许爱芳 作品数:28 被引量:83 H指数:5 供职机构: 第二军医大学附属长海医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划 军队“十一五”科技攻关课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
高糖对大鼠胰星状细胞增殖和细胞外基质合成的影响 2002年 目的探讨高糖刺激对大鼠胰星状细胞(pancreatic stellate cell, PSC)增殖和细胞外基质(extracellular matrix, ECM)合成的影响.方法分离培养大鼠PSC,取传第3~5代细胞,分别用正常葡萄糖(5.6 mmol/L葡萄糖)(正常对照)、高葡萄糖(25 mmol/L葡萄糖)(高糖组)和甘露醇(5.6 mmol/L葡萄糖+19.4 mmol/L甘露醇)(等渗对照组)处理5天后,用MTT法、3H-Thymidine掺入和3H-Proline掺入法分别检测细胞增殖、DNA合成和总胶原合成,同时用放免法检测细胞培养上清中Ⅲ型前胶原氨基末端多肽(amino-terminal propeptide of type Ⅲ procollagen, PⅢNP)和透明质酸(hyaluronic acid, HA)含量.结果与等渗对照组比较,高糖组PSC增殖、DNA合成、总胶原合成和细胞上清HA含量均显著增加(P<0.05),但细胞上清PⅢNP含量无显著性差异(P>0.05).结论高糖可刺激PSC增殖与胶原合成,参与PSC活化.体内高糖血症可能是PSC活化的机制之一. 贾一韬 龚燕芳 许爱芳 屠振兴 李兆申关键词:细胞增殖 胰星状细胞 高糖 细胞外基质 酪蛋白空肠灌注对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺外分泌的影响 被引量:3 2009年 目的观察空肠内灌注酪蛋白对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠胰腺外分泌的影响,并初步探讨其神经机制。方法30只SD大鼠按随机数字法分为对照组、ANP组和肠内营养组。后2组以胰管内逆行注射牛磺胆酸钠法制作ANP模型。造模后24h空肠插管分别灌注酪蛋白溶液(肠内营养组)和生理盐水(对照组和ANP组),每15min收集胰液1次,共6次,记录胰液分泌量和检测胰液蛋白含量。取大鼠延髓孤束核,采用免疫组化法检测c—Fos蛋白表达。结果ANP组和肠内营养组组内各时间段之间胰液分泌量无显著差别,两组相应时间段之间胰液分泌量也无显著差别,但均显著低于对照组对应时间段的胰液分泌量(P〈0.05)。对照组、ANP组和肠内营养组空肠灌注过程中胰液蛋白含量水平稳定,不同时间段间无明显差异,但ANP组和肠内营养组空肠灌注后0~15min、15—30min、30~45min、75~90min时间段内胰液蛋白含量均低于对照组(P〈0.05)。肠内营养组灌注后延髓孤束核c-Fos蛋白表达阳性,而对照组和ANP组延髓孤束核c—Fos表达阴性。结论空肠内酪蛋白灌注可促进延髓孤束核c—Fos表达,但不增加胰液分泌量和胰液蛋白含量。 赵航 李兆申 黄丹丹 龚燕芳 高峻 吴洪玉 满晓华 许爱芳关键词:急性坏死性 肠道营养 孤束核 PCR诊断幽门螺杆菌感染的临床价值 被引量:5 1997年 目的探讨PCR法在诊断胃粘膜幽门螺杆菌(Hp)感染中的临床价值.方法用PCR方法对154例胃病患者胃粘膜Hp尿酶基因DNA片断进行扩增,同时与尿酶试验及血清HpIgG测定方法进行比较.结果PCRHpDNA的阳性率达91%,与尿素酶试验(74%)及血清HpIgG(81%)测定相比有显著差异(P<005).Hp感染率随受检者年龄增长而增高.Hp感染与胃窦(93%)及胃体(84%)腺癌关系密切,而与食管癌及贲门癌(80%)关系不大.结论PCR法可明显提高Hp诊断的敏感性和特异性。 纪徐淮 许国铭 李兆申 满晓华 张洪富 许爱芳关键词:幽门螺杆菌感染 聚合酶链反应 人胰腺癌hedgehog信号转导途径中PTCH基因的克隆与鉴定 2006年 目的克隆人胰腺癌hedgehog信号通路中PTCH基因,构建PTCH基因表达载体并诱导融合蛋白表达。方法从人胰腺癌细胞株SW1990抽提总RNA,经RT-PCR扩增出PTCH基因,经纯化、回收目的基因PTCH,将其插入表达载体PET22b,转化E.coliBL21-CodonPlusTM-RP,构建重组质粒PET22b/PTCH,IPTG诱导表达融合蛋白,免疫印迹进行鉴定。结果从人胰腺癌细胞株SW1990克隆出长为789 bp PTCH目的片段,成功构建重组质粒PET22b/PTCH,并诱导表达目的蛋白。结论构建重组质粒PET22b/PTCH,并表达PTCH融合蛋白,为制备PTCH多克隆抗体打下良好基础。 邵建国 李兆申 屠振兴 高军 龚燕芳 许爱芳 满小华 金晶关键词:基因克隆 融合蛋白 幽门螺杆菌依赖丝裂原活化蛋白激酶信号通路诱导SGC7901细胞表达分泌白细胞介素-8 被引量:4 2004年 背景:已知前炎症细胞因子白细胞介素(IL)鄄8在慢性活动性胃炎、消化性溃疡等幽门螺杆菌(H.pylori)感染相关疾病的发生、发展中起重要作用,但H.pylori诱导胃上皮细胞表达、分泌IL鄄8的分子机制尚不明确。目的:通过体外实验了解H.pylori对人胃癌细胞株SGC7901表达、分泌IL鄄8的影响,探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在H.pylori诱导SGC7901细胞IL鄄8mRNA表达和IL鄄8蛋白分泌中的作用。方法:SGC7901细胞经p38MAPK特异性抑制剂SB203580预作用2h,再加入H.pylori标准菌株CCUG17874共培养。采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测IL鄄8mRNA的表达,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL鄄8蛋白的分泌,观察SB203580对H.pylori诱导SGC7901细胞表达、分泌IL鄄8的影响。结果:H.pylori能诱导SGC7901细胞表达、分泌IL鄄8。SB203580能以剂量依赖的方式抑制H.pylori诱导的SGC7901细胞IL鄄8蛋白分泌,经终浓度为0.3、1、3和10μmol/L的SB203580预作用2h,SGC7901细胞的IL鄄8蛋白分泌与未经SB203580预作用组相比分别减少了26%、51%、64%和73%(P<0.05);SB203580也能使H.pylori诱导的IL鄄8mRNA表达显著减弱。结论:H.pylori能诱导胃上皮细胞表达、分泌IL鄄8,该作用在一定程度上依赖于MAPK信号通路。 徐灿 李兆申 许国铭 屠振兴 龚燕芳 满晓华 许爱芳关键词:幽门螺杆菌 丝裂原活化蛋白激酶 信号通路 SGC7901细胞 白细胞介素-8 炎症细胞因子 过氧化物酶体增殖物激活受体-γ在大鼠慢性胰腺炎进程中的表达及意义 被引量:3 2011年 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-1(peroxisomeproliferator—activatedreceptor-γ,PPAR-γ)在大鼠慢性胰腺炎(CP)进程中的表达及其意义。方法经大鼠尾静脉-次性注射二丁基二氯基锡方法制备CP模型。按体重随机分为对照组及造模后1、3、5、7、14、42d组。行胰腺常规病理检查,SiriusRed染色观察胶原含量,测定胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,免疫组化法测定仪-SMA、PPAR-γ蛋白的表达。结果造模7d内胰腺呈急性炎症改变,42d时出现不同程度的腺泡坏死、萎缩,淋巴细胞、单核细胞浸润,小叶内或小叶周围纤维化形成,伴胰管改变,符合从急性胰腺炎(AP)向CP的进展过程。造模后1d,胰腺组织MPO活性、α—SMA蛋白表达即显著增加[(0.78±0.71)U/g比(0.15±0.05)U/g,6.67±3.14比0,P值均〈0.05],之后随造模时间延长未继续增加。造模后7d,胶原含量达峰值,为(45.424-15.99)%,较对照组的(10.87±2.28)%显著增加(P〈0.05),胶原沉积从仅在血管壁进展到沉积在导管周围至小叶内和(或)小叶周围。对照组PPAR-γ仅在血管壁呈阳性表达,表达量为0.17±0.41,随造模时间延长表达渐增强,42d达峰值,为4.83±2.71。结论在CP造模过程中PPAR-γ蛋白表达逐渐增强,并发挥有限的抗炎症和抗纤维化作用。 黄玲 高峻 蒋斐 路筝 满晓华 许爱芳 李兆申关键词:胰腺炎 慢性 过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ 星形细胞 血清白细胞介素1β与溃疡性结肠炎的关系 被引量:14 2002年 目的 :测定溃疡性结肠炎 (U C)患者血清中白细胞介素 1β(IL - 1β)的含量 ,并分析其与 U C病变范围、病变程度和复发与否的关系 ,以及治疗前后的变化。方法 :收集经内镜证实的 UC患者血清 6 4例 ,采用 EL ISA法测定血清中 IL - 1β的含量 ,正常对照为健康献血者血清。 结果 :UC患者 IL - 1β的含量 (10 .8± 14 .0 ) pg/ ml显著高于正常对照 (1.8± 0 .6 ) pg/ ml (P<0 .0 1)。不同病变范围 IL - 1β含量 ,愈合者、直肠病变、直乙状结肠、左半结肠及全结肠分别为 (6 .4± 8.6 )、(9.0± 11.0 )、(8.3±7.8)、(19.8± 14 .6 )和 (15 .5± 2 3.3) pg/ ml,左半结肠病变与愈合期者比较有统计学差异 (P<0 .0 5 )。不同病变程度 IL - 1β含量 :0级为 (6 .4± 8.6 ) pg/ ml,1~ 3级分别为 (6 .2± 6 .2 )、(11.2± 12 .6 )和 (16 .9± 19.7) pg/ m l,其中 3级较 0级有明显增加(P<0 .0 5 )。初、复发患者及治疗前后 IL - 1β含量均有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论 :UC患者血清中 IL - 1β含量随病变程度的加重而增加 ,治疗后明显下降。表明 IL - 张文俊 许国铭 李兆申 龚燕芳 屠振兴 许爱芳关键词:溃疡性结肠炎 白细胞介素1Β 酶联免疫吸附 UC 酶联免疫吸附法 疼痛性慢性胰腺炎死亡风险因素分析 被引量:2 2009年 目的探讨慢性胰腺炎(CP)患者生存率,分析病死原因及病死相关因素。方法收集1997年至2007年7月首发年龄≥18岁的疼痛性CP患者的资料;寿命表法计算患者累积生存率;建立COX比例风险模型进行逐步回归分析。结果成功随访346例CP患者(87.2%),男:女=2.4:1,首次住院年龄、首发年龄分别为(47±14)岁和(43±15)岁,随访时问为(34.3±27.1)个月;酒精性CP22.2%,胆源性CP26.0%;总病死率9.8%(34/346),病死时间为腹痛首发后的(62.5±61.1)个月,病死原因主要为胰腺癌和其他部位癌症;腹痛首发后2、5、10年的CP累积生存率分别为96.3%、93.6%和86.4%。逐步回归分析显示,首发年龄≥51岁、出院后腹痛程度无缓解和腹痛频率增加、未戒烟、无腹泻等因素与病死有关,风险比分别为3.4、3.5、4.2、2.8和17.7。结论国内CP病死率较国外低,病死原因主要为胰腺癌。对首发年龄大、出院后腹痛程度无缓解和腹痛频率增加、未戒烟及无腹泻CP患者尤应高度警惕。 王伟 廖专 李兆申 陈洁 满晓华 龚燕芳 许爱芳 邹多武 金震东 柏建岭关键词:胰腺炎 慢性 死亡率 胰腺肿瘤 L-精氨酸诱导实验性慢性胰腺炎大鼠模型的可行性分析 被引量:4 2009年 目的初步探讨L-精氨酸诱导慢性胰腺炎大鼠动物模型的可行性。方法将实验动物按完全随机法分为对照组及精氨酸12、24h和7d组,每组10只,间隔1h分两次腹腔内注射L-精氨酸溶液造模。造模后相应时间点检测血淀粉酶、血糖水平,对胰腺组织进行病理评分,VanGieson法对胰腺胶原纤维染色。结果对照组及精氨酸12、24h和7d组的血淀粉酶水平分别为(1634±890)U/L、(3872±2676)U/L、(3307±2197)U/L和(1561±304)U/L,精氨酸7d组血淀粉酶水平显著低于12h和24h组(P〈0.05),恢复到对照组水平。各组间血糖水平无明显差异。对照组及精氨酸12、24h和7d组胰腺的病理分值分别为0.8±0.4、5.1±2.6、6.5±2.2和4.5±1.6,精氨酸7d组胰腺病理评分显著低于24h组(P〈0.05),但仍显著高于对照组(P〈0.05)。精氨酸7d组胶原染色范围明显增加,其他各组未见明显胶原染色。结论L-精氨酸腹腔注射后7d可引起胰腺组织纤维化及管状复合结构增生,可用于探索慢性胰腺炎大鼠模型。 满晓华 赵航 徐克群 龚燕芳 高军 杜奕奇 许爱芳 李兆申关键词:胰腺炎 慢性 精氨酸 化疗药物对胰腺癌细胞株SW-1990蛋白质谱表达的影响 被引量:1 2006年 目的探讨化疗药物作用下胰腺癌细胞株蛋白质谱的变化,寻找差异表达的蛋白质,为临床化疗提供理论依据。方法利用蛋白质组学技术,观察胰腺癌细胞株SW-1990经吉西他滨和5-氟尿嘧啶(5-FU)处理后,其蛋白质谱的变化,鉴定其差异表达的蛋白质。结果培养细胞受抑制约50%时,吉西他滨为1-100ng/ml。5-FU为250-2500 ng/ml。质谱鉴定了6个差异表达的蛋白质,对照组1个,加药组5个。结论对细胞株的作用,吉西他滨明显优于5-FU。吉西他滨参与了糖代谢和酯类代谢。β-肌动蛋白、MGC:19713、KIAA1058蛋白等某些高表达的差异蛋白质可能成为观察化疗效果的重要指标。 李兴华 李兆申 龚燕芳 吴红玉 许爱芳 金晶 屠振兴关键词:蛋白质组学 胰腺癌 吉西他滨 5-氟尿嘧啶