詹苗 作品数:10 被引量:53 H指数:5 供职机构: 广东药学院基础学院 更多>> 发文基金: 广东省社会发展科技计划项目 广东省重大科技专项 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
华支睾吸虫RNA聚合酶Ⅱ延长因子的分子生物学及免疫学定位研究(英文) 2009年 目的由华支睾吸虫成虫cDNA文库中筛选重要新基因并进行功能基因研究。方法生物信息学、基因克隆表达技术、免疫识别、S-P免疫组化等方法。结果由华支睾吸虫成虫cDNA文库成功分离到了CsRPEF(RNA聚合酶Ⅱ延长因子)基因。通过BLASTX程序同源性比对,显示CsRPEF基因与小鼠和人类的RPEF基因同源性为82%。成功构建了CsRPEF原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行了大规模诱导表达,所表达的GST融合蛋白经蛋白酶原切割后获得CsRPEF重组蛋白。凝胶扫描分析和Bradford法显示,CsRPEF重组蛋白的纯度和浓度分别为85%和(0.73±0.02)mg/ml。将CsRPEF重组蛋白接种至BALB/c小鼠进行免疫实验。间接ELISA法显示免疫小鼠抗体滴度达1∶150。免疫识别结果显示此抗体可识别20 ku CsRPEF重组蛋白和华支睾吸虫20 ku虫源性蛋白。S-P免疫组化方法显示CsRPEF主要定位于华支睾吸虫成虫的表皮、皮下组织和虫卵三部位。CsRPEF新基因序列GenBank的登录号为EU232119。结论CsRPEF基因是防治华支睾吸虫病生物药物研发的重要靶点。 张咏莉 吴德 詹苗 胡旭初 徐劲 吴忠道 余新炳关键词:华支睾吸虫 免疫识别 免疫定位 山核桃树皮水煎剂体外抗肿瘤作用研究 被引量:10 2008年 目的:探讨山核桃树皮水煎剂的体外抗肿瘤作用。方法:采用细胞培养、形态学观察、绘制细胞生长曲线、MTT实验、细胞周期测定等方法。结果:山核桃树皮水煎剂能使肿瘤细胞体积缩小,透明度降低,细胞膜皱缩;细胞生长曲线向右下转药物的半数致死浓度IC50为1.56 mg/ml;高浓度药物促进细胞凋亡,细胞周期阻滞在S→G2期。结论:山核桃树皮水煎剂能抑制人肝癌细胞系SMMC-7721的增殖,高浓度药物能促进细胞凋亡。 詹苗 潘育方 范为 黄清松 张咏莉关键词:SMMC-7721细胞 抗肿瘤作用 山核桃树皮水提物对荷瘤小鼠抑瘤效应及对血象的影响研究 被引量:7 2009年 目的:探讨山核桃树皮水提物对荷瘤小鼠的抑瘤效应及对血象的影响。方法:采用细胞培养、小鼠移植瘤实验、药物瘤体治疗、血象分析等方法研究山核桃树皮水提物对荷瘤小鼠抑瘤效应及其血象的影响。结果:皮下移植瘤动物模型构建成功。在移植瘤小鼠的第1、2、3周的血象检测结果中,山核桃树皮水提物药物高剂量组的白细胞、红细胞、血红蛋白、淋巴细胞分类数量均显著性高于PBS组及中、低剂量组。结论:在肿瘤进展过程中,药物高剂量能显著改善荷瘤小鼠的贫血和免疫状态,中、低剂量的改善作用不明显,达一定剂量的山核桃树皮水提物具有对荷瘤小鼠的抑瘤效应。 张咏莉 詹苗 崔玉强 毛建文 魏凤香 李红枝关键词:抑瘤效应 血象分析 山核桃树皮黄酮提取液对人肝癌Bel-7402细胞p73基因表达的影响 被引量:2 2010年 目的探讨山核桃树皮黄酮提取液对人肝癌Bel-7402细胞p73基因表达的影响。方法体外培养8组人肝癌Bel-7402细胞,分别采用不同浓度的山核桃树皮黄酮提取液处理后提取总RNA。采用RT-PCR法检测其p73基因剪切异构体mRNA的水平,并与正常肝细胞组进行比较。结果持续作用48 h后,黄酮提取液极低剂量组、低剂量组、中剂量组、高剂量组RT-PCR产物的目的条带灰度占总灰度的比例分别为(49.2±2.6)%、(47.5±2.2)%、(29.6±1.6)%、(13.3±1.8)%,极低、低剂量组与中、高剂量组组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。肝癌Bel-7402细胞p73基因剪切异构体mRNA水平随山核桃树皮黄酮提取液浓度增高而逐渐降低,且随剂量增加抑制效应增强。结论山核桃树皮黄酮提取液能抑制肝癌Bel-7402细胞p73基因剪切异构体的过表达,发挥抑制肿瘤细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。 林桂芳 冀军锋 詹苗 崔玉强 张咏莉关键词:黄酮类 肝肿瘤 核桃楸树皮水提物抗人肝癌细胞系SMMC-7721作用机理研究 目的:探讨核桃楸树皮水提物的体外抗肿瘤作用。
方法:采用细胞培养、形态学观察、绘制细胞生长曲线、MTT实验、细胞周期测定等方法。
结果:核桃楸树皮水提物能使肿瘤细胞体积缩小,透明度降低,细胞膜皱缩;细... 张咏莉 崔玉强 詹苗关键词:水提取物 抗肿瘤作用 文献传递 山核桃树及树皮的化学成分及药理作用研究进展 被引量:25 2008年 山核桃又称核桃楸、胡桃、胡桃楸、小核桃等,为胡桃科胡桃属落叶乔木。近几年来有过对山核桃树枝、树叶、树皮、青果等的化学成分及药理作用研究的报道。山核桃树皮具有消炎、止痛、抗氧化、抗肿瘤等作用,对山核桃树皮的药理作用作进一步的研究将有利于开发新的药物和充分利用天然药用资源。 詹苗 张咏莉关键词:药理作用 核桃楸树皮水提物对BALb/c荷瘤小鼠免疫细胞因子影响的实验研究 被引量:5 2009年 目的探讨核桃楸树皮水提物对BALb/c荷瘤小鼠治疗作用及对免疫细胞因子水平的影响。方法采用细胞培养,小鼠移植瘤实验,药物瘤体治疗、免疫细胞因子ELISA检测等方法。结果小鼠移植瘤模型构建成功。在瘤体治疗后,小鼠平均脾重比高、中、低用药组显著高于对照组。在免疫细胞因子的分析中,各实验组动物血清IL-2、IL-10的水平无显著性差异,而高剂量用药组荷瘤小鼠血清IL-10水平显著降低,并且具备剂量-效应关系。结论在肿瘤进展过程中,达至一定剂量的核桃楸树皮水提物具有调节机体免疫功能作用,显著降低血清中IL-10水平为其中一途径。 张咏莉 詹苗 潘育方 范为 李红枝 黄清松关键词:水提物 荷瘤小鼠 免疫细胞因子 华支睾吸虫成虫CsRPEF基因的生物信息学分析 被引量:1 2009年 目的筛选华支睾吸虫的功能基因并进行相应的生物信息学分析。方法使用PCGENE软件、Antheprot-5软件、ExPASy在线分析工具、NCBI上的Blastx程序进行华支睾吸虫RNA聚合酶Ⅱ延长因子(CsRPEF)基因的生物信息学分析。结果获得了CsRPEF基因的序列特征,推测到了CsRPEF的同源蛋白并预测出CsRPEF编码蛋白的分子量、等电点、柔曲性、疏水性、功能性位点等二级结构特征。结论华支睾吸虫成虫CsRPEF基因是一新筛选的功能基因,CsRPEF蛋白是可能参与华支睾吸虫基因转录途径的重要因子。CsRPEF基因的生物信息学分析可为其进一步进行生物学功能的实验研究奠定基础。 范为 詹苗 张咏莉关键词:华支睾吸虫 生物信息学分析 山核桃树皮中黄酮类化合物的提取及含量测定 被引量:4 2009年 目的:探讨山核桃树皮中黄酮类化合物的含量情况以及通过碱提酸沉法提取黄酮类化合物和紫外分光光度法测定黄酮类化合物含量的可行性。方法:将山核桃树皮采用碱提酸沉法,并作紫外分光光度法测定含量和中药成分鉴定等一系列实验。结果:本研究测定山核桃树皮提取物中黄酮浓度为0.275mg/mL,山核桃树皮中总黄酮所占含量为0.053%,样品稳定性实验中标准偏差(RSD)值为0.13%,精密度实验中RSD值为0.05%,回收率实验中平均加标回收率为110.88%。结论:碱提酸沉法提取山核桃树皮中黄酮类化合物及采用紫外分光光度法测定黄酮类化合物含量的方法是可行的,黄酮提取物稳定性好,黄酮含量测定重现性和精密度高。 张咏莉 詹苗 毛建文 潘育方 崔玉强 李红枝关键词:黄酮 野生核桃楸树皮中黄酮类成分的高效液相色谱-质谱法分析 被引量:6 2011年 目的:制备和分析野生核桃楸树皮水提物中的黄酮类成分。方法:采用碱溶酸沉法提取核桃楸树皮水提物中的黄酮类化合物,硅胶柱层析法进行分离纯化,采用液相色谱-质谱法(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)检测黄酮类化合物的成分。结果:由色谱图可以看出,保留时间为4.235s和4.955s时物质的相对含量为62.00%和10.63%,为该黄酮类提取物的2个主要成分。由质谱图可以推断,其含有的主要成分为甲氧基黄酮和柚皮素。结论:液相色谱-质谱法对于快速分析野生核桃楸树皮水提物中的黄酮类活性成分具有可行性。 张咏莉 林桂芳 崔玉强 詹苗 冀军锋关键词:水提物 液相色谱-质谱法