王青
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：河北农业大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 玉米大斑病菌PKC基因同源重组载体的构建及启动子序列分析
- 玉米大斑病菌是引起玉米产生大斑病的病原真菌,该病害对玉米产量及品质造成严重的影响。玉米大斑病菌从孢子的萌发、附着胞形成及成熟到侵入寄主体内是一个复杂的过程,可通过有丝分裂原激活蛋白激酶(Mitogen-activated...
- 赵巍王青郝志敏韩建民董金皋
- 关键词：玉米大斑病菌蛋白激酶C启动子
- 玉米大斑病菌PKC基因反义表达载体的构建
- @@玉米大斑病菌是引起玉米大斑病的病原真菌，该病害对玉米产量及品质造成严重的影响。玉米大斑病菌从孢子的萌发、附着胞形成及成熟到侵入寄主体内是一个复杂的过程，可通过不同的信号转导途径来调控。研究表明，Ca2+信号转导途径对...
- 赵巍王青郝志敏韩建民董金皋
- 关键词：玉米大斑病菌反义表达载体
- 文献传递
- 玉米大斑病菌蛋白激酶C基因的克隆及表达规律分析被引量：4
- 2011年
- 【目的】克隆蛋白激酶C基因(PKC)及其启动子,验证该基因拷贝数,同时对PKC的表达规律进行研究,了解该基因在信号转导途径中的激活条件,为进一步研究该基因的功能奠定基础。【方法】首先通过简并引物PCR法获得PKC的同源片段,再利用Genome walking技术克隆片段的3′端和5′端侧翼序列,采用RT-PCR法扩增基因全长,并对基因结构和上游调控元件进行生物信息学分析。利用Southern blotting验证基因拷贝数。最后,利用半定量RT-PCR技术研究玉米大斑病菌在不同碳源、氮源培养以及非生物胁迫条件下,PKC的表达量的变化规律。【结果】获得PKC全长序列及其上游部分启动子区,生物信息学分析表明,PKC全长DNA序列为3 837 bp、cDNA序列为3 516 bp。由7个外显子和6个内含子组成,编码产物包含1 171个氨基酸残基。在1 380 bp的上游侧翼序列中包含CAAT-box及TATA-box,并且存在热激转录因子(HSF)结合元件和SP1、AP1等结合元件。PKC在玉米大斑病菌基因组中以单拷贝形式存在。半定量RT-PCR结果表明:在以蔗糖为碳源时PKC表达量高于其它碳源,铵态氮为氮源时PKC的表达明显受到抑制。重金属离子Mn2+、Cu2+、Zn2+显著抑制PKC表达。在高渗胁迫环境中下,山梨醇抑制PKC表达,且抑制程度与浓度成正相关;而高浓度NaCl造成高渗胁迫时,PKC由低浓度NaCl时的低丰度表达状态中被激活,表达量迅速增加。【结论】玉米大斑病菌PKC及其启动子的成功克隆与该基因的表达规律丰富了植物病原真菌的生物信息学资源,为深入了解植物病原真菌信号转导途径奠定了基础。
- 赵巍王茜郝志敏王青宋文静韩建民董金皋
- 关键词：玉米大斑病菌蛋白激酶C启动子半定量RT-PCR
- 玉米大斑病菌PKC基因敲除及正、反义表达载体的构建
- 为明确玉米大斑病菌信号转导途径中的 PKC 基因(Protein kinase C,PKC)与分生孢子萌发和附着胞形成的关系,本试验构建了玉米大斑病菌 PKC 基因敲除(同源重组替换)载体及正、反义表达载体,为创制突变体...
- 王青韩建民董金皋
- 关键词：玉米大斑病菌
- 文献传递
- 玉米大斑病菌PKC基因同源重组载体的构建及启动子序列分析
- 玉米大斑病菌是引起玉米产生大斑病的病原真菌,该病害对玉米产量及品质造成严重的影响。玉米大斑病菌从孢子的萌发、附着胞形成及成熟到侵入寄主体内是一个复杂的过程,可通过有丝分裂原激活蛋白激酶(Mitogen-activated...
- 赵巍王青郝志敏韩建民董金皋
- 文献传递
- 玉米大斑病菌PKC基因的功能研究
- 蛋白激酶C/(protein kinase C,PKC/)是一种依赖磷脂和钙的蛋白激酶,是Ca2+信号途径中的成员。为了明确蛋白激酶C与分生孢子萌发、附着胞形成及致病性之间的关系,本文利用PKC特异性抑制剂—白屈菜赤碱/...
- 王青
- 关键词：玉米大斑病菌蛋白激酶C附着胞基因敲除
- 文献传递
