金云云
- 作品数：6 被引量：41H指数：5
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛支原体间接免疫酶标组织化学检测方法的建立被引量：5
- 2013年
- 为建立检测牛支原体的间接免疫组织化学(简称免疫组化)方法,分别以鸡抗牛支原体(Mycoplasma bovis)IgY、羊抗鸡IgG-HRP为一抗和二抗,对牛支原体菌体涂片和牛支原体阳性肺脏组织切片进行免疫组化染色,并对染色条件进行优化,确定组织触片及组织切片的最佳免疫组化条件。在最佳条件下对病死犊牛病料切片进行免疫组化检测,并以细菌分离培养和PCR方法进行验证。结果显示,免疫组化法阳性标本与分离培养和PCR结果相符,而阴性对照和替代试验均为阴性。结果表明本试验建立的间接免疫组化方法可用于检测临床病例组织样本及培养物中的牛支原体,具有特异性和可靠性,为探究该病原在机体内的定位、动态分布规律及致病机理提供了手段。
- 金云云剡根强王静梅石刚
- 关键词：免疫组化牛支原体
- 牛支原体间接ELISA检测方法的建立被引量：13
- 2014年
- 以牛支原体(Mycoplasma bovis)全菌蛋白经超声波裂解后的裂解物作为包被用抗原,建立检测牛支原体血清抗体的间接ELISA方法。通过棋盘滴定法确定抗原最适包被浓度、待检血清最佳稀释度,同时对抗原的包被方式、封闭剂和封闭时间、酶标二抗最佳工作浓度、一抗和二抗最佳作用时间、血清稀释液、底物显色时间进行优化。用该方法测定10份阴性血清的OD450值计算出阴性临界值,并对牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清进行检测。结果:抗原最适包被浓度为200μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100,阴性临界值为0.327。用该方法检测牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清均无交叉反应,表明该间接ELISA具有很好的特异性。
- 金云云剡根强王静梅王超丽马玉英
- 关键词：间接ELISA牛支原体抗体
- 致犊牛肺炎和关节炎牛支原体诊断方法的建立
- 牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)是一种可导致牛发生肺炎、关节炎、乳房炎、角膜结膜炎、耳炎、生殖道炎甚至流产与不孕等多种疾病的重要致病性病原体,在环境等其他应激因素的作用下还可引起多种疾病的继发...
- 金云云
- 关键词：犊牛牛支原体关节炎疾病诊断血清学
- 文献传递
- 盘羊肺炎支原体感染PCR检测方法的建立与初步应用被引量：7
- 2011年
- 羊支原体性肺炎,是由支原体引起的一类高度接触性传染病,又称羊传染性胸膜肺炎（Infections pleuropneumonia of sheep and goats）,临床症状主要表现为高热、咳嗽、消瘦、
- 冷青文李志远屈勇刚鲁海富金云云王静梅剡根强
- 关键词：盘羊PCR绵羊肺炎支原体
- 盘羊体内绵羊肺炎支原体的分离和鉴定被引量：12
- 2014年
- 为查明某动物园的盘羊发生呼吸道疾病的原因,本研究在发病的盘羊群中无菌采集28份鼻腔棉拭子和1份肺组织病料样品。采用支原体专用培养基从4份鼻腔棉拭子和1份肺组织病料样品中分离出5株支原体,连续3次克隆纯化后,通过形态观察、理化试验、PCR及基因特征鉴定,证明分离到的支原体均为绵羊肺炎支原体(MO)。将支原体分离株气管接种4只60日龄健康绵羊,10 d后2只绵羊陆续出现呼吸症状,其中1只伴有明显的体温变化,峰值达41.2℃,其余3只人工感染羊和对照组的羊体温变化不明显。35 d迫杀剖检,1只人工感染羊的肺脏前叶粉色实变明显,显微病理变化主要呈现间质增生性肺炎,其它羊肺脏病变不明显;经培养鉴定和PCR检测,从4只人工感染羊的肺脏样品中再次分离出MO。结果表明引起盘羊发病的病原为MO,本研究为野生盘羊支原体肺炎的快速诊断和防治提供参考依据。
- 冷青文李志远鲁海富金云云王静梅剡根强
- 关键词：盘羊绵羊肺炎支原体
- 基于牛支原体P81基因环介导等温扩增方法的建立及应用被引量：9
- 2014年
- 为快速检测牛支原体(M.bovis),根据GenBank中登录的M.bovis P81基因序列设计特异性引物,通过条件优化,建立了M.bovis环介导等温扩增(LAMP)检测方法。将该方法的灵敏度与巢式PCR进行对比,并用其检测牛支原体外的其他几种病原菌,同时对疑似感染M.bovis的临床病料进行检测。该方法的灵敏度比巢式PCR高103倍,最低检出限为1.1ng/L,对其他几种病原菌的检测结果均为阴性,临床病料检测结果与分离培养符合率为100%。建立的M.bovis LAMP检测方法灵敏度高、特异性强、检测快速准确,且不需要专门的仪器设备,可用于牛支原体病的临床检测。
- 金云云王静梅剡根强
- 关键词：牛支原体环介导等温扩增巢式PCR
