王黎丽
- 作品数:3 被引量:16H指数:2
- 供职机构:安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室更多>>
- 相关领域:农业科学理学更多>>
- 基于单抗技术的三聚氰胺ELISA检测方法的建立
- 三聚氰胺(英文名:Melamine)是一种重要的三嗪类含氮杂环有机化工原料,广泛用于塑料、染料、化肥的生产和纺织行业。动物实验表明,长期摄入三聚氰胺可能会导致繁殖障碍、膀胱炎、慢性肾炎、肾结石、甚至膀胱癌。目前分析三聚氰...
- 王黎丽
- 关键词:三聚氰胺单克隆抗体酶联免疫分析法
- 文献传递
- 2种制备三聚氰胺酶标抗原方法的比较被引量:2
- 2011年
- [目的]对直接和间接法制备酶标记三聚氰胺抗原进行比较。[方法]2种方法均用辣根过氧化物酶和过碘酸钠法,但直接法是酶与三聚氰胺偶联,而间接法是用酶标记三聚氰胺与载体蛋白OVA的结合物。用上述方法分别制备了2种酶标抗原后,从酶活性、抗原性和效价方面对这2种酶标抗原做质量对比试验。[结果]间接法制备的HRP-OVA-MEL有抗原性,且效价达到1∶2 560以上,而直接法制备的HRP-MEL却没有抗原性,且效价较低。[结论]间接法制备的三聚氰胺酶标抗原的活性比直接法好。
- 王黎丽余为一
- 关键词:三聚氰胺辣根过氧化物酶
- 基于单克隆抗体的三聚氰胺ELISA检测方法的建立被引量:14
- 2011年
- 建立三聚氰胺直接和间接竞争ELISA检测方法。三聚氰胺(melamine)-BSA免疫BALB/c小鼠,通过融合小鼠脾细胞与SP2/0细胞,制备分泌MEL单克隆抗体(monoclonal anti-body)的细胞株;体内诱生腹水制备MEL-mAb。用高碘酸钠法制备MEL-OVA-HRP偶联物并对其活性进行鉴定。分别用MEL-OVA和制备的MEL-mAb包被,用三聚氰胺标准液作为抑制物,做直接和间接竞争ELISA,并对两种ELISA方法在灵敏度、线性检测范围、检测时间进行比较。筛选出4株可以稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株。其中的C4株腹水效价达到1∶104,亲和力常数(Ka)为2.92×108L/mol。三聚氰胺间接竞争ELISA和直接竞争ELISA检测法的IC50分别为3.12μg/L和56.88μg/L,线性检测范围分别为0.05~10μg/L和0.1~1 000μg/L。两种竞争ELISA方法都能应用于三聚氰胺的快速检测,但间接竞争ELISA比直接竞争ELISA更加灵敏。
- 王黎丽陈芳芳吴超余为一
- 关键词:三聚氰胺单克隆抗体间接竞争ELISA