贾红红
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划天津市高等学校科技发展基金计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 利用基因工程菌株耦合发酵合成人乳岩藻糖基化寡糖的方法
- 本发明涉及了一种利用基因工程菌株耦合发酵合成人乳岩藻糖基化寡糖的方法，主要是利用基因工程技术构建代谢工程菌株实现代谢途径中关键酶的高效表达，进而在体外实现人乳岩藻糖基化寡糖的生物合成，此方法构建的工程菌株能增加这种酶基因...
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- 文献传递
- 磷酸甘露糖变位酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 低聚糖具有抗病毒感染，增强免疫力，减少炎症等生理作用，对其合成的研究具有现实意义。岩藻低聚糖是人乳低聚糖的一种，可以在体外通过己糖激酶、磷酸甘露糖变位酶、GDP-甘露糖4,6脱水酶、α1,2-岩藻糖基转移酶等酶的作用下进...
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- 关键词：酶基因克隆表达大肠杆菌
- 利用基因工程菌耦合发酵合成GDP-岩藻糖的方法
- 本发明涉及了一种利用基因工程菌耦合发酵合成GDP-岩藻糖的方法，主要内容是利用大肠杆菌表达系统BL21(DE3)/pET-22b，对催化以GDP-甘露糖为底物合成GDP-岩藻糖的相关酶进行高效表达，构建生产两种酶gmd、...
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- 文献传递
- α1,2-岩藻糖基转移酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2011年
- 利用PCR方法从幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,HP)基因组DNA中获得α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-fuco-syltransferase,α1,2-fuct)基因,得到大小为906 bp的目的基因,将其定向插入到原核表达载体pET-22b(+)中,得到重组表达载体pET-fuct。将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,25℃,0.1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达4 h,并用SDS-PAGE分析目的蛋白的表达情况。结果表明,可表达出相对分子质量为33 kD的蛋白,与预期分子量一致,说明α1,2-岩藻糖基转移酶在大肠杆菌BL21中实现表达,应用HPLC法进行酶活检验,酶活达到了13.21 pmol/(mgPr.h)。
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- 关键词：基因克隆原核表达大肠杆菌
- 乳糖代替IPTG诱导己糖激酶在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2011年
- 构建了己糖激酶GLK高效表达的工程菌株BL21(DE3)/pET-glk,考察了乳糖代替IPTG诱导己糖激酶GLK在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性。实验结果表明,工程菌对数生长中期(OD_(600)约为1.0)添加终浓度为10g/L的乳糖于25℃的条件下诱导6h能获得最大量的目的蛋白和菌体量,目的蛋白表达量占总蛋白的30.45%,与IPTG诱导条件下的31.12%无明显差异。同时,乳糖诱导后收获的菌体量高于IPTG诱导,显示出了乳糖同样是一种T7启动子的廉价高效诱导剂,可以代替昂贵的IPTG用于己糖激酶GLK的规模化发酵,也为其他重组蛋白的生产提供了有益的参考和借鉴。
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- 关键词：己糖激酶乳糖诱导IPTGT7启动子大肠杆菌
- 大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒的构建及碱性蛋白酶的表达被引量：6
- 2011年
- 构建了一个可以在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中复制,并可以在枯草芽孢杆菌中表达外源蛋白的穿梭表达载体pBE2R。该穿梭表达载体是以pBE2为基本骨架,引入来自pWB980质粒的P43强启动子,并在其下游引入嗜碱芽孢杆菌碱性蛋白酶信号肽和前肽构建而成。试验结果表明,该穿梭表达载体pBE2R可以在大肠杆DH5α和枯草芽孢杆菌WB600中稳定存在,并可以使外源蛋白在枯草芽孢杆菌进行分泌表达,同时也为碱性蛋白酶定向改造提供了高通量筛选平台。
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- 关键词：穿梭载体碱性蛋白酶信号肽前肽
