王治东
- 作品数:66 被引量:118H指数:6
- 供职机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学核科学技术环境科学与工程更多>>
- 功能未知基因LOC410296的表达载体构建及小鼠抗血清制备被引量:2
- 2014年
- 目的为深入研究功能未知基因LOC401296,首先获取其全长序列,实现LOC401296分子的真核和原核表达,并制备针对LOC401296蛋白的抗血清。方法采用PCR方法克隆LOC401296编码区全长序列,利用pET28B和pCMV-Myc质粒构建LOC401296原核表达和真核表达载体,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白原核表达,目的蛋白经纯化、复性后免疫小鼠制备抗血清。结果 PCR克隆得到LOC401296编码区全长序列,成功构建LOC401296原核及真核表达载体,IPTG诱导目的蛋白在大肠杆菌体内表达,用纯化蛋白免疫小鼠获得抗人LOC401296蛋白血清,ELISA检测抗血清效价达1∶64 000,Western印迹证实LOC401296真核表达载体成功表达且抗血清特异性良好。结论获得LOC401296基因编码区全长序列,成功构建了LOC401296基因表达载体,分别在大肠杆菌和真核细胞内实现LOC401296蛋白原核表达和真核表达,获得小鼠抗人LOC401296蛋白抗血清,为LOC401296基因功能研究奠定了基础。
- 沈丽萍陈虹张学清周建平林仲武王治东陈英
- 关键词:原核表达真核表达蛋白纯化抗血清
- 全发根DNA损伤彗星电泳检测方法的建立
- 背景:鉴于目前反恐斗争及核事故应急的需要,急待快速灵敏而又取材方便的新检测方法来替代需时较长的染色体金标准方法,对现场大批量受照人员做出快速分类,以利临床有针对性地进行治疗。彗星电泳是一个快速灵敏准确的检测DNA损伤的方...
- 曾发贵王治东汪传高张学清陈英
- 关键词:电离辐射彗星电泳DNA损伤生物剂量计
- TLR5-NF-κB信号通路及其在放射医学领域的应用前景被引量:1
- 2011年
- TollLike Receptor家族(TLRs)是一类介导微生物先天免疫的受体家族。1996年Lemaitre等首先在果蝇体内发现了Toll蛋白,在果蝇体内研究发现该蛋白在真菌感染引起的免疫反应中发挥重要作用。目前,在哺乳动物细胞中发现了13种与果蝇同源的Toll蛋白,其中,人体存在10种Toll样受体,分别命名为TLR1~TLR10。
- 周仕香王治东
- 关键词:NF-ΚB信号通路RECEPTORTOLL样受体哺乳动物细胞受体家族
- Hp/DNA双参数流式细胞术的建立及在小鼠骨髓细胞辐射损伤研究中的应用
- 结合珠蛋白(Hp)是一种应急蛋白,主要来源于肝细胞,在某些疾病状态下血清含量明显增加,而检测血液细胞中Hp的报道较少。为了观察Hp在Coγ线所致放射损伤小鼠骨髓细胞中的变化规律,探讨Hp与细胞周期和凋亡的关系,我们应用间...
- 董波陈肖华王治东饶亚岚张军权张燕毛秉智
- 文献传递
- 化合物2G2抑制K562细胞增殖并诱导凋亡被引量:1
- 2007年
- 目的建立基于白血病细胞K562生长活力的小分子化合物筛选的高通量筛选模型,筛选特异性针对慢性粒细胞白血病(CML)增殖抑制的先导化合物。方法以K562细胞系为实验对象,在96孔板上,利用MTS/PMS比色实验测定化合物对细胞活力的影响,建立具有抑制K562细胞活性的化合物筛选模型,并应用该模型完成了1000多种小分子化合物的筛选,对筛选得到的活性化合物通过3H-TdR掺入实验、细胞生长曲线、细胞周期和凋亡检测等实验进行验证和分析。结果建立并利用96孔板药物筛选模型,筛选获得一个具有一定特异性抑制K562细胞增殖的化合物——2G2。结论成功建立了抗白血病药物的筛选方法,为白血病治疗药物的开发研究提供了新的筛选模型。
- 翟倩李扬李长燕詹轶群徐诚望王治东丁亚丽李莉刘刚杨晓明汪思应
- 关键词:K562细胞
- MyD88干涉慢病毒颗粒的包装和鉴定
- 2010年
- 目的制备MyD88分子的慢病毒干涉颗粒,建立稳定下调MyD88的HEK293细胞系。方法将携带特异性干涉序列的DNA片段克隆入干涉质粒pSicoR中,并制备携带不同干涉序列的慢病毒颗粒。将慢病毒颗粒感染HEK293细胞,建立稳定细胞系,经RT-PCR和报告基因分析方法确定不同干涉序列对MyD88表达的下调及信号通路激活的阻断作用。结果成功制备携带干涉序列的慢病毒颗粒,并获得稳定感染慢病毒的HEK293细胞系,经鉴定发现感染912位序列的细胞MyD88mRNA表达水平下调为对照组的28%,对CBLB502的激活作用下降为对照组的24%。结论成功制备MyD88的慢病毒干涉颗粒,可用于建立MyD88稳定下调的细胞系。
- 周仕香王治东董波张学清韩春光高荣莲刘芬菊陈肖华
- 关键词:慢病毒RNA干涉细胞系质粒
- 成年人自发染色体畸变率与微核率的本底状况再分析
- 目的 为了解环境因素对人类遗传物质的影响,以便正确评估放射从业人员以及低剂量辐射的健康效应,对87名成年人进行了自发染色体畸变率与微核率的本底水平调查.方法 采用提前加秋水仙素和松胞素B微核法分别制备染色体与微核标本,M...
- 张学清陈英王治东王远周平坤
- TLR5激动剂CBLB502蛋白原核表达及辐射防护作用验证
- 目的:为了研究TLR5受体激动剂及相关信号通路在电离辐射损伤中的保护作用,原核表达并纯化TLR5受体的激动剂CBLB502蛋白,并利用小鼠实验验证表达蛋白的辐射防护作用,为进一步的研究奠定基础。方法:首先采用PCR技术获...
- 王治东葛常辉许望翔詹轶群汤立宣曹萌萌杨晓明
- 不同LET低剂量辐射诱发人外周血淋巴细胞微核的剂量-效应关系被引量:2
- 2011年
- 采用松胞素B微核法,分别检测了60Coγ射线1、2C重离子2、52Cf混合中子三种射线0~1 Gy(0、0.25、0.5、0.75、1 Gy)照射人离体外周血的微核率,建立了相应的微核低剂量-效应曲线,并对其剂量-效应关系进行比较。结果表明6,0Coγ射线2、52Cf混合中子的剂量-效应关系均为线性平方模型,拟合方程分别为YCo=0.008+0.016D+0.075D2(R2=0.9645,剂量为0~1 Gy)和YCf=0.008+0.297D+0.075D2(R2=0.9842,0~1 Gy);12C重离子是指数模型,拟合方程为Yc=0.033e1.9732D(R2=0.9978,剂量为0.25~1 Gy)1。2C重离子2、52Cf混合中子造成的微核率明显高于60Coγ射线。在1 Gy以内低剂量范围,高LET射线对离体外周血淋巴细胞的损伤明显高于低LET射线,且252Cf混合中子的相对生物效应(RBE)高于12C重离子。
- 汪传高杜杰曾发贵王治东张学清穆晓峰李坤鹏王仲文陈英
- 关键词:LET^60CO微核低剂量
- 利用基因芯片筛选辐射损伤早期生物标志物被引量:9
- 2014年
- 以人外周血全血为研究对象,筛选本底值均一的辐射敏感基因,寻找辐射损伤早期的生物标志物。采集3名健康成人外周血,采用?-射线对其分别进行0、0.75、2和6 Gy照射,照射后2 h提取全血总RNA,利用全基因组芯片筛选差异表达基因,并分析差异表达基因在3个个体中的本底值。结果显示,共筛选到15个具有相对均一本底值的辐射诱导基因,这些基因照射后的变化具有一定的剂量依赖性:ISG20L1、TRAF4和TRIAP1等3个基因在0.75、2和6 Gy 3个剂量照射后2 h均上调2倍以上;LOC345537、POLH、SPIB、TNFSF9和TCL1A等5个基因在2 Gy和6 Gy照射后2 h变化2倍以上,其中TLC1A为下调表达,其余4个上调表达;C12orf5、DDB2、GADD45A、MADCAM1和RPS27L仅在6 Gy照射后2 h上调2倍以上。
- 王治东沈丽萍林仲武张学清李孝鑫陈英
- 关键词:电离辐射基因芯片生物标志物