郭海英 作品数:24 被引量:40 H指数:4 供职机构: 第三军医大学基础部 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 重庆市高等教育教学改革研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
JNK在小鼠毛囊周期中的动态表达 2012年 目的研究JNK在生后小鼠背皮毛囊周期中的表达规律及探讨其对毛囊周期的调控作用。方法选择生后不同时期(1、7、14、16、21、31 d)C57BL/6J小鼠54只,采用RT-PCR技术,检测JNK mRNA在小鼠背皮毛囊周期中的表达情况;采用Western blot和免疫组化技术,进一步检测JNK蛋白在毛囊周期中的表达规律。结果 RT-PCR检测结果表明,在毛囊周期中,JNK1在生长早期(生后7、31 d)表达最强,退化期(生后16 d)和静止期(生后21 d)维持较弱的表达;JNK2在各时相点均有中等强度表达。单因素方差分析显示,JNK1的表达水平在生长早期(0.99±0.02)与静止期(0.30±0.01)间存在显著差异(P<0.05),JNK2在生长早期(0.77±0.01)与退化期(0.97±0.03)间存在显著差异(P<0.05)。Western blot与RT-PCR检测结果一致。免疫组化结果显示,在毛囊生长期,JNK主要表达于毛母质和外根鞘;进入退化期,JNK表达于外根鞘和上皮索;静止期毛囊中无表达。结论 JNK在毛囊周期中呈动态表达模式,生长期JNK可能通过影响毛母质细胞的增殖和/或分化来调节毛囊生长;退化期JNK可能涉及毛囊细胞的凋亡过程。 王瑞敏 星懿展 郭海英 何龙 杨恬 连小华 查何 彭惠民关键词:JNK 毛囊 毛囊周期 小鼠 分泌性的糖蛋白Wnt5a对永生化小鼠黑素细胞系melan-a细胞产黑素的影响 2013年 目的:探讨分泌性的糖蛋白Wnt5a对永生化小鼠黑素细胞系melan-a细胞产黑素的影响。方法:用带有Wnt5a基因的腺病毒及对照组腺病毒作为载体感染体外培养的melan-a黑素细胞;MTT法测定细胞增殖率;体外氧化DOPA反应法测定酪氨酸酶活性;NaOH法测定黑素含量;RT-PCR方法检测melan-a细胞中MITF的表达。结果:与AdGFP对照组相比,AdWnt5a处理组melan-a细胞的增殖率明显降低(P<0.01);DOPA反应法和NaOH法检测结果发现,Wnt5a能显著降低melan-a细胞内酪氨酸酶活性(P<0.01)以及黑素含量(P<0.05);RT-PCR结果表明,Wnt5a显著下调melan-a细胞内MITF的表达(P<0.01)。结论:以上结果显示,AdWnt5a处理组melan-a细胞的增殖率、酪氨酸酶活性、产黑素的量及MITF的表达均有所下降。实验结果提示,Wnt5a能有效抑制melan-a细胞产黑素的能力,并且其作用机制可能与下调MITF的表达有关。 李焱 张杰 武赟 杨劲 杨珂 郭海英关键词:WNT5A 黑素细胞 黑素 Gsdermin A3基因在小鼠皮肤角质形成细胞中对Krt6b基因表达的影响 2016年 目的初步探讨Gsdermin A3(Gsdma3)基因对Krt6b基因表达的影响。方法通过组织切片的免疫荧光观察、RT-PCR、Q-PCR、Western blot等方法检测毛囊生长期[出生后8 d(P8d)]、毛囊退化期(P16d)、毛囊静止期(P25d)的Gsdma3基因突变鼠(AE鼠)和野生型鼠(WT鼠)背部皮肤Krt6b基因的表达情况。利用免疫荧光进一步观察注射有Gsdma3和RFP腺病毒的Gsdma3基因突变鼠和野生型鼠的Krt6b基因的表达情况。结果 Gsdma3基因突变鼠的Krt6b基因表达量在各个时相点均高于野生型鼠(P<0.05)。其中,在出生后16 d Krt6b基因表达量达到最高,而在出生后25 d降至最低。对Gsdma3基因突变鼠进行基因回补后,免疫荧光、实时定量PCR及Western blot检测结果显示Krt6b基因表达减弱。同时,对野生型鼠过表达Gsdma3基因后,免疫荧光、实时定量PCR及Western blot结果显示Krt6b基因表达量降低。结论小鼠皮肤角质形成细胞中,Krt6b基因的表达受Gsdma3基因抑制。 刘颖新 白秀峰 赖向东 郭海英 罗燕 余裕 连小华关键词:角质形成细胞 小鼠 毛囊黑素干细胞研究进展 被引量:3 2013年 位于毛囊中的黑素干细胞在人和动物的皮肤附件系统中起着黑素细胞储存库的作用。在哺乳动物,黑素干细胞负责向毛母质提供黑素细胞,活化的黑素细胞向毛干的角质形成细胞提供黑素。在人类,黑素干细胞一方面可为毛母质提供黑素细胞,如生长期毛母质中的黑素细胞、斑秃毛发再生中毛母质的黑素细胞等;另一方面可为脱色的表皮提供黑素细胞,如白癜风复色、表皮烧伤或擦伤后的复色。所以,对毛囊黑素干细胞的深入理解在研究色素变化和相关疾病方面具有重要的意义。 郭海英 王瑞敏 周其超 杨珂 杨恬关键词:毛囊干细胞 黑素 细胞谱系 分化 医学细胞生物学网络教学平台的建设与应用 被引量:4 2012年 细胞生物学是生命科学的四大基础学科之一,知识更新迅速。网络教学突破了传统课堂教学的局限,对构建创新型教学模式有重要意义。针对医学本科专业教学特点,总结建立医学细胞生物学网络教学平台的实践经验;并指出,互动式网络教学有利于知识层面的及时更新,有利于发挥学生的主体作用,有利于加强教师和学生之间的沟通交流。 杨珂 余瑾 杨劲 郭海英 连小华 杨恬关键词:细胞生物 网络教学 β-catenin与小鼠毛囊衰老性变化相关 被引量:1 2012年 目的探讨β-catenin与毛囊衰老性变化的关系。方法取老龄与年轻小鼠处于毛囊周期各阶段的皮肤,RT-PCR和Western blot检测β-catenin在mRNA和蛋白水平的表达;IF检测比较β-catenin蛋白表达在毛囊中的组织学分布。结果老年鼠背皮的β-catenin表达相较处于同一毛囊周期阶段的年轻鼠皮肤在mRNA水平和蛋白质水平均有上调,出生后34个月的小鼠生长期皮肤中β-catenin蛋白的表达为0.9024±0.0167,显著高于出生后35 d的0.8012±0.0184。出生后34个月的小鼠静止期皮肤中β-catenin蛋白表达为0.6348±0.0241,显著高于出生后23 d的0.6348±0.0241(P<0.05)。IF检测显示β-catenin的表达集中在外根鞘和Bulge细胞,也可以观察到β-catenin的入核现象。结论β-catenin表达量上调,周期节律不明显,表达部位不同于年轻鼠可能是衰老相关性白发产生的原因之一。 邓芳 郭海英 支轶 连小华 杨恬关键词:Β-CATENIN 衰老 白发 Wnt3a在毛囊及黑素细胞谱系中的表达 被引量:1 2014年 目的:探讨毛囊周期中,Wnt3a在毛囊及黑素细胞中的表达变化。方法:以DCT-LacZ转基因小鼠为动物模型,通过X-gal染色技术观察黑素细胞谱系在小鼠皮肤中的分布情况;采用X-gal染色结合免疫组化方法检测Wnt3a在毛囊及黑素细胞谱系中的表达情况;采用RT-PCR方法对小鼠皮肤全层Wnt3a和TYR的mRNA表达进行半定量分析。结果:在生长期毛囊中,Wnt3a蛋白在表皮、毛囊外根鞘Bulge区、内根鞘以及毛球部均有表达,在黑素干细胞与黑素细胞也观察到Wnt3a;在退化期,Wnt3a的表达逐渐减弱,仅在外根鞘有较弱的表达,但黑素干细胞中没有观察到Wnt3a;在静止期,几乎检测不到Wnt3a的表达;TYR mRNA与Wnt3a mRNA在毛囊周期中的表达模式一致,在生长期最强,退化期减弱,静止期最弱。结论:Wnt3a可能对黑素细胞谱系分化起到促进作用。 赵佳瑞 白秀峰 杨珂 罗燕 郭海英关键词:WNT3A 毛囊 黑素细胞 分化 Wnt5a促进黑素瘤的侵袭转移 2013年 Wnt蛋白家族是一系列高度保守的分泌性的糖蛋白,目前已发现了19种Wnt蛋白。不同的Wnt蛋白具有独特的分泌方式并在胚胎发育、肿瘤形成中发挥着不同的功能。Wnt蛋白可分为两类:经典Wnt蛋白(Wnt3a)和非经典Wnt蛋白(Wnt5a、Wnt11),他们分别激活经典Wnt信号途径和非经典的Wnt信号途径。经典Wnt信号途径也称为Wnt/β-cate-nin信号途径,Wnt蛋白通过与受体结合,使得胞质中的β-catenin稳定累积并入核,调控靶基因的转录。 李焱 王大林 武赟 杨劲 郭海英关键词:WNT5A 黑素瘤 sFRP5抑制Wnt3a对黑素细胞黑素形成作用的初步研究 2014年 目的研究sFRP5抑制Wnt3a对黑素细胞黑素形成的作用。方法以永生化的黑素细胞为模型,利用腺病毒表达载体,设置Control组、Wnt3a处理组、Wnt3a+sFRP5处理组进行以下实验:L-DOPA测定酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)活性;Masson-Fontanas银染色法观察黑素形成情况;RT-PCR检测酪氨酸酶相关蛋白1(tyrosinase-related protein 1,TRP-1)、TYR基因的表达;Western blot检测TRP-1、TYR蛋白的表达水平。结果 L-DOPA测定酪氨酸酶活性结果显示Wnt3a+sFRP5处理组TYR活性低于Wnt3a处理组,差异有统计学意义(P<0.05);Masson-Fontanas银染色法显示Wnt3a+sFRP5处理组形成的黑素明显低于Wnt3a处理组;RT-PCR检测结果显示Wnt3a+sFRP5处理组能下调TRP-1、TYR基因的表达(P<0.05);Western blot检测结果显示Wnt3a+sFRP5处理组能下调TRP-1、TYR蛋白的表达水平(P<0.05)。结论 sFRP5能抑制Wnt3a对黑素细胞黑素生成的作用。 汤寅虹 杨珂 杨恬 叶吉星 刘鹏 连小华 郭海英 彭惠民关键词:WNT3A 黑素细胞 腺病毒介导的Wnt10b对HaCaT细胞迁移的作用及机制 2015年 目的:探讨Wnt10b对Ha Ca T表皮细胞迁移的影响及机制。方法:分别用重组腺病毒Ad-GFP、Ad-GFP-Wnt10b感染Ha Ca T表皮细胞,利用细胞免疫荧光技术检测腺病毒Ad-GFP-Wnt10b感染细胞后的过表达情况;采用细胞划痕实验,于不同时间点观察并记录经Wnt10b处理后,Ha Ca T细胞体外迁移功能的改变;进一步采用Westen blot技术检测不同腺病毒处理后,Ha Ca T细胞中Wnt信号关键分子β-catenin、细胞粘附分子E-cadherin表达的改变情况。结果:1Ad-GFP-Wnt10b感染Ha Ca T细胞48 h后,细胞内GFP表达上调,细胞免疫荧光染色显示Wnt10b处理组高表达Wnt10b蛋白;2Ha Ca T细胞经Ad-GFP-Wnt10b处理后,细胞创面愈合速度明显增快;3Wnt10b处理组细胞β-catenin蛋白表达水平显著高于对照组,而E-cadherin蛋白表达水平显著低于对照组。结论:Wnt10b能促进Ha Ca T细胞迁移,且该效应涉及经典Wnt/β-catenin信号的激活及由E-cadherin介导的细胞粘附性的减弱。 陶元 王瑞敏 唐萄 杨恬 彭惠民 郭海英 星懿展关键词:HACAT细胞 迁移