袁异玮
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：江苏大学基础医学与医学技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 携带RhD-CE(2-9)-D基因并检出高效价同种抗-D抗体1例报告被引量：2
- 2012年
- RhD-CE（2-9）-D基因型是中国汉族人群Rh血型中部分D（RhD弱表现型的一种,为D抗原的变异体[1]）的主要等位基因。因其抗原表达极弱,用血清学方法无法检出,常被鉴定为Rh阴性。本研究从1例Rh阴性不全流产妇女血清中检测出高效价的抗-D抗体,并进一步检测其基因型,证实为RhD-CE（2-9）-D基因型,报告如下。
- 周毓菁王雪明袁异玮蒋敏顾国浩李勇张健郑元
- 关键词：RH血型抗-D抗体
- 刚地弓形虫绿色荧光蛋白突变株的构建被引量：2
- 2011年
- 目的构建稳定表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的弓形虫突变株,探讨以其检测宿主细胞感染率的效果。方法在人子宫颈癌(HeLa)细胞中培养弓形虫RH株速殖子,电穿孔法向虫体导入质粒ptubP30-GFP/sag-CAT,氯霉素和极限稀释法筛选稳定表达P30-GFP融合蛋白的突变株,RT-PCR法和荧光显微镜检测GFP蛋白在虫体内的表达。HeLa细胞分别感染1×104～1×107个突变株虫体,24 h后,显微镜计数各孔10个高倍镜视野下具有GFP荧光的HeLa细胞数。流式细胞仪检测"纳虫泡",评估HeLa细胞感染率。结果导入ptubP30-GFP/sag-CAT质粒后,经氯霉素筛选获得阳性克隆。RT-PCR检出虫体GFP基因表达,镜下可见GFP荧光聚集于虫体外膜。HeLa细胞感染率随虫体接种量的增多而增加,接种1×104～1×107个虫体24 h后,具有GFP荧光的HeLa细胞数分别为(14±6)、(133±45)、(332±93)和(443±90)个;流式细胞仪检测HeLa细胞感染率分别为(0.49±0.09)%、(8.76±0.50)%、(21.02±1.49)%和(39.00±3.47)%。结论构建了刚地弓形虫GFP荧光蛋白突变株,为检测虫体在宿主细胞内的增殖提供了新途径。
- 吴亮袁异玮姜旭淦傅行礼逯兆喜涂国华李礼陈盛霞周红
- 关键词：弓形虫突变株绿色荧光蛋白荧光显微镜流式细胞仪
- RhD阴性初筛样本的血清学和基因分型结果被引量：5
- 2012年
- 目的了解初筛RhD阴性血液样本的血清学和基因分型检测结果。方法对107例初筛为RhD阴性血液样本,用间接抗人球蛋白试验(IAT)检测弱D型,用吸收放散试验检测DEL型。对3例弱D型、28例吸收放散试验阳性和35例吸收放散试验阴性的标本进行基因分型检测。结果 107例初筛为RhD阴性的样本用血清学方法检出3例弱D型(2.8%);吸收放散试验检测出阳性30例(28.0%),阴性74例(69.2%)。基因分型结果表明,3例弱D型中2例为RhD阳性,1例为弱D15型;对74例吸收放散试验阴性标本中的35例进行了基因分型,其中RhD阴性28例(80.0%),RhD-CE(2-9)-D型5例(14.3%),DEL 1227A型2例(5.7%);RhD DEL型基因分型检测结果表明,28例吸收放散阳性标本中DEL 1227A型19例(67.9%),未能分型5例(17.9%),未出现条带4例(14.3%)。用RhD阴性鉴定基因分型检测试剂盒对4例未现条带者进行基因分型,结果为弱D15型1例,RhD阴性2例,RhD阳性1例;初筛RhD阴性样本中,血清学检出率为69.2%,基因分型检出率为57.3%,差异无统计学意义(χ2=1.78,P>0.05)。结论初筛为RhD阴性样本中RhD基因存在多态性,DEL 1227A型是DEL型的主要等位基因。
- 周毓菁王雪明袁异玮蒋敏顾国浩李勇张健郑元
- 关键词：RHD阴性弱D型基因分型
