许彩民
- 作品数:81 被引量:401H指数:9
- 供职机构:中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 稳定高表达A型清道夫受体的人肾小球系膜细胞系的建立及其受体功能被引量:1
- 2006年
- 目的探讨A型清道夫受体(SR-A)在人肾小球系膜细胞中的表达功能和受体特异性。方法采用脂质体转染法,将人SR-A cDNA转染入人肾小球系膜细胞,建立稳定高水平表达SR-A的人肾小球系膜细胞系(HMC-SCR)。RT-PCR法检测SR-A mRNA的表达,使用免疫荧光法、油红“O”细胞化学染色及激光共聚焦显微镜检测HMC-SCR对配体氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)和乙酰化低密度脂蛋白(Ac-LDL)的摄取及配体间的竞争作用。结果与未转染细胞相比,转染SR-A的HMCL对修饰低密度脂蛋白的摄取功能明显增强;40倍过量未标记的Ox-LDL、Ac-LDL竞争荧光D il标记的Ac-LDL的摄取,但未修饰的LDL对该受体无明显竞争抑制作用。结论Ox-LDL和Ac-LDL通过同一SR-A进入系膜细胞内,SR-A对修饰的低密度脂蛋白具有较高的亲和力和特异性。
- 叶文玲李学旺许彩民李航李艳段琳金晶
- 关键词:肾小球系膜细胞氧化低密度脂蛋白
- GPI-Pr缺失与阵发性睡眠性血红蛋白尿症粒细胞凋亡的关系
- 2001年
- 采用无血清培养诱导细胞凋亡 ,用Annexin V荧光试剂盒标记、PI标记、流式细胞仪检测 ,以及琼脂糖凝胶电泳分析DNA断裂等方法 ,研究糖基磷脂酰肌醇锚蛋白 (GPI Pr)缺失与阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)粒细胞凋亡的关系。结果显示 ,PNH粒细胞的凋亡率比正常人粒细胞的凋亡率明显为低 ;分析凋亡率与粒细胞的CD5 9缺失率之间的关系 ,未发现二者有相关性。结果表明 ,PNH的粒细胞比正常人粒细胞相对不易凋亡 ,粒细胞上GPI PrCD5
- 刘海丽许彩民刘复强吕照江吕照江潘华珍
- 关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿症CD59PNH粒细胞
- 阵发性睡眠性血红蛋白尿症病人骨髓中正常及异常造血细胞Bcl-2及Bax表达的初步观察
- 1999年
- 观察了阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)病人骨髓中正常及异常造血细胞培养前、后Bcl-2及Bax的表达,并与正常对照作了比较,以探讨二者生存能力差异的可能机制。实验采用间接免疫荧光标记及流式细胞术检测。结果发现PNH病人骨髓中正常(CD59^+)及异常(CD59-)单个核细胞(BMMNC)培养前、后Bcl-2和Bax表达阳性率及Bcl-2表达的平均荧光强度值(MFI),与正常对照相比均无显著性差异,但Bax表达的MFI值则均较正常对照者显著升高,由此导致病人BMMNC的Bcl-2及Bax的MFI比值降低,但病人正常及异常BMMNC之间Bcl-2及Bax表达的MFI值则无显著性差异,表明PNH病人BMMNC Bax分子表达增多导致Bcl-2与Bax分子比例失衡可能是其较正常BMMNC生存能力降低的原因之一,而病人正常及异常BMMNC生存能力的差异除Bcl-2和Bax调节机制外,可能还涉及其它与细胞凋亡有关的步骤及环节。
- 李强张之南吕照江许彩民潘华珍
- 关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿症骨髓造血细胞单个核细胞BCL-2
- 应用PCR-Heteroduplex银染法检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症PIG-A基因突变被引量:2
- 1997年
- 应用PCR-Heteroduplex银染法检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症PIG-A基因突变许彩民杜涛杨洋傅新容吕照江陈忠雷张之南潘华珍多聚酶链反应-异源双链分析(PCR-Heteroduplex)是一种简便、灵敏的基因分析方法[1]。适用于克隆病单个碱...
- 许彩民杜涛杨洋傅新容吕照江陈忠雷张之南潘华珍
- 关键词:血红蛋白尿症PNHPCRPIG-A
- AXL基因在骨髓增生异常综合征外周血单个核细胞中的表达被引量:1
- 2003年
- 目的 探讨AXL基因在正常人、骨髓增生异常综合征 (MDS)及其他血液病患者外周血单个核细胞中的表达情况。方法 采用RT PCR法。结果 ①AXL基因在 10例正常人外周血单个核细胞中不表达 ,正常骨髓单个核细胞中有表达。② 5 0例MDS患者的外周血单个核细胞中有 4 1例 (82 % )AXL基因阳性。FAB亚型与AXL表达关系 :3 5例难治性贫血 (RA)者中 2 7例阳性 ,3例环形铁粒幼细胞性难治性贫血 (RAS)阳性 ;9例难治性贫血伴过多母细胞 (RAEB)者中 8例阳性 ,3例难治性贫血伴过多母细胞伴有转化 (RAEB T)患者均阳性。 6例实验时临床不能确诊为MDS者AXL基因阳性 ,经随访骨髓转为MDS ;3例骨髓疑为MDS或诊为MDS者AXL基因阴性 ,经随访确诊为其他疾病。③ 12例再生障碍性贫血 (AA)、1例缺铁性贫血 (IA)、1例溶血性贫血、2例夜间阵发性血红蛋白尿 (PNH)、3例特发性血小板减少性紫癜 (ITP)患者的AXL均阴性。
- 施举红陈书长许彩民李德高沈悌
- 关键词:骨髓增生异常综合征单个核细胞RT-PCR法
- 亚硒酸钠诱导NB4细胞中细胞色素c氧化酶亚基Ⅳ的下调机制被引量:1
- 2009年
- 目的探讨亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡的过程中,细胞色素c氧化酶亚基Ⅳ(COX Ⅳ)表达的变化情况及其机制和意义。方法用20μmol/L亚硒酸钠作用NB4细胞不同时间,Western blot和RT-PCR分别检测COX Ⅳ蛋白和mRNA表达的变化。活性氧清除剂预处理细胞后Western blot检测COX Ⅳ蛋白表达的变化以及caspase-3的激活。caspase-3抑制剂预处理细胞后Western blot检测COX Ⅳ蛋白表达的变化。瞬时转染干扰NB4细胞中COX Ⅳ表达后,流式细胞术检测细胞凋亡。结果亚硒酸钠诱导NB4细胞COX Ⅳ蛋白表达显著下调,但mRNA表达水平无变化。活性氧清除剂能完全逆转亚硒酸钠引起的COX Ⅳ表达下调与caspase-3激活。caspase-3抑制剂能部分逆转亚硒酸钠引起的COX Ⅳ表达下调。干扰COX Ⅳ表达后,亚硒酸钠诱导的细胞凋亡显著增加。结论在亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡过程中,COX Ⅳ在蛋白水平显著下调。活性氧介导COX Ⅳ下调与caspase-3激活,caspase-3在一定程度上参与COX Ⅳ表达下调,抑制COX Ⅳ能显著提高NB4细胞对亚硒酸钠诱导凋亡的敏感性。
- 李竹石杨洋许彩民
- 关键词:凋亡细胞色素C氧化酶活性氧
- 体外转运富含GPI-蛋白的红细胞囊泡改善PNH溶血的探索被引量:1
- 1999年
- 目的 在体外观察是否能将富含CD59 的红细胞囊泡转运到缺失CD59的阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)红细胞膜上,以改善PNH 溶血,为PNH的治疗提供新的线索。方法 采用免疫亲和层析分离技术分离PNH CD59- 红细胞,采用Western 印迹分析、流式细胞仪及蛇毒因子溶血实验等检测和分析红细胞与囊泡的结合。结果 Western 印迹分析显示,红细胞囊泡含有CD59;流式细胞仪测定表明,PNH CD59- 红细胞与囊泡结合后,CD59 的荧光标记率明显增高(P< 0001);蛇毒因子溶血实验显示,加入囊泡后PNH CD59- 红细胞溶血度也显著下降(P< 005)。结论 红细胞囊泡上的CD59 可以在体外转运到PNH CD59- 红细胞上,并产生抑制补体溶血的作用,使PNH CD59-
- 杨洋许彩民潘华珍吕照江张之南
- 关键词:PNH血红蛋白尿症
- 朊蛋白糖基化修饰及其生物学特点研究
- <正> 目的:研究糖基化修饰与生物功能的关系。朊蛋白(Prion protein,PrP)是一种具有两个糖基化位点(aa181—183,aa197—199)的膜蛋白。人们推测朊蛋白翻译后修饰的变化同朊蛋白的功能有密切的关...
- 陈岚杨洋赵琳董小平许彩民
- 文献传递
- 亚硒酸钠诱导结直肠癌SW480细胞系凋亡被引量:1
- 2016年
- 目的探讨亚硒酸钠诱导结直肠癌SW480细胞凋亡的信号通路。方法将SW480细胞分为三组,分别进行亚硒酸钠、Mn TMPy P以及两者联用处理;用DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧;Western blot方法检测细胞信号通路JNK和ATF-2的磷酸化,以及c-Myc、c-Jun、c-Fos、cyclin D1、cyclin A2、Bcl-2等相关蛋白表达;流式细胞术检测SW480细胞凋亡率。结果亚硒酸钠可使SW480细胞产生活性氧;抑制JNK和ATF-2的磷酸化(P<0.05),下调c-Myc、c-Jun、c-Fos、cyclin D1、cyclin A2、Bcl-2的表达诱导SW480细胞凋亡(P<0.05);用活性氧抑制剂Mn TMPy P可减轻亚硒酸钠所致的上述变化(P<0.05)。结论亚硒酸钠可通过产生活性氧,抑制JNK和ATF-2的磷酸化,下调c-Myc、c-Jun、c-Fos、cyclin D1、cyclin A2、Bcl-2的表达,促进SW480细胞的凋亡。
- 唐振东慈雅丽杨洋许彩民
- 关键词:亚硒酸钠SW480细胞JNK细胞周期蛋白
- 小剂量亚硒酸钠和全反式维甲酸联合使用诱导NB4细胞的凋亡及分化被引量:7
- 2002年
- 目的 研究小剂量亚硒酸钠 (2~ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法 采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 ,通过流式细胞术检测粒系分化细胞表面特异抗原CD11b表达 ,NBT还原实验检测细胞分化。结果 阴性对照组细胞PS外翻率为 1.2 % ,5 μmol/L亚硒酸钠处理NB4细胞 4 8h后PS外翻率为 0 .8% ,0 .1μmol/LATRA诱导 4 8h后PS外翻率为 2 .0 % ,与对照组相比 ,差异均无显著性 ,而两者联合作用NB4细胞 2 4 ,36 ,4 8h后的PS外翻率分别达到 18.3%、2 5 .9%、5 0 .0 % ,DNA电泳呈典型的梯形带。小剂量 (2 μmol/L)亚硒酸钠没有诱导NB4细胞分化的能力 ,但其与 0 .1μmol/L的ATRA联合使用同单独使用 0 .1μmol/L的ATRA相比 ,CD11b表达阳性细胞率进一步增加 ,NBT还原能力也进一步增强。结论 小剂量的亚硒酸钠与ATRA联合使用可诱导NB4细胞发生凋亡及分化。
- 孙义民左路许彩民沈悌潘华珍张之南
- 关键词:亚硒酸钠全反式维甲酸细胞分化NB4细胞株急性白血病