刘志春
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EGFP-Cre重组酶真核表达重组质粒的构建及表达被引量：1
- 2007年
- 目的构建噬菌体P1Cre重组酶真核表达重组质粒,检测其在体外的表达情况和生物学活性。方法利用分子克隆技术,将cre编码序列克隆到真核表达质粒pIRES2-EGFP上,构建为重组质粒pCMV-Cre-EGFP。行菌液PCR、BamHⅠ酶切及测序鉴定,用FuGENE6介导转染293T细胞,应用荧光显微镜和流式细胞仪观察分析Cre重组酶的表达和重组效应。结果经菌液PCR、酶切及测序等鉴定分析,证实已将目的片段cre插入pIRES2-EGFP的多克隆位点上;建立Cre(+)组(pCMV-Cre-EGFP和含Loxp-CMV-RFP-Loxp的pCSilencer质粒)和Cre(-)组(pIRES2-EGFP和pCSilencer),转染293T细胞,48h后荧光显微镜下可见2组均表达绿色荧光和红色荧光,Cre(+)组的红色荧光少于Cre(-)组;流式细胞仪检测荧光蛋白表达率,统计学分析显示2组细胞的红色荧光蛋白表达率存在显著性差异(P<0.01)。结论成功构建噬菌体P1Cre重组酶表达重组质粒,并能在体外表达具有活性的Cre重组酶。
- 李丽陈凌柯丹如刘志春江一平
- 关键词：基因发光蛋白质类
- EGFP-Cre重组酶真核表达重组质粒的构建及其表达
- 目的：构建含有报告基因 EGFP 的噬菌体 P1 Cre 重组酶真核表达重组质粒,检测其在体外的表达情况和生物学活性,为 Cre 转基因动物的制备及 Cre/ Loxp 系统在条件性 RNAi 干扰中的应用奠定基础。方法...
- 李丽陈凌柯丹如刘志春江一平
- 文献传递
- 精卵融合机制研究进展被引量：4
- 2008年
- 精卵融合是发生在有性生殖过程中最重要的事件之一,其分子机制至今还未完全阐明。基因打靶已经被证明是一个能够揭示细胞间相互作用候选分子功能的权威工具,以前通过抗体抑制试验认为介导了精卵融合的关键性分子因为基因功能的深入研究而被一一否定,如整合素、ADAM1、ADAM2、ADAM3。近年来作为参与精卵融合的候选分子,如CD9、Izumo、甘露糖受体等,已经引起广大研究者的关注。
- 刘志春江一平
- 关键词：精卵融合受精卵母细胞精子
- 人精子甘露糖受体的纯化及其肽质量指纹谱鉴定
- 受精机理是生命科学的重要理论课题，其阐明对生殖调控具有重大意义，然而受精的分子机制尤其是精卵融合机制，到目前为止并没有完全阐明，人精子甘露糖受体(Mannose receptor，MR)的提出和发现，为人类受精机制的阐明...
- 刘志春
- 关键词：生殖调控精卵融合
- 文献传递
