刘兆磊
- 作品数：4 被引量：43H指数：3
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省“十一五”科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- A群猪轮状病毒胶体金免疫层析试纸条的研制被引量：19
- 2008年
- 为建立一种快速、简便的猪轮状病毒检测方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗猪轮状病毒VP6蛋白单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上喷加纯化的抗猪轮状病毒VP6蛋白多克隆抗体和羊抗鼠IgG,制成检测猪轮状病毒抗原的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,所制备的试纸条用于检测猪轮状病毒感染的MA104细胞培养物,在检测线处出现红色反应带,未感染病毒的细胞培养物在检测线处未出现反应条带,上述培养物在质控线处均出现红色反应条带;进一步试验表明,试纸条检出病毒培养液(TCID50是10-6.25/0.1 mL)的最低限为1∶32稀释;用不同批次的试纸条重复检测,结果无差异;该试纸条不与相关的腹泻病毒猪传染性胃肠炎病毒、流行性腹泻病毒发生反应,所制备的试纸条具有一定的敏感性和特异性,重复性良好。
- 刘兆磊马广鹏姜艳平畅丹李一经
- 关键词：猪轮状病毒胶体金免疫层析试纸条
- 检测A群猪轮状病毒胶体金免疫层析试纸条的制备
- 猪轮状病毒感染在我国和世界各养猪国家普遍存在。快速准确地疾病监测是防治该病的前提条件,虽然轮状病毒检测有多种方法,但适用于现场对病原作出快速检测的方法还很有限,基于此本研究运用胶体金免疫层析技术,建立一种快速、简便、灵敏...
- 刘兆磊
- 关键词：猪轮状病毒胶体金免疫层析试纸条
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒S基因片段的原核表达及其表达产物的反应原性被引量：17
- 2009年
- 为了筛选反应原性较好的猪流行性腹泻病毒(PEDV)S基因片段,利用生物学软件对PEDV S基因进行了抗原位点分析,在不破坏线性抗原位点的前提下将S基因分为连续的4段进行表达,Western-blot检测表明,S1、Ps420、S2、S3蛋白都有很好的抗原性。纯化这4种蛋白,并免疫家兔,分别制备了S1、Ps420、S2、S3抗血清,间接ELISA检测结果显示,这4种抗血清都能识别细胞培养的PEDV,其中S1抗血清的反应性最好,其P/N值达到8.01,其次为Ps420抗血清。免疫荧光试验表明,S1、Ps420抗血清能识别天然的PEDV病毒粒子。提示,S1、Ps420抗血清在病原检测诊断中有一定的潜在应用价值。
- 姜艳平葛俊伟汪淼乔薪瑗唐丽杰刘兆磊李一经
- 关键词：猪流行性腹泻病毒重组蛋白病毒检测诊断试剂
- 猪流行性腹泻病毒重组核蛋白作为检测抗原的初步应用被引量：7
- 2008年
- 为确定猪流行性腹泻病毒(PEDV)重组N蛋白作为检测抗原的可应用性,将N基因克隆至pProHTa载体,构建重组表达载体,而后转化大肠杆菌BL21感受态细胞并诱导表达。将表达的可溶性融合蛋白经Ni+亲和层析柱纯化,并对其进行Western blot、dot-ELISA、间接ELISA等免疫学实验分析。结果表明,重组N蛋白具有良好的抗原性和较高的敏感性,与其他腹泻病病毒的抗血清无交叉反应。因此,猪流行性腹泻病毒重组N蛋白作为检测抗原在监测病毒感染及评价疫苗免疫效果方面具有较高的应用价值,是代替全病毒作为检测抗原的良好选择。
- 姜艳平葛俊伟汪淼刘兆磊裴敦国韩梓峰李一经
- 关键词：猪流行性腹泻病毒N蛋白诊断抗原
