNV,表现为生长发育迟缓、软骨发育不全等症状。Xp22.3微重复无三倍剂量敏感基因,定义为VOUS,胎儿妊娠结局良好。当SNP-array诊断为Xp22.3微缺失/微重复时,应对其基因组信息与临床表型相关性进行分析,为孕妇提供指导。
- 李双武周飞丛潇怡姚瑶罗小金刘维强
- 关键词：染色体拷贝数变异
- 高转移潜力食管癌细胞株的建立及其生物学特征被引量：2
- 2007年
- 目的建立具有高转移潜力食管癌细胞株并研究其生物学特征。方法将食管癌细胞系EC109细胞悬液异位移植到SCID小鼠胃壁,约3个月后或动物濒临死亡时处死,行病理学解剖,将肉眼可见的纵隔淋巴结转移瘤块接种于SCID鼠皮下扩增,然后取小鼠皮下瘤组织块进行细胞培养,得到性状稳定的细胞株NMC109后,用MTT法分析细胞生长曲线,Western bloting法检测与细胞分裂增殖能力密切相关的TopoIIα表达,酶谱法检测MMP-2和MMP-9的活性,划痕实验和Transwell体外移动实验检测细胞的移动能力。结果与母本细胞EC109相比,所获得的细胞株NMC109其增殖能力和TopoIIα表达明显增强,MMP-9的活性明显升高,移动能力明显增强。结论获得了具有高转移潜力的食管癌细胞株。
- 谢仰民周飞谢剑君蔡唯佳许丽艳李恩民
- 关键词：食管癌肿瘤侵袭肿瘤转移细胞株
- 76例外周血性染色体异常核型及临床表型的研究分析
- 2024年
- 目的探讨外周血性染色体异常核型与临床表型的相关性。方法选择2013年1月至2023年5月于深圳市龙岗区妇幼保健院就诊的第二性征发育异常或不良孕产史的5652例患者,以其中行外周血染色体核型分析诊断为性染色体核型异常的76例患者作为研究对象,分析性染色体异常与临床表型的相关程度。结果5652例患者中有76例(1.3%)性染色体异常核型,其中性染色体数目异常25例(32.9%,25/76),主要包括47,XXY、47,XXX、45,X、48,XXYY,其临床主要表现为相应的综合征表型,47,XXY和45,X患者生殖器与第二性征发育异常明显。性染色体结构异常13例(17.1%,13/76),主要包括X或Y长臂或短臂缺失、等臂X染色体、衍生X染色体等,X长臂末端缺失表现为卵巢早衰、月经异常,X短臂末端缺失表现为身材矮小,Y长臂缺失表现为无精子症。性染色体异常核型嵌合34例(44.7%,34/76),其中性染色体数目异常嵌合的有23例,性染色体结构异常嵌合的有11例;异常核型嵌合的类型及比例不同,临床表型差异比较大。性反转4例(5.3%,4/76),2例46,XY的社会性别为女性,2例46,XX的社会性别为男性,临床表现为不孕不育、无精子症。雄激素受体(AR)基因的突变导致核型为46,XY的患者表现为女性社会性别。结论性染色体核型异常与临床表型,如不孕不育、原发性闭经、卵巢早衰、身材矮小、无精子症、少精子症等密切相关。对外周血性染色体异常患者进行早期诊断和临床分析,可为患者的治疗干预和进一步的孕育计划提供理论建议。
- 牛宏艳刘维强陈晓杭周飞姚瑶罗小金郭岩芸
- 关键词：性染色体核型分析性反转临床表型
- 1q21.1微缺失综合征18例患者的临床表型及分子遗传学分析
- 2024年
- 目的探讨18例1q21.1微缺失病例的表型特征和单核苷酸多态性微阵列(SNP array)的检测结果。方法选取18例于2017年6月至2022年12月在深圳市龙岗区妇幼保健院确诊为1q21.1微缺失综合征的病例作为研究对象,收集其临床资料。对所有病例进行1q21.1微缺失及G显带染色体核型分析。结果在18例样本中,断裂点位于BP3和BP4区域之间者13例;位于BP1/BP2和BP4之间者4例;位于BP2和BP3之间者1例,后者为1q21.1近端缺失,涉及血小板减少伴桡骨缺失综合征(TAR)的区域。上述缺失片段约360 kb~3.9 Mb,包含CHD1L、RBM8AB、GJA5、GJA8等致病基因。溯源为1q21.1微缺失病例与既往报道的病例缺失范围一致,但临床表型正常或仅轻度异常,与已报道的病例存在差异。在18例1q21.1微缺失病例中,有认知或行为缺陷者9例(9/18,50.0%),生长发育迟缓者8例(8/18,44.4%),头面部畸形者7例(7/18,38.8%),心脏结构异常者5例(5/18,27.8%),小头畸形3例(3/18,16.7%)。结论18例1q21.1微缺失综合征患者具有不完全外显和表现度差异,可出现智力障碍、生长发育迟缓、小头畸形等表型,其表型具有广泛的非特异性。
- 罗小金牛宏艳周飞李双武李振明郭岩芸
- 关键词：拷贝数变异
- HeLa细胞中ezrin基因主要转录调控区的定位分析被引量：4
- 2008年
- 目的:鉴定ezrin基因在HeLa细胞中的主要转录调控区,初步研究ezrin基因的转录调控机制。方法:采用嵌套缺失技术构建一系列以ezrin基因翻译起始位点上游不同长度DNA序列作为报告基因启动子的重组pGLB质粒,利用双荧光素酶报告基因分析系统检测启动子的转录活力,并利用在线分析程序预测ezrin基因主要转录调控区的潜在转录因子结合位点。结果:获得一系列含不同长度ezrin基因5′侧翼区序列的重组pGLB质粒;当ezrin基因5′侧翼区序列从-1324截短到-890时,转录活力降低约80%,从-146截短到-32时,转录活力几乎完全丧失;在-1324/-890和-146/-32区,存在大量的Sp1转录因子结合位点。结论:在HeLa细胞中,ezrin基因的-1324/-890和-146/-32区是主要的转录调控区。Sp1可能是调控基因转录的重要转录因子。
- 高书颖许丽艳崔磊周飞郭张燕蔡唯佳李恩民
- 激活转录因子3的过表达对食管癌细胞生长的抑制作用被引量：1
- 2009年
- 背景与目的:激活转录因子3(activating transcription factor 3,ATF3)在食管癌中表达异常下调,但其功能仍不清楚。本研究拟探讨ATF3在食管癌细胞过表达对癌细胞生长及裸鼠成瘤的影响。材料与方法:利用分子克隆技术将ATF3基因完整编码区克隆至真核细胞表达载体pcDNA3中,获得重组表达质粒;将该表达质粒转染食管癌EC109细胞并用G418筛选稳定表达的细胞克隆;用Western blot检测ATF3的过表达效果;对ATF3过表达的细胞与相应对照细胞进行细胞克隆形成实验和裸鼠体内成瘤实验,以分析ATF3过表达对食管癌细胞生长的影响。结果:ATF3的过表达在体外可以降低食管癌细胞的克隆形成能力;在体内可以抑制食管癌细胞在雌鼠中的成瘤能力,但对雄鼠中的成瘤能力没有明显影响。结论:ATF3的过表达可以抑制食管癌细胞的生长,ATF3可能在食管癌的发生发展中发挥重要作用。
- 谢仰民谢剑君周飞侯健曹君君许丽艳李恩民
- 关键词：食管癌细胞生长
- NGAL蛋白诱导食管癌细胞发生自噬被引量：4
- 2009年
- 以往研究证明,中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)与食管癌密切相关,改变NGAL表达能够对癌细胞的形态结构产生明显影响,但确切的作用机制不明.在酵母细胞中表达NGAL蛋白,柱层析分离纯化.筛选NGALR(NGAL receptor)高表达与弱表达的人食管癌细胞系EC1.71和EC109作为实验细胞模型.5-FAM标记NGAL蛋白,加入到细胞培养上清中,对比研究NGAL蛋白入胞情况、细胞形态学改变、细胞自噬体产生、自噬相关基因表达、细胞内铁离子与铁蛋白水平以及相关细胞信号转导激酶的活性等.结果表明,NGAL蛋白可经由内吞途径进入食管癌细胞发挥作用,致使细胞发生典型的自噬性形态结构变化,自噬体大量产生,自噬相关基因的表达发生相应变化,ERK被激活,但细胞内的铁离子与铁蛋白未受明显影响.上述结果提示,诱导细胞发生自噬是外源性NGAL蛋白经由内吞途径进入食管癌细胞发挥作用的机制之一,与NGAL蛋白跨膜转铁未见直接关联,而ERK信号转导途径可能参与了这一过程.
- 张丕显方王楷许丽艳蒋纪恺沈忠英杜则澎陆晓峰周飞谢剑君吴炳礼崔有宏谢东李恩民
- 关键词：NGAL自噬细胞周期食管癌细胞
- ezrin基因在几种癌细胞中的表达及其5′侧翼区序列转录活性的鉴定被引量：6
- 2008年
- 目的检测ezrin基因在几种癌细胞中的表达及其5′侧翼区序列的转录活力,探讨ezrin基因在癌细胞的表达调控机制。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法检测ezrin基因在食管癌细胞EC109、EC171、EC8712、SHEEC,胃癌细胞N87、BGC823,肺癌细胞A549、95D,肝癌细胞HepG2,白血病细胞K562和宫颈癌细胞HeLa中的mRNA和蛋白表达水平;采用PCR法构建以ezrin基因翻译起始位点上游-1444/+134序列为启动子的真核细胞表达质粒pGLB-hE(-1444/+134);采用双荧光素酶报告基因分析系统检测-1444/+134序列在EC109、Hela、A549和BGC823细胞中的转录活力。结果ezrin基因在食管癌等几种癌细胞中均有高表达,其5′侧翼区-1444/+134序列具有较强的转录活力。结论ezrin基因5′侧翼区序列的转录活性可能对ezrin基因的几种癌细胞中的高表达起重要作用。
- 高书颖许丽艳孟令英崔磊周飞李恩民
- 关键词：EZRIN基因逆转录聚合酶链反应WESTERNBLOT检测
- 两种食管鳞癌细胞系增殖和侵袭能力的比较研究被引量：3
- 2010年
- 目的:研究两种来源不同的食管鳞癌细胞系EC109和KYSE510分裂增殖能力和侵袭能力的差异。方法:利用MTT实验和侵袭实验,在体外分别检测EC109和KYSE510细胞的分裂增殖能力和侵袭能力;采用裸鼠皮下接种实验和爪垫皮下接种淋巴结转移模型,比较两种细胞在体内的成瘤能力、局部侵袭能力和区域淋巴结转移能力的差异;免疫印迹检测上皮-间充质细胞转换标志蛋白E-cadherin、γ-cadherin和Vimentin在两种细胞中的表达水平。结果:体外实验表明,EC109细胞的分裂增殖和侵袭能力均明显较KYSE510细胞的强(P<0.05);皮下接种和爪垫皮下接种淋巴结转移实验显示EC109细胞的成瘤能力、局部侵袭能力和淋巴结转移能力均较KYSE510细胞的高;免疫印迹检测发现,E-cadherin和γ-cadherin在EC109细胞中的表达水平较KYSE510细胞中的表达低,而Vimentin在EC109细胞中的表达则较KYSE510细胞中的表达高,提示EC109细胞发生上皮-间充质细胞转换的程度较KYSE510的高。结论:EC109细胞的增殖和侵袭能力均较KYSE510细胞的强,上皮-间充质细胞转换可能是导致这种差异的原因之一。
- 谢仰民董辉谢剑君吴智勇杜则澎李利艳许秀娥周飞陈涛石宏顺许丽艳李恩民
- 关键词：食管癌细胞细胞增殖细胞侵袭
- 产前诊断中鼻骨发育不良胎儿染色体拷贝数变异的临床诊断分析
- 2023年
- 目的探讨染色体微阵列分析(CMA)对孕中晚期产前胎儿鼻骨发育不良的染色体拷贝数变异(CNV)的临床诊断价值,为孕妇的科学妊娠提供理论依据。方法收集2018年9月-2022年6月在深圳市龙岗区妇幼保健院产前诊断中心进行超声检查,提示为鼻骨发育不良或合并其他超声异常的孕妇227例。行羊水穿刺或脐带血穿刺,进行CMA检测和传统核型分析。包括89例单纯胎儿鼻骨发育不良和138例胎儿鼻骨发育不良合并其他超声异常,比较这两组之间核型异常及拷贝数变异的检出率。结果核型分析在227例病例中检测到45例染色体异常(45/227,19.8%),包括31例21三体、7例18三体、2例46XX,del(4)(p16)、2例45,X综合征、1例47,XYY综合征、1例46,XY,del(5)(p15)和1例46,XY,del(22)(q12.1)。CMA额外检出9例致病性CNV胎儿和7例临床意义不明(VOUS)胎儿。单纯鼻骨发育不良病例与合并其他超声异常的病例比较,染色体核型异常的检出率差异有统计学意义(χ^(2)=0.78,P<0.05),染色体拷贝数变异的检出率差异无统计学意义(χ^(2)=0.31,P>0.05)。45例染色体异常和9例致病性CNVs胎儿选择终止妊娠;7例VOUS病例均选择继续妊娠,正常分娩后随访新生儿的临床表型均正常。结论CMA可有效检出核型正常的鼻骨发育不良胎儿的拷贝数变异情况,提供基因组与临床表型相关性,为产前遗传咨询中准确评估胎儿鼻骨发育不良预后和决定是否继续妊娠提供理论依据。
- 罗小金丛潇怡温丽娟刘金星曾康强刘效伊牛宏艳周飞郭岩芸
- 关键词：产前诊断拷贝数变异
