刘伯华
- 作品数：8 被引量：106H指数：7
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 4株猪瘟流行野毒株病毒结构蛋白E2基因的核苷酸序列分析被引量：8
- 2001年
- 应用RT PCR和nPCR扩增由 4株甘肃省近期 ( 1997— 1998)猪瘟流行野毒株的E2基因 ,将其克隆到pGEM TEasy载体上 ,经转化、筛选、鉴定后 ,测出核苷核序列。 4株流行毒株的E2基因核苷酸序列同源性为 89.2 %— 99.7% ,相应的氨基酸序列同源性为 93 .8%— 99.0 %。这 4株流行毒株 ;与C 株 (疫苗种毒 )E2基因的核苷酸序列同源性为82 .2 %— 84.3 % ,相应的氨基酸序列同源性为 87.9%— 90 .2 % ,表明近期猪瘟流行毒株与C 株的 gp5 5蛋白之间存在一定的差异。
- 李明晖刘湘涛韩雪清侯文通赵启祖马军武刘伯华刘在新李健强李忠润谢庆阁
- 关键词：猪瘟E2基因核苷酸序列分析病毒结构蛋白
- 急、慢性猪瘟病毒分离株和疫苗株E2基因的序列分析被引量：16
- 2001年
- 利用反转录 (RT)及套式PCR(N -PCR)扩增并测定了 6株具有不同表症近期甘肃省猪瘟流行野毒及C -株细胞疫苗毒的主要免疫原E2基因的核苷酸序列。序列分析比较结果表明 ,6株流行野毒与C -株疫苗毒的核苷酸同源性为 82 %～ 84 % ,流行野毒之间的核苷酸同源性在 89%～99%之间 ,并且明显可分为二个组群 ,病毒株所属组群与其临床症状有一定的相关性。流行野毒与C -株毒在中和抗原决定簇上有部分氨基酸存在性质差异 ,可能影响C -株毒对流行野毒的中和滴度。
- 刘伯华刘湘涛韩雪清赵启祖李明晖谢庆阁
- 关键词：猪瘟病毒E2基因分离株疫苗株
- 传染性法氏囊病病毒X毒株不同代次的致病性及VP_2可变区序列分析被引量：7
- 2001年
- 分别以传染性法氏囊病病毒 ( IBDV) X毒株细胞适应的第 5代、第 1 1代和第 1 7代毒感染 38日龄非免疫雏鸡进行致病性试验 ,确定 X毒株的毒力 ,并比较 3个代次毒的致病性差异 ,进而利用 RT-PCR扩增其VP2 基因可变区 ,测定其核苷酸序列 ,从分子生态学角度研究了非鸡胚源细胞传代培养对 IBDV X毒株毒力和抗原性的影响。结果表明 ,IBDV X毒株表现为中等毒力 ,在 Vero细胞上传代后 ,其毒力有所减弱。VP2 可变区氨基酸序列有 3个位置发生了替换 ,即第 5代毒氨基酸残基 2 62位为半胱氨酸 ,而第 1 1代毒和第 1 7代毒则变为酪氨酸 ( Cys→ Tyr) ;第 5代毒的 2 90位为缬氨酸 ,而第 1 1代和第 1 7代毒则变为蛋氨酸 ( Val→Met) ;第 5代毒和第 1 1代毒的 31 6位为赖氨酸 ,而第 1 7代毒则变为精氨酸 ( Lys→Arg)。 2 90位氨基酸替换导致该区域二级结构的改变 ,并对 IBDV的抗原性有显著影响。上述结果提示 ,这些氨基酸残基可能对维持IBDV的毒力和抗原性是必要的。通过毒株间 VP2 可变区序列的比较和系统发生树的分析 ,证明 IBDV X毒株与 Bursin-2疫苗毒关系很近。
- 刘伯华李健强刘湘涛韩雪清薛登民赵启祖
- 关键词：传染性法氏囊病病毒
- 中国猪瘟兔化弱毒株(C-株)兔脾组织毒主要保护性抗原E2(gp55)基因序列分析被引量：16
- 2001年
- 利用反转录 (RT)及套式PCR(N PCR)方法扩增了中国猪瘟兔化弱毒株 (C 株 )兔脾组织毒主要保护性抗原E2 (gp55)基因 ,成功地将其克隆并测定了核苷酸序列 ,与国内外已发表的猪瘟病毒 (HCV)E2基因序列比较的结果是 :C 株兔脾毒与C 株细胞 (SK6)毒、C 株疫苗 (犊牛睾丸细胞 ,HCLV C)毒、HCV SM株 (石门 )毒、Brescia株 (荷兰 )毒、Alfort株 (德国 )毒的E2核苷酸序列同源性分别为 98 87%、98 34 %、94 58%、91 0 0 %、80 78% ;氨基酸同源性分别为 98 95%、97 37%、94 2 2 %、91 60 %、89 2 3%。对C 株兔脾毒与C 株细胞毒、经典强毒及国内流行野毒E2上的A、B、C三个中和性抗原区的氨基酸组成进行了比较 ,其结果为 :C 株兔脾毒与C 株细胞毒的差异很小甚至没有差异 ,而与流行野毒及经典强毒在B、C区有较大的差异。我国经典强毒石门毒与国内80年代和 90年代流行毒之间有明显的差异 ,表明我国猪瘟流行毒株发生了变化。
- 韩雪清李红卫刘湘涛李小兵马军武涂长春胡弘博殷震蒋帅刘伯华赵启祖李健强李忠润谢庆阁
- 关键词：猪瘟兔化弱毒株
- 猪瘟疫苗株与甘肃省流行野毒保护性抗原基因的差异分析
- 韩雪清刘湘涛赵启祖刘伯华马军武等
- 该研究通过对2个疫苗毒和10流行毒E2基因序列同源性的比较分析，通过对国内已发表的不同时期、不同地区毒株的序列比较，确认甘肃省正在流行的10个猪瘟病毒(1997-1998)属于基因型Ⅱ的二个不同的基因亚型，而C-株疫苗毒...
- 关键词：
- 关键词：保护性抗原基因猪瘟病毒分子流行病学
- 猪瘟病毒遗传发生关系分析被引量：55
- 1999年
- 利用反转录（ＲＴ）及ＰＣＲ扩增并测定了中国猪瘟兔化弱毒（Ｃ－株）兔组织毒、Ｃ－株细胞疫苗毒和近期（１９９７～１９９８年）甘肃省７个地区的１０个流行野毒株的Ｅ２基因核酸序列。通过序列比较和系统发生关系分析发现：Ｃ－株兔组织毒、Ｃ－株细胞毒和中国５０～６０年代流行的石门强毒株同属于组群１（Ｇｒｏｕｐ１）；近期猪瘟流行毒株同属于组群２（Ｇｒｏｕｐ２）的两个不同的亚组群（Ｓｕｂｇｒｏｕｐ２．１和２．２），其流行毒株与疫苗毒株有较大的差异（Ｅ２全基因核苷酸序列同源性８２．２％～８４．３％），表明猪瘟流行毒株向远离疫苗毒株的方向演变。
- 韩雪清刘湘涛赵启祖刘伯华马军武李明晖鄂承钧刘在新李健强李忠润谢庆阁
- 关键词：猪瘟病毒
- 中国猪瘟兔化弱毒兔脾组织毒部分基因序列分析被引量：10
- 1998年
- 利用反转录（ＲＴ）及套式ＰＣＲ（ＮＰＣＲ）方法，获得了中国猪瘟兔化弱毒（ＨＣＬＶ）兔脾组织毒５１１０个碱基（２２４０～７３５０）的扩增片段，包括其结构蛋白基因ｇｐ５５和非结构蛋白基因ｐ５４及ｐ８０，将其克隆于测序载体中，通过测序确定了这些基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列。
- 韩雪清李红卫刘湘涛李小兵马军武马军武胡弘博殷震涂长春刘伯华李健强殷震谢庆阁
- 关键词：猪瘟病毒基因
