陈淼
- 作品数：3 被引量：3H指数：2
- 供职机构：中国药科大学药学院新药研究中心更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠星状细胞激活相关蛋白基因的克隆及其重组腺相关病毒载体的构建被引量：2
- 2005年
- 克隆大鼠星状细胞激活相关蛋白(Stellate Cell Activation-associated Protein,STAP)基因,构建其重组腺相关病毒载体(rAAV-STAP),为进一步研究STAP基因功能提供有效工具。用RT-PCR法从大鼠肝组织中扩增出大鼠STAP基因,将STAP cDNA插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pAM/CAG中,构建重组质粒pAM/CAG-STAP。以磷酸钙共转染法将pAM/CAG-STAP及辅助质粒pAd/H22转染293细胞,经293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺相关病毒rAAV-STAP。ELISA法测定病毒滴度,Western blot法检测重组病毒感染293细胞后STAP的表达情况。实验结果表明,RT-PCR法从大鼠肝组织中扩增出573bp cDNA,测序证实为大鼠STAP基因。Western blot法证实rAAV-STAP感染293细胞后可在细胞内表达STAP。
- 李欣燕许瑞安王广基马宏谢海棠赵小辰陈淼
- 关键词：腺相关病毒
- 转染外源性白细胞介素6基因增强乳腺癌细胞株MCF-7表达肿瘤相关抗原
- 2004年
- 目的 :探索白细胞介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )增强乳腺癌细胞表达乳腺癌抗原 (CA15 3)和癌胚抗原 (CEA)的作用。方法 :将含IL 6蛋白编码顺序1176bpcDNA插入Pci neo哺乳动物表达载体。将重组载体转染MCF 7乳腺癌细胞 ,采用ELASA方法测定细胞培养上清液内IL 6浓度 ,用MEIA(microp articalenzymeimmunoassay)方法测定上清液中肿瘤相关抗原CA15 3、CEA和CA12 5。结果 :含有外源IL 6基因的MCF 7细胞分泌IL 6浓度 (338.5±2 2 .6pg·10 -6细胞 )明显高于父本没有含外源基因的MCF 7细胞 (2 5 .4± 4 .6pg·10 -6细胞 )和仅含空载体Pci neo的MCF 7细胞 (19.6± 3.0pg·10 -6细胞 ) (P<0 .0 1)。细胞培养d 3后 ,带外源IL 6基因的MCF 7细胞培养上清液中CA15 3和CA12 5水平 (分别为 14 .9± 2 .3和 38.8± 5 .1μg·10 -6细胞 )明显高于父本 (分别为 6 .6± 1.5和 10 .0± 1.6 μg·10 -6细胞 )和空载体Pci neo的MCF 7细胞 (分别为 3.4±0 .7和 14 .6± 2 .2 μg·10 -6细胞 ,P <0 .0 5 )。而转染IL 6基因没有明显改变CEA表达 (P >0 .0 5 )。结论 :IL 6具有诱导肿瘤相关抗原的表达和增强肿瘤细胞的免疫原性的作用 ,提示IL 6可能增强机体对肿瘤的免疫反应性。
- 陈方正江贤鹏陈淼Jonathan FHRobert LE姜希凌李欣燕
- 关键词：白细胞介素6乳腺癌细胞
- 重组副腺病毒介导的大鼠星状细胞激活相关蛋白基因转染对大鼠肝星状细胞表达间质胶原酶mRNA的影响被引量：3
- 2004年
- 目的:研究重组副腺病毒介导的大鼠星状细胞激活相关蛋白(stellate cell activation-associated Pro-tein,STAP)基因转染对大鼠肝星状细胞表达间质胶原酶mRNA的影响。方法:构建并制备nAAV／rSTAP病毒载体。链霉蛋白酶、胶原酶原位灌注法分离纯化SD大鼠肝星状细胞,转染HSC,用半定量RT-PCR法研究对肝星状细胞表达间质胶原酶mRNA的影响。结果:rAAV／rSTAP转染可提高大鼠肝星状细胞表达间质胶原酶Mrna的水平。结论:间质胶原酶与肝纤维化形成密切相关,rAAV／rSTAP转染可提高大鼠肝星状细胞表达间质胶原酶mRNA的水平,提示rAAV／rSTAP上调大鼠肝星状细胞间质胶原酶mRNA的表达水平可能是其抗纤维化的机理之一。
- 李欣燕许瑞安王广基谢海棠赵小辰陈淼
- 关键词：肝星状细胞间质胶原酶
