陈立 作品数:34 被引量:11 H指数:2 供职机构: 第三军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 理学 更多>>
幽门螺杆菌黏附素A抗原H-2d(I-A)限制性免疫优势Th表位的筛选与鉴定 被引量:1 2012年 目的鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)黏附素A抗原(HpaA)H-2d限制性免疫优势Th表位,为H.pylori表位疫苗的研究提供候选表位。方法采用体外扩增的HpaA抗原特异性T细胞和步移重叠合成肽筛选鉴定HpaA抗原的免疫优势Th表位,再利用抗体阻断实验对其H-2d限制性进行分析。结果 18mer氨基酸肽段筛选发现肽段H154-171、H184-201、H190-207、H202-219和H220-237能够激发HpaA特异性CD4+T细胞产生γ-干扰素。其中H154-171激发的应答最强。13mer氨基酸短肽鉴定结果显示:仅H158-170能刺激产生强于18mer氨基酸短肽H154-171的应答反应。同时,抗体阻断试验结果表明:抗H-2d(I-A)抗体能有效阻断该表位激发的应答。结论 H154-171、H184-201、H190-207、H202-219和H220-237是HpaA的小鼠H-2d限制性Th表位,其中H154-171为免疫优势表位肽,该表位的核心氨基酸序列为H158-170,并存在H-2d(I-A)限制性。该研究将为H.pylori表位疫苗研究提供了可能的候选分子。 杨武晨 郭红 陈立 李滨 李宁一 章金勇 何亚非 胡健 吴超关键词:CD4+T细胞 金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的B细胞免疫优势表位鉴定及其表位疫苗研究 研究背景:金黄色葡萄球菌中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染危害严重,目前临床抗生素疗法已法完全控制MRSA感染,疫苗研制迫在眉睫,而目前尚无成功研制的有效MRSA疫苗.目的:系统筛选金黄色葡萄球菌肠毒素B(S... 赵卓 孙合强 魏珊珊 李滨 陈立 章金勇 曾浩 邹全明 吴超关键词:金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌肠毒素B B细胞表位 表位疫苗 金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的B细胞免疫优势表位鉴定及其表位疫苗研究 研究背景:金黄色葡萄球菌中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染危害严重,目前临床抗生素疗法已法完全控制MRSA感染,疫苗研制迫在眉睫,而目前尚无成功研制的有效MRSA疫苗。目的:系统筛选金黄色葡萄球菌肠毒素B(S... 赵卓 孙合强 魏珊珊 李滨 陈立 章金勇 曾浩 邹全明 吴超关键词:金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌肠毒素B B细胞表位 表位疫苗 文献传递 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的分段表达及免疫学性质分析 研究背景:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)是一种定植于胃内的微需氧菌,与慢性胃炎、消化性溃疡、和胃癌等多种疾病相关,世界卫生组织已将其列为一类致癌因子。尿素酶(Urease)是HP中含量最丰富的... 赵卓 陈立 罗萍 余抒 吴超 邹全明幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的分段表达及免疫学性质分析 被引量:1 2010年 目的分段表达幽门螺杆菌(HP)尿素酶B亚单位(UreB),并对其进行免疫学性质分析,为精确定位其保护性表位奠定基础。方法用生物信息学软件分析UreB全长基因,选择分段点,PCR分别扩增其5个片段,构建于pET-11c(+)原核表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析蛋白表达情况,ELISA及Western blot分别鉴定其免疫原性及抗原性。结果成功克隆了UreB的5个基因片段,基因测序结果与Genbank公布的序列一致.经SDS-PAGE分析,5个蛋白表达相对分子质量大小都与预期相符,在大肠杆菌中实现了表达。ELISA和Western blot分析显示,表达的5个蛋白表现出良好的抗原性和免疫原性。结论 UreB的分段表达为进一步研究UreB保护性表位及HP疫苗鉴定奠定了新的基础。 赵卓 陈立 罗萍 余抒 吴超 邹全明关键词:幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位 金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽及其制备方法和应用 本发明涉及金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽及其制备方法和应用,具体地,本发明提供一种金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO:17、35和42所示。其对应的核心表位的氨基... 吴超 赵卓 邹全明 李滨 孙合强 陈立 章金勇 魏姗姗 胡健 曾浩 王逸麟文献传递 重庆地区汉族人群HLA-DRB1等位基因多态性研究 被引量:2 2012年 目的了解中国重庆地区汉族人群人类白细胞抗原HLA-DRB1基因多态性及其分布特点。方法应用自行建立的聚合酶链式反应-测序为基础的分型方法(PCR-SBT)对190例重庆地区汉族人群进行HLA-DRB1基因分型和多态性分析。结果共检测出13种HLA-DRB1等位基因,20种等位基因型。其中,HLA-DRB1*09:01(29.1%)等位基因频率最高,其次为HLA-DRB1*04:05(12.2%)、HLA-DRB1*08:03(9.3%),基因频率最低的是HLA-DRB1*12:01、HLA-DRB1*12:02、HLA-DRB1*14:05和HLA-DRB1*15:02,各占1.26%。此外,检出的20种HLA-DRB1等位基因型在男女性别间无显著差异。结论成功建立并优化了HLA-DRB1的PCR-SBT基因分型方法;重庆地区汉族人群HLA-DRB1等位基因呈现多态性,为群体遗传和疾病关联的研究提供了可靠的遗传学数据。 李宁一 陈立 李滨 杨武晨 章金勇 毛旭虎 吴超 邹全明关键词:HLA-DRB1 PCR-SBT 基因多态性 汉族 筛选与鉴定幽门螺杆菌抗原表位肽的方法 本发明提供了一种筛选与鉴定幽门螺杆菌抗原HLA限制性免疫显性表位肽的方法。所述方法包括体外放大培养Hp抗原特异性T细胞的方法、抗原特异性T细胞体外应答的检测方法、利用抗原特异性T细胞结合抗原步移合成重叠肽来筛选免疫显性表... 吴超 邹全明 陈立 罗萍 石云 赵卓 余抒幽门螺杆菌抗原HLA限制性免疫显性表位肽及应用 本发明涉及一种幽门螺杆菌抗原HLA限制性免疫显性表位肽及应用。所述幽门螺杆菌HpaA抗原免疫显性表位多肽具有SEQ ID No:8、22、30和42所示的氨基酸序列。本发明所述多肽具有高免疫原性,可引发强烈的免疫反应。另... 吴超 邹全明 陈立 罗萍 石云 赵卓 余抒文献传递 幽门螺杆菌黏附素HLA-DRB1限制性CD4+T细胞表位的预测与鉴定 被引量:1 2014年 目的针对中国汉族高频HLA-DRB1基因型人群,预测与鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)黏附素蛋白A亚单位(neuraminyllactose-binding hemagglutinin,HpaA)CD4+T细胞表位。方法通过Allele Frequency Net数据库分析中国汉族人群HLA-DRB1高频基因型,利用NetMHCIIpan对HpaA蛋白中能被这些高频基因型递呈的CD4+T细胞表位进行预测;通过PCR-SBT法筛选携带有这些高频基因型的H.pylori感染者,利用重组HpaA抗原刺激感染者外周血单个核细胞体外扩增出HpaA抗原特异性T淋巴细胞后利用合成短肽对所预测表位进行鉴定,通过抗体阻断实验对表位的HLA限制性进行分析,利用DC细胞负载重组HpaA蛋白对表位的自然递呈特征进行分析。结果中国汉族人群中HLA-DRB1高频基因型为DRB1*0901(14.4%)、DRB1*1202(13.3%)和DRB1*1501(10.8%),针对上述3种高频基因型预测出24个HpaA蛋白CD4+T细胞表位。其中,4个表位:HpaA39-53(HLA-DRB1*0901)、HpaA42-56(HLA-DRB1*0901)、HpaA89-103(HLA-DRB1*1202)和HpaA87-101(HLA-DRB1*1501)可有效刺激体外扩增的HpaA特异性T细胞产生高水平IFN-γ,且均能被DC细胞自然递呈。结论鉴定得到的4个HLA-DRB1限制性CD4+T细胞表位有可能成为H.pylori表位疫苗设计的候选抗原。 胡健 郭红 李滨 陈立 何亚非 孙合强 李海波 赵卓 吴超关键词:幽门螺杆菌