黄锋涛
- 作品数：13 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华中农业大学水产学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 斑点叉尾鮰病毒多克隆抗体的制备及其生物活性的鉴定
- 本实验将纯化好的,从斑点叉尾鮰卵巢细胞增殖的斑点叉尾鮰病毒免疫四周龄BABL/C雌鼠,获得斑点叉尾鮰病毒粒子多克隆抗体,通过酶联免疫吸附试验检测其抗体效价,同时利用间接免疫荧光实验和血清中和试验检测所制备多克隆抗体的生物...
- 吴兵罗宇良王敏曹胜波王卫民陈龙黄锋涛刘学芹
- 关键词：多克隆抗体ELISA
- 斑点叉尾病毒囊膜蛋白ORF6在昆虫细胞中的表达被引量：4
- 2010年
- 为构建基于杆状病毒表达系统的CCV新型亚单位疫苗,将CCV的囊膜蛋白基因ORF6克隆至杆状病毒转座载体pFastBacTM 1质粒中,并将阳性重组转座质粒转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得重组子rBacmid-ORF6。在脂质体介导下将该重组子转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒AC-ORF6。AC-ORF6感染的sf9昆虫细胞,经超薄切片电镜观察,可见重组杆状病毒呈多粒包埋,经间接免疫荧光、Western-blotting检测,CCV的ORF6蛋白可以在感染了AC-ORF6的sf9细胞中表达。研究表明,获得了插入ORF6基因的重组杆状病毒,并且该基因可以在重组杆状病毒介导下在昆虫细胞中表达,从而为基于CCV ORF6的杆状病毒亚单位疫苗研究奠定了基础。
- 黄锋涛熊海林曹胜波熊传喜王敏王卫民吴兵刘玉林刘学芹
- 关键词：杆状病毒昆虫细胞
- 斑点叉尾鮰病毒“自杀性”DNA疫苗的构建及其体外表达检测
- 本研究根据CCV ORF6基因序列,设计合适的引物,扩增ORF6基因,分别将其克隆到"自杀性"DNA疫苗载体pSFV与常规DNA疫苗载体pcDNA3.1(+)中,转化感受态细胞DH5α后提取质粒,构建...
- 熊海林尹殿卯王卫民王敏李莉娟刘玉林刘学芹吴兵黄锋涛
- 关键词：DNA疫苗
- 斑点叉尾鮰病毒多克隆抗体的制备及其生物活性鉴定被引量：1
- 2011年
- 利用斑点叉尾鮰卵巢细胞增殖斑点叉尾鮰病毒,然后将经过超速离心纯化的病毒免疫4周龄BABL/C雌鼠。每2周免疫1次,第4次免疫2周后,经眼眶采血,分离血清,通过酶联免疫吸附试验检测其抗体效价,并利用间接免疫荧光试验和与病毒孵育试验检测所制备多克隆抗体的生物活性。结果表明,制备的多克隆抗体ELISA效价为1∶25 600,间接免疫荧光试验证明该多克隆抗体特异性良好,同时与病毒的孵育试验证明该多克隆抗体具备中和活性,能够有效阻断斑点叉尾鮰病毒对细胞的感染。
- 吴兵罗宇良王敏曹胜波王卫民陈龙黄锋涛刘学芹
- 关键词：多克隆抗体效价生物活性
- 草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白重组杆状病毒疫苗的构建及其体外表达检测
- 为了构建抗草鱼呼肠孤病毒(GCRV) VP6的重组杆状病毒载体疫苗,根据GCRV VP6基因序列,设计特异引物,扩增出带有His标签的VP6基因,构建重组杆状病毒转移质粒pFast-CMV-VP6.将重组转移质粒pFas...
- 黎琴黄锋涛曹胜波王敏王卫民刘学芹
- 斑点叉尾鮐病毒多克隆抗体的制备及其生物活性的鉴定
- 本实验将纯化好的,从斑点叉尾鮐卵巢细胞增殖的斑点叉尾鮐病毒免疫四周龄BABL/C雌鼠,获得斑点叉尾鮐病毒粒子多克隆抗体,通过酶联免疫吸附试验检测其抗体效价,同时利用间接免疫荧光实验和血清中和试验检测所制备多克隆抗体的...
- 吴兵罗宇良王敏曹胜波王卫民陈龙黄锋涛刘学芹
- 关键词：多克隆抗体ELISA
- 草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白重组杆状病毒疫苗的构建
- 黎琴黄锋涛曹胜波王敏王卫民刘学芹
- 重组杆状病毒表达SVCV G蛋白及其转导鱼类细胞的研究
- 鲤春病毒血症病毒(Spring Viremia0fCarp Vh'us,SVCV)属于弹状病毒科水泡性病毒属中的一员,该病毒可引起鲤鱼爆发鲤春病毒血症(Spring Viremia of Carp,SVC)。囊膜糖蛋白(...
- 黄锋涛
- 关键词：鲤春病毒血症病毒鱼类细胞
- 鲤春病毒血症病毒G蛋白在昆虫细胞中的表达及特性分析
- 本研究将连有鲤春病毒血症病毒(SVCV)G蛋白基因的重组转移质粒pFastBac-SVCV/G转化感受态细胞DH10Bac,获得重组子rBacmid-SVCWG.在脂质体介导下将该重组子转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病...
- 黄锋涛曹胜波熊传喜王敏王卫民黎琴刘学芹
- 关键词：G蛋白杆状病毒
- 斑点叉尾鮰病毒“自杀性”DNA疫苗的构建及其体外表达检测被引量：2
- 2011年
- 根据CCVORF6基因序列,设计合适的引物,扩增ORF6基因,分别将其克隆到"自杀性"DNA疫苗载体pS-FV与常规DNA疫苗载体pcDNA3.1(+)中,转化感受态细胞DH5α后提取质粒,构建斑点叉尾鮰(Ictalurus punc-tatus)"自杀性"DNA疫苗ps-ORF6与常规DNA疫苗pcd-ORF6,利用转化后的大肠杆菌菌液为模板进行PCR扩增、提取质粒酶切鉴定以及序列测定等方法证实重组质粒构建正确。将重组质粒转染人胚肾细胞(293T),间接免疫荧光试验表明ORF6均获得表达,但"自杀性"DNA疫苗的表达效果不如常规DNA疫苗,该研究为这2种疫苗进一步的鱼体试验奠定了基础。
- 熊海林尹殿卯王卫民王敏李莉娟刘玉林刘学芹吴兵黄锋涛
