苏晓三 作品数:31 被引量:55 H指数:3 供职机构: 昆明医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省教育厅科学研究基金 云南省应用基础研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
树突状细胞的培养及成熟的鉴定 被引量:6 2015年 目的探讨人体外周血树突状细胞在体外培养诱导其成熟的方法,通过得到成熟的细胞培养技术,对树突状细胞功能的研究奠定实验基础.方法通过Ficoll-Hypaque梯度离心法得到单个核细胞,再诱导使其分化、扩增、纯化形成稳定的树突状细胞,通过树突状细胞自身形态、特异性表型,抗原摄取能力,鉴别培养的细胞,从而得到具有典型特征的树突状细胞.结果树突状细胞培养第7天,加入LPS后,倒置显微镜及扫描电镜下观察,树突状细胞成熟中,细胞胞质增大,细胞膜表面能形成大量树突状突起,表面标志物CD80、CD86、CD11c、HLA-DR的表达增高(P<0.05),共聚焦显微镜下,成熟的树突状细胞对抗原的吞噬能力减弱.结论Ficoll-Hypaque梯度离心法能够得到稳定的树突状细胞体外培养体系. 李望 张升宁 冉江华 苏晓三 李来邦 陈奕明关键词:树突状细胞 表型 抗原 脐血单个核细胞体外诱导树突状细胞及其抗肿瘤效应的实验研究 背景:树突状细胞(dendritic cells,DCs)是机体免疫系统中已知的功能最强的专职抗原呈递细胞,能在体内直接激活初始型T细胞,生成辅助性T细胞和杀伤性T细胞,也能使B细胞生成抗体.近年来,经肿瘤细胞抗原冲击D... 苏晓三关键词:树突状细胞 抗原呈递细胞 脐血单个核细胞 细胞毒T淋巴细胞 文献传递 壳聚糖支架负载SHH和CM-Dil标记的脂肪干细胞移植后存活分化研究 被引量:3 2018年 目的:观察壳聚糖支架负载音猬因子(Sonic hedgehog,SHH)和脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)移植后,ADSCs存活分化的效果。方法:将健康C57BL/6小鼠随机分为A组(PBS+ADSCs)、B组(SHH+ADSCs)、C组(壳聚糖+ADSCs)、D组(壳聚糖+SHH+ADSCs)。将各组混合物分别注射到小鼠背部皮下。术后1、2、4、8周处死小鼠,通过对移植组织一般观察、荧光显微镜观察、HE染色、免疫组化染色来评价移植细胞存活分化的情况。结果:术后8周,壳聚糖支架完全降解,大体观察、HE染色、免疫组化染色均说明壳聚糖支架同时搭载SHH和ADSCs脂肪干细胞存活率较高,新生血管增加,效果均优于A、B、C三组。结论:壳聚糖支架同时负载SHH和ADSCs可有效促进干细胞存活,显著增加血管组织数量。 罗鸣骜 伍尚敏 苏晓三 高嘉 于璐 王翼寅 甘凤山关键词:可注射性 壳聚糖 音猬因子 脂肪干细胞 用于肿瘤免疫治疗的多系活化杀伤细胞的制备方法 本发明公开一种用于肿瘤免疫治疗的多系活化杀伤(Polylineageactivatedkiller,PAK)细胞的制备方法,通过从恶性肿瘤患者或健康人外周血分离单个核细胞,然后将外周血单个核细胞加入抗TCRγδ单抗和IF... 苏晓三 汪珺 王翼寅 陈睿 杨柳 张蕾文献传递 骨髓间充质干细胞通过抑制髓系抑制细胞预防肺纤维化形成 2021年 目的探讨Gr-1^(+)CD11b^(+)髓系抑制细胞(MDSC)在博来霉素(BLM)诱导小鼠肺纤维化形成中的作用以及骨髓间充质干细胞(MSC)对肺纤维化治疗作用的可能机制。方法体外分离培养6周龄雄性BALB/c小鼠间充质干细胞(MSC)。将104只雌性BALB/c小鼠按随机数字表法分为3组:对照组(32只)气管内注入生理盐水(NS)后经尾静脉注射NS;BLM组(32只)气管内注入BLM后经尾静脉注射NS;MSC组(40只)气管内注入BLM后经尾静脉注射MSC(细胞总数1.5×106个)。于造模后第1、3、5、8、11、14、18、21、25、32天采集各组小鼠尾静脉血,流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中Gr-1^(+)CD11b^(+)细胞含量。于造模后第3、8、18和32天各组均处死8只小鼠并摘取小鼠肺脏流式细胞术检测小鼠肺组织中Gr-1^(+)CD11b^(+)细胞含量,同时留取肺组织行Masson染色。提取MSC组小鼠肺组织的DNA,通过聚合酶链反应(PCR)-琼脂糖电泳法检测小鼠的性别决定基因(sry基因)。结果 MSC组第3和第8天时肺泡炎较BLM组减轻(分别为1.32±0.25和2.53±0.56;1.06±0.42和2.27±0.82,均P<0.01);MSC组第18和第32天时肺纤维化较BLM组减轻(分别为1.02±0.44和1.81±0.74;1.51±0.73和2.72±0.54,均P<0.05)。BLM组小鼠PBMC和肺组织中Gr-1^(+)CD11b^(+)细胞较对照组显著升高;MSC组小鼠PBMC和肺组织中Gr-1^(+)CD11b^(+)细胞较BLM组明显降低(P<0.05)。PCR检测结果显示,在MSC治疗后第12、24、48、72和96 h小鼠肺组织可以检测到sry基因。结论 MDSC参与BLM诱导的肺纤维化形成,MSC可以通过抑制MDSC预防肺纤维化形成。 尹燕锋 杨柳 于璐 王翼寅 陈睿 周开华 苏晓三关键词:肺纤维化 间充质干细胞 博来霉素 脐血单个核细胞体外诱导树突状细胞联合CTLs抗肿瘤效应的研究 2006年 目的探讨从人脐血中定向诱导扩增树突状细胞(dendritic cells,DCs)的方法及其在抗肿瘤免疫治疗中的作用.方法常规无菌采集新鲜脐血,密度梯度离心分离脐血单个核细胞(cord b lood mononuc learcells,CBMCs),加入细胞因子(GM-CSF+IL-4+TNF-α)定向诱导培养并进行相应的表型鉴定.观察肿瘤抗原负载后诱导特异性细胞毒T淋巴细胞生成和对肿瘤细胞杀伤作用.结果从人脐血分离到的CBMCs经GM-CSF+IL-4+TNF-α共同培养后,第7天镜下即可见典型形态的DCs,细胞表型检测见CD1 a+细胞比例增加到(20.8±1.62)%.DCs负载肿瘤抗原后能诱导产生肿瘤特异性淋巴细胞,并可特异性抑制YTMLC肿瘤细胞.结论经细胞因子组合可以从脐血中诱导出DCs,并可诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cyto-toxic T-lymphocytes,CTLs)的产生,为进一步开展DCs的实验研究及临床应用奠定了基础. 王熙才 伍治平 蒋永新 苏晓三 金丛国 周永春关键词:脐血单个核细胞 树突状细胞 细胞毒T淋巴细胞 抗原呈递细胞 两种外周血单个核细胞采集方法体外诱导CIK细胞的比较 2013年 目的比较两种外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)采集方法诱导的细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)扩增效率、细胞表型、杀伤肿瘤细胞的活性及其回输至肿瘤患者体内的免疫调节作用.方法 12例肿瘤患者共进行36次CIK细胞体外诱导、扩增,其中6例患者共18次扩增采用血细胞分离机采集PBMCs,另外6例患者共18次培养采用Ficoll密度梯度分离50 mL外周血方法采集PBMCs.结果采用血细胞分离机或Ficoll分离法采集PBMCs经体外诱导获得CIK(分别为A-CIK和F-CIK)细胞数分别为7.47×109(3.7-13.6×10)9和6.37×109(3.8-11.8×10)9.培养至14 d时,>90%的A-CIK和F-CIK细胞表型为CD3+,其中CD3+CD56+,NKG2D+细胞及细胞内TH1细胞因子均显著升高.效靶比为60:1时,A-CIK和F-CIK细胞对Daudi、K562及293的杀伤活性分别为(49.1±17.8)%和(55.3±11.5)%、(67.6±24.1)%和(58.1±17.6)%、(36.4±11)%和(33.7±14.8)%.给肿瘤患者回输自体A-CIK或F-CIK细胞14 d后,外周血中CD3+、CD8+及CD3+、CD56+细胞以及PBMCs内IFN-γ均显著升高.结论采集肿瘤患者50 mL外周血分离的PBMCs足以制备临床治疗使用的CIK细胞. 苏晓三 汪珺 张蕾 金良昆 陈睿 王翼寅关键词:免疫疗法 过继 细胞分离 体外 环状RNA在肿瘤转移中的研究现状 被引量:1 2019年 环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种具有共价闭合环状结构的非编码RNA,具有稳定、保守和特异等特点,其在肿瘤的诊断、治疗以及预后等方面具有重要的作用。肿瘤转移是肿瘤患者治疗失败、预后不良的主要原因。近年来circRNA在肿瘤领域的研究为肿瘤转移的机制研究提供了新的思路。本文就circRNA的特征、机制和功能以及其在肿瘤转移中的作用作一综述。 王丹 苏晓三关键词:肿瘤 糖尿病肾病患者血清血管内皮生长因子影响因素分析 2004年 目的 分析影响 2型糖尿病肾病 (DN)患者血清血管内皮生长因子 (VEGF)水平的因素。方法 采用双抗夹心ELISA法检测 12 2例糖尿病患者血清VEGF水平并与 4 0例健康体检者的血清VEGF水平作对比分析。使用SPSS10 0统计软件包对糖化血红蛋白 (GHbAlc)、血糖、尿白蛋白 (UALB)和肌酐 (Cr)等影响因素进行统计比较分析。结果 非糖尿病肾病 (NDN)组和糖尿病肾病组患者血清VEGF水平明显高于正常对照组(P =0 0 33;P =0 0 0 0 ;P =0 0 0 0 ) ;DN组患者血清VEGF水平明显高于NDN组 (P =0 0 2 0 ;P =0 0 0 0 ) ;糖尿病肾病患者血清VEGF水平受糖化血红蛋白、尿白蛋白等因素影响 (P =0 0 0 0 ;P =0 0 0 0 )。结论 糖尿病患者血清VEGF水平明显升高 ,糖尿病肾病患者血清VEGF水平受糖化血红蛋白、尿白蛋白等因素的影响 ,且随尿白蛋白的增加而增高 ,高水平的血清VEGF有可能参与糖尿病肾病的发生、发展过程 ,并在一定程度上反映病情的严重程度。 童书云 伍治平 于南南 金从国 苏晓三关键词:糖尿病肾病 血管内皮生长因子 影响因素 经纤支镜取材肺癌细胞培养的研究 被引量:2 2013年 目的探讨经纤支镜活检取材并进行原代肺癌细胞培养的方法,以提高培养成功率.方法 30例经纤支镜活检肺癌组织进行原代细胞培养,对肿瘤组织形态与原代细胞培养成功率相关性进行分析.结果 30例经纤支镜取材肺癌细胞培养病例,原代培养成功17例,占总例数的56.67%.纤支镜下呈菜花样生长肺癌组织培养成功率84.62%(11/13);肿瘤沿管壁生长管腔狭窄表面有或无突起的培养成功率分别为66.67%(2/3)和37.5%(3/8);球状肿块质硬培养成功率16.67%(1/6),菜花状与其他采用确切概率法比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论经纤支镜活检肺癌组织体外原代细胞培养简单易行,阳性率可达56.67%,且原代培养成功率与纤支镜下肿瘤组织形态相关. 周开华 苏晓三 金志贤 和煦 杜俊毅关键词:肺肿瘤 支气管镜检查