路明华
- 作品数：16 被引量：39H指数：4
- 供职机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一株B型副鸡禽杆菌的分离与鉴定
- 2012年12月,安徽某些蛋鸡养殖场出现大量鼻炎症状的病鸡,主要表现为眼结膜发炎,眼睑肿胀、流泪。一侧或两侧颜面肿胀。产蛋鸡产蛋量明显下降等临床症状的疾病。为探索该病病因及制定有效防治措施,笔者对病鸡样品进行了细菌学检验...
- 路迎迎路明华陈小玲张培君龚玉梅王宏俊
- 关键词：蛋鸡鼻炎副鸡禽杆菌
- 文献传递
- 副鸡禽杆菌外膜蛋白GcbG的表达及免疫效果研究被引量：5
- 2016年
- 为研究副鸡禽杆菌外膜蛋白GcbG的免疫原性,克隆了副鸡禽杆菌荚膜蛋白合成相关的编码基因gcbG,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-gcbG,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中进行诱导表达。结果表明,重组菌在28℃培养条件下经1mmol/L的IPTG诱导6h可分泌表达GcbG蛋白,且其表达量最高。Western-blot分析表明,所表达的蛋白能与副鸡禽杆菌阳性血清发生特异性免疫印迹反应,说明所表达的蛋白具有较好的反应原性。动物试验表明,所表达的蛋白能为鸡提供较好的保护力。上述试验结果为进一步研究荚膜蛋白的生物学特性及亚单位疫苗的开发奠定了基础。
- 赵成全路明华李淑芳张培君龚玉梅王宏俊
- 关键词：副鸡禽杆菌原核表达动物试验
- 副猪嗜血杆菌分离株的血清分型及耐药性分析
- 为弄清某规模化养猪场副猪嗜血杆菌感染和流行的血清型及耐药性,本试验自该猪场发生浆膜炎和关节炎的猪病料样品中分离到6株副猪嗜血杆菌,通过细菌培养特性、生化试验和PCR扩增细菌16S rRNA基因片段并测序对分离株进行了鉴定...
- 吴村崔国林金文杰张鑫宇路明华王宏俊朱瑞良徐福洲
- 关键词：副猪嗜血杆菌血清分型耐药性分析
- 文献传递
- B型副鸡禽杆菌安徽株的分离与鉴定
- 2012年12月，安徽某些蛋鸡养殖场出现大量鼻炎症状的病鸡，主要表现为眼结膜发炎，眼睑肿胀、流泪，一侧或两则颜面肿胀，产蛋鸡产蛋量明显下降。为探索该病病因及制定有效防治措施，笔者对病鸡样品进行了细菌学检验。
- 路迎迎路明华陈小玲张培君龚玉梅王宏俊
- 关键词：副鸡禽杆菌
- 一株伪狂犬病病毒的分离及鉴定被引量：1
- 2015年
- 为了从北京市周边郊区某猪场发病仔猪的脑组织中分离到伪狂犬病病毒，试验采用细胞培养、空斑纯化、PCR鉴定、动物感染试验、电镜观察的方法进行分离。结果表明：家兔接种病毒后可引起典型的伪狂犬病症状，继而死亡；PK-15细胞接种病毒出现典型细胞病变，毒价为1×10^8TCID50／mL；电镜观察可见圆形、有囊膜、直径为150～180nm大小的病毒颗粒；PCR反应可扩增出特异性长为I783bp的DNA片段。说明该分离株为猪伪狂犬病病毒野毒株。
- 路明华王宏俊路迎迎李桂萍孙惠玲
- 关键词：伪狂犬病病毒细胞电镜病变
- 副猪嗜血杆菌的分离鉴定及相关特性研究被引量：3
- 2014年
- 本试验从2013年北京地区疑似副猪嗜血杆菌病病料中分离到19株革兰氏阴性短小杆菌,对分离株进行培养特性、荚膜染色、生化特性、血清型分型及PCR鉴定,结果显示分离的19株细菌均为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps),分别属于血清4、5、7、12及13型。对分离株进行药敏试验及致病性试验,结果表明各分离株均有多重耐药性,且各分离株除GS-3外均有较强毒力。
- 王雪敏路明华陈小玲路迎迎张培君龚玉梅王宏俊
- 关键词：副猪嗜血杆菌耐药性毒力
- 副猪嗜血杆菌单因子血清的制备被引量：1
- 2014年
- 利用副猪嗜血杆菌(Hps)的15个血清型的参考菌株分别制备相应的兔抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,得到15个血清型的单因子血清,不同血清型的单因子血清不与其他血清型抗原发生反应。应用这15种单因子血清对临床分离到的9株副猪嗜血杆菌进行血清型的鉴定,结果表明,其中6株为5型,2株为4型,1株为7型。
- 路明华王雪敏李淑芳路迎迎张培君龚玉梅王宏俊
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 副猪嗜血杆菌分离鉴定及血清学分型方法的建立
- 副猪嗜血杆菌（Haemophilusparasuis，H.parasuis/HPS）是一种不运动的具有多种形态，严格依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（也称之为V因子）的革兰氏阴性小杆菌，是巴斯德氏菌科（Pasteurellace...
- 路明华
- 关键词：副猪嗜血杆菌血清学分型方法药物敏感性
- 文献传递
- 副鸡禽杆菌荚膜多糖的提取及HPLC分析被引量：1
- 2014年
- 为了研究副鸡禽杆菌的荚膜多糖的构成及生物学活性,本试验提取了B型副鸡禽杆菌的荚膜多糖,测定其含量,并分析单糖组分及分子量大小。用乙醇沉淀法在细菌培养液上清中提取了荚膜多糖,利用25%乙醇去核酸、苯酚抽提去蛋白,最后以苯酚-硫酸法测定其含量,高效液相色谱(HPLC)分析其组分及分子量大小。结果显示,每升菌液可以抽提得到荚膜多糖85mg,含量为59.6%,该多糖主要由L-鼠李糖、D-木糖、D-葡萄糖等单糖组成,总分子量约209Ku。
- 王雪敏路迎迎陈小玲路明华张培君龚玉梅王宏俊
- 关键词：副鸡禽杆菌荚膜多糖高效液相色谱
- 猪圆环病毒2型ORF2基因的优化表达及活性检测
- 2014年
- 通过软件分析后,截去猪圆环病毒2型ORF2基因中影响蛋白表达的保守基因,并对其余的基因进行了密码子优化。把改造后的ORF2基因连接到pGEX-4T-1载体上并转入表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。结果显示,重组菌可以表达出分子质量为50ku的重组蛋白,在0.2mmol/L的IPTG诱导5h情况下表达效果最好,表达的蛋白以包涵体形式存在于菌体中。表达产物经琼脂糖凝胶纯化可得到较纯的蛋白。经Western-blot分析,所纯化的蛋白能刺激小鼠产生相应抗体,并能与PCV2阳性血清进行特异性免疫印迹反应。试验结果证实表达的蛋白具有良好的抗原性。
- 路明华王宏俊路迎迎张培君龚玉梅王雪敏
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF2原核表达抗原性
