王寰宇
- 作品数：8 被引量：47H指数：4
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 人干扰素-γ植物双元表达载体的构建被引量：9
- 1999年
- 为研究在药用植物中表达人干扰素 (IFN) ,构建了人IFN -γ植物双元表达载体。方法是将IFN -γ基因的pstI片段插入克隆载体PBluescriptSK(+) 中 ,通过蓝白斑筛选以xbaI kpnI证实 ,以ndeI kpnI鉴定插入方向。得到中间载体PSKIFN,用xbaI kpnI双酶切PSKIFN ,回收 1.3kb片段 ,将此片段插入植物表达载体PROKII上 ,经限制性酶切分析及自动测序 ,结果证实插入片段大小及序列正确 ,构建获得成功 ,为进一步在药用植物中表达IFN
- 张奉学符林春黄玲郭兴伯李国桥康良仪韩爱东王寰宇
- 关键词：转基因植物药用植物
- 中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备被引量：7
- 2001年
- 经PCR获得了中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)外壳蛋白(CP)基因,并克隆到pGEM-7Zf(+)载体上.序列分析表明,TYLCV-CHI感染番茄或烟草时,CP基因的核苷酸序列发生变化,并且在烟草上随感染时间的延长,突变频率增高.连接到含有编码tRNAarg4基因argU的表达载体pSBET后,TYLCV-CHI CP基因在大肠杆菌中以包含体形式得到大量表达(约33 ku).以表达的蛋白作抗原免疫家兔,制备了抗TYLCV-CHI CP的抗血清.ELISA实验表明,该血清与抗原特异反应,血清效价为1:3000.Western印迹实验还表明,该血清除了与感染TYLCV-CHI的番茄、烟草有特异免疫反应外,还与感染南瓜曲叶病、烟草曲叶病的叶片有免疫反应,表明这些病毒之间有明显的血清学关系.
- 张玉满王寰宇刘玉乐
- 关键词：中国番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白
- 中国南瓜曲叶病毒DNAA的克隆及其全序列被引量：4
- 2001年
- :对引起我国南瓜曲叶病的病毒分离物DNA的克隆和序列分析表明 ,中国南瓜曲叶病毒DNAA由 2 741个核苷酸组成 ,共编码 6个开放阅读框 (ORF) ,其中病毒链有 2个ORF :AV1 (2 56aa)和AV2 (1 40aa) ,AV1为外壳蛋白基因 ;病毒链的互补链有 4个ORF ,AC1 (2 4 3aa)编码复制酶基因 ,AC2 (1 34aa)编码反式激活蛋白 ,AC3(1 36aa)和AC4(1 72aa) ,该病毒属于旧世界Begomoviruses,是一个粉虱传播的联体病毒。
- 殷勤燕杨怀义王寰宇蔡健和秦碧霞田波
- 关键词：基因组全序列
- 改良聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA被引量：15
- 1999年
- 本文介绍了应用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的改进方法。与以往方法相比,本方法从配制凝胶储备液,无需封口的水平灌胶,适当地提高电泳的电压梯度,采用改良银染法检测,省却凝胶固定,银染法DNA的纯化方法,及溴化乙锭染色法的操作等一系列改进措施,使聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的操作得到简化,更便捷,并减小了对人与环境的毒害作用。
- 李宏业范树国刘玉乐陈刚王寰宇
- 关键词：聚丙烯酰胺凝胶电泳DNA检测
- 雄性不育基因对棉花的遗传转化被引量：8
- 2007年
- 利用TA29、A6、A9三启动子功能区与barnase基因融合构建的不育基因以农杆菌介导法对棉花下胚轴进行了遗传转化,通过胚状体途径获得了转基因再生植株。利用150 mg.L-1高浓度卡那霉素(Km)对转化初期筛选出的再生苗进行再次筛选,提高了转化株的选出率。通过PCR检测和Southern dot blot分析从转基因胚状体再生植株中获得了带有barnase不育基因的120株转基因植株。进行转基因植株生物学性状检测和观察表明,所获得的转基因植株对溴苯腈表现出了明显的抗性,并从不育基因转化植株中筛选出了具有明显不育特征的雄性不育株。
- 张慧军王寰宇石跃进张玉满岳建雄吴慎杰朱永红刘玉乐杨怀义
- 关键词：棉花雄性不育
- 棉花杂交育种的纯合显性雄性不育系、高效恢复系载体和两系法育种
- 本发明提供了一种将不育基因与化学诱导型启动子控制的恢复基因串联可获得纯合显性雄性不育系植物表达载体，提供了一种利用RNAi能高效介导转录后基因沉默的原理，在花药中特异时空表达不育基因dsRNA的棉花雄性不育高效恢复系植物...
- 杨怀义王寰宇张惠军石跃进朱永红裴蕾田波
- 文献传递
- 棉花杂交育种的纯合显性雄性不育系、高效恢复系载体和两系法育种
- 本发明提供了一种将不育基因与化学诱导型启动子控制的恢复基因串联可获得纯合显性雄性不育系植物表达载体，提供了一种利用RNAi能高效介导转录后基因沉默的原理，在花药中特异时空表达不育基因dsRNA的棉花雄性不育高效恢复系植物...
- 杨怀义王寰宇张惠军石跃进朱永红裴蕾田波
- 文献传递
