金慰芳 作品数:115 被引量:630 H指数:12 供职机构: 复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 上海市卫生局中医药科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 核科学技术 更多>>
电离辐射损伤修复过程中甲_2巨球蛋白与组织蛋白酶D等变化研究(摘要) 1991年 甲2 巨球蛋白(α2 M)制剂,配合手术治疗或单独应用治疗放射性皮肤粘膜损伤已十余年,疗效满意。α2 M为广谱蛋白酶抑制剂,可调节细胞内外蛋白酶水平。Burger等报道,全身照射小鼠给予α2 M治疗,可促进骨髓造血与胸腺再生,提高了小鼠的存活率。Hoffman等体外实验,观察到α2 M与蛋白酶结合,有抑制粒细胞超氧阴离子自由基释放的作用。α2 M在大鼠为急性相蛋白,结构与人α2 M类似。我等用60 钴源致死剂量照射Wistar大鼠。 金为翘 陈识杰 莫素珍 范佩芳 张皓 乐敏 李永和 陈思白 金慰芳 翁志根 何介薇 盛民立关键词:组织蛋白酶 电离辐射 巨球蛋白 骨髓造血 全身照射 致死剂量 雷洛昔芬对大鼠成骨细胞的增殖、分化和矿化的影响 被引量:1 2007年 目的初步探讨雷洛昔芬对成骨细胞骨形成作用机制。方法采用新生大鼠颅盖骨酶消化法体外培养成骨细胞,在培养液中加入不同浓度雷洛昔芬(0、10-8、10-7、10-6mol/L),在共同条件下培养。测定各项骨形成指标(增殖测定、碱性磷酸酶活性定量和矿化结节形态计量)。结果雷洛昔芬(10-8mol/L组和10-7mol/L组)的MTT、ALP测试结果及矿化结节形态计量高于对照组,且有统计学意义,P<0.05。结论雷洛昔芬能够促进大鼠颅盖骨成骨细胞的增殖、分化及矿化,与雌激素作用类似。 毕崇萍 张绍芬 金慰芳 朱汉民关键词:雷洛昔芬 成骨细胞 骨生成 颅骨 ^(137)Cs γ射线对体外培养成骨细胞形态与几种细胞因子基因表达的影响 被引量:7 2004年 目的 观察1 37Csγ射线照射对体外培养成骨细胞的形态、核浆比与几种细胞因子基因表达的影响。方法 取第 1代新生SD大鼠头盖骨成骨细胞传代后 2 4h一次接受1 37Csγ射线照射 ,吸收剂量分别为 10 ,2 5 ,5 0cGy和 1,3,6 ,9,12Gy。观察各组成骨细胞形态与超微结构改变 ;Giemsa染色后进行显微形态计量 ,计算核浆比 ;细胞培养至 14d抽提细胞内总RNA ,RT PCR方法半定量检测各组细胞IGF 1,OPG ,ODF基因mRNA表达量。结果 3Gy以上γ射线照射的细胞 ,胞体变大、变薄 ,细胞数减少 ,细胞内细胞器减少 ,溶酶体增多 ,核浆比降低 ,其改变随吸收剂量增加而突出。基因IGF 1、OPG、ODF与OPG ODFmRNA表达量在 1Gy以上组随吸收剂量增加逐渐降低 ,与吸收剂量呈明显相关 (P <0 0 5或 0 0 1)。结论 1 37Csγ射线照射引起成骨细胞形态明显改变 ,增殖能力降低 ,核浆比降低 ,基因IGF 1、OPG、ODF与OPG ODFmRNA表达量降低。 于明香 王洪复 金慰芳 顾淑珠关键词:成骨细胞 电离辐射 体外培养 成纤维生长因子(FGF)23基因沉默对甲状旁腺激素(PTH)促成骨细胞分化作用的影响 被引量:2 2013年 目的研究内源性成纤维生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)对甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)促成骨细胞分化作用的影响。方法采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,应用小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术(RNAi)沉默成骨细胞FGF23表达,应用MTT法和PNPP法检测细胞增殖和碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)活性,应用real-time RT-PCR法检测其FGF23、ALP和骨钙素(osteocalcin,OCN)等基因mRNA水平,研究PTH对培养成骨细胞和FGF23基因沉默细胞的作用。结果 rhPTH1-34对培养成骨细胞增殖促进作用明显,分化促进作用弱。1×10-10~1×10-8mol/L rhPTH1-34作用3天,细胞增殖率增加31.6%~50.5%(P<0.05),而细胞比活性未见明显改变。同时其ALP和OCN转录水平轻度上调,分别较对照组增加35%(P<0.05)和16%(P>0.05)。rhPTH1-34上调成骨细胞FGF23mRNA水平(4倍),该作用可被针对FGF23特异的shRNA转染所抑制。FGF23基因沉默后PTH促分化作用明显增强,其ALP和OCN mRNA水平分别较对照组增加1.8倍(P<0.05)和5.8倍(P<0.05),显示内源性FGF23对PTH促分化的干扰作用。结论内源性FGF23可能参与PTH促分化作用的调节,FGF23上调可干扰PTH的促成骨细胞分化作用。 王金凤 徐小雅 丁巧灵 周轶 金慰芳 王洪复 高建军关键词:RNA干扰(RNAI) 肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达的体外调节 2007年 目的观察近端肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达的直接调节作用。方法体外分离培养大鼠近端肾小管上皮细胞与头盖骨成骨细胞;用甲状旁腺激素(PTH)、137Cs-γ射线及25(OH)D3预作用前者,再与后者分为4组共培养:①单培养组(成骨细胞单培养)、②共培养组(肾小管上皮细胞与成骨细胞共培养)、③刺激共培养组(肾小管上皮细胞经PTH+25(OH)D3处理,再与成骨细胞共培养)、④抑制共培养组(肾小管上皮细胞经137Cs-γ射线照射+25(OH)D3处理,再与成骨细胞共培养);并用RT-PCR方法检测共培养体系中成骨细胞的BGP、ALP、ColI、RANKL与OPG mRNA表达。结果共培养组成骨细胞的骨形成相关基因BGP、ALP、Col I mRNA表达较单培养组显著降低(P<0.001);刺激共培养组各基因表达较共培养组显著上升(P<0.05-P<0.001);抑制共培养组ALP表达水平较共培养组显著降低(P<0.001),BGP与Col I mRNA表达无显著变化。共培养组与单培养组比较,RANKL与OPC;mRNA表达显著降低(P<0.001),但RANKL/OPG比值显著高于后者(P<0.01);刺激共培养组与共培养组比较,OPG mRNA表达明显上调(P<0.01), RANKL mRNA表达变化无显著意义。RANKL/OPG比值显著降低(P<0.05);抑制共培养组与共培养组比较, OPG表达显著下降(P<0.01),RANKL/OPG比值则显著增高(P<0.01)。结论培养的近端肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达具有直接的调节作用。建立的共培养体系可用于骨代谢相关药物筛选及作用机制研究。 金慰芳 王洪复 许莹莹 顾淑珠 高建军关键词:肾小管上皮细胞 成骨细胞 共培养体系 骨代谢 基因表达 PPARγ2信号通路的调节及其对成骨特异因子的影响 被引量:4 2005年 许莹莹 金慰芳 王洪复关键词:PPARΓ2 信号通路 骨质疏松症 骨髓间充质干细胞 分子生物学 人血管内皮细胞生长因子的提取及活性测定 用硫酸铵沉淀法从牛脑匀浆中提取的 FCGF在20%NBS 199培养液中含量达到 350μg/ml时,具有刺激静止期的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖能力的作用,并可使 张惕 金慰芳 朱涵能 盛民立文献传递 辐射防护药“8401”(芥子酸胺盐衍生物)的致畸和诱变试验 1989年 于受孕2~16d的ICR小鼠,用不同剂量“8401”(167、250及330mg/kg)腹腔给药,每天1次。实验结果:用药组胚胎吸收率(9.3~13.0%)及肋骨畸形数均较对照组(0.8%)高。Amls试验结果:不同浓度“8401”在各种条件下,都没有诱发细菌回复突变,当浓度达到5mg/皿时,也未见诱变作用。 陈思白 金慰芳 沈立刚 毕和堪 黄振东 盛民立关键词:辐射防护药 致畸 诱变试验 全文增补中 p38MAPK在17β-雌二醇和雷洛昔芬促成骨细胞増殖和分化中的作用 被引量:2 2006年 目的:观察p38MAPK信号转导通路在17β-雌二醇和雷洛昔芬促成骨细胞增殖和分化过程中的作用。方法:取第一继代BALB/c小鼠头盖骨成骨细胞,药物刺激组分别加入不同浓度17β-雌二醇或雷洛昔芬;含阻断剂组预先添加不同浓度的SB202190(p38MAPK的阻断剂)阻断信号转导通路,再加17β-雌二醇或雷洛昔芬,作用72h后用MTT法与PNPP法测定细胞的增殖能力和碱性磷酸酶活性。结果:加入雌激素或雷洛昔芬后,成骨细胞的增殖和分化明显增强,与空白对照组比较差异具有显著性意义(P<0·05);阻断p38MAPK信号转导通路后,细胞增殖分化受到明显抑制,与未阻断组比较差异具有非常显著性意义(P<0.01)。结论:p38MAPK在17β-雌二醇和雷洛昔芬诱导的小鼠成骨细胞的増殖和分化过程中发挥重要作用。 李瑞霞 金慰芳 李斌关键词:P38MAPK 雷洛昔芬 分化 卵巢照射及卵巢切除对大鼠骨组织COLI与TGF-β_1 mRNA表达的影响 被引量:1 2003年 探讨卵巢辐射损伤与卵巢切除对大鼠骨组织转移生长因子β1(TGF-β1)与主要的基质蛋白I型胶原(COLI)基因表达的影响。50Gγ剂量γ射线局部照射大鼠卵巢和双侧卵巢切除后应用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测大鼠骨组织中TGF-β1与COLI的mRNA表达水平。结果表明,骨组织COLI的mRNA表达水平上升,而TGF-β1mRNA表达减少,卵巢辐射损伤大鼠与卵巢切除大鼠两者结果相似。 高艳虹 高建军 金慰芳 王洪复关键词:卵巢切除 大鼠骨组织 聚合酶链式反应