牛艳山
- 作品数:28 被引量:29H指数:3
- 供职机构:苏州大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 家蚕黄茧候选基因Cameo1和Cameo2在不同茧色品种的表达差异与功能分析被引量:1
- 2010年
- 外层黄茧C基因是家蚕对体内类胡萝卜素选择性吸收的关键基因之一。以13个黄红茧系品种(包括1个限性黄茧品种)、7个绿茧系品种、1个白色茧品种为材料,采用RT-PCR方法,检测和分析C基因的2个候选基因Cameo1和Cameo2在4龄和5龄幼虫不同组织的表达差异。结果表明,丝腺对黄茧色素类胡萝卜素的吸收不依赖于Cameo1基因的表达,Cameo1基因表达没有茧色和性别特异性,其蛋白产物可能没有直接参与黄茧色素吸收,而是作为B族清道夫受体家族(SCRB)成员在家蚕免疫系统中发挥作用;虽然Cameo2基因的蛋白产物介导了中肠中的黄色茧主要色素成分叶黄素的主动运输方式,但Came-o2基因不只是在家蚕黄色茧品种中肠的特异表达基因,Cameo2基因在家蚕中肠以外的组织表达特异性与这些组织的黄茧色素积累密切关联,生殖腺可能是比中肠和丝腺更加重要的Cameo2基因表达和作用的组织。
- 束梅影陈亚东牛艳山甘丽萍司马杨虎徐世清
- 关键词:家蚕基因功能
- 一种在幼虫期鉴别家蚕吐丝颜色的方法
- 本发明属于生物技术领域,公开了一种在幼虫期鉴定家蚕吐丝颜色的方法。本发明所述方法利用基因工程技术提取待测5龄期家蚕丝腺RNA,反转录合成cDNA,以获得的cDNA为模板,用特异引物进行RT-PCR扩增反应,琼脂糖电泳检测...
- 徐世清牛艳山司马杨虎陈息林殷为民袁红霞邢瑞
- 文献传递
- 家蚕BmColⅣα1基因的结构特征与表达谱分析
- 线虫emb-9基因和let-2基因分别编码Ⅳ型胶原蛋白质(ColⅣ)α1链和α2链,两者的Gly-X-Y重复区域氨基酸残基的突变能引起胚胎期温敏性致死。本文利用网络公共数据库资源,结合RACE技术和生物信息学方法,从家蚕...
- 季明明鲁延军甘丽萍牛艳山司马杨虎徐世清
- 关键词:家蚕表达谱遗传育种
- 文献传递
- 一种在蚕卵期鉴别家蚕吐丝颜色的方法
- 本发明属于生物技术领域,公开了一种在蚕卵期鉴定家蚕吐丝颜色的方法。本发明所述方法利用基因工程技术提取待测家蚕基因组DNA,用特异引物进行PCR扩增反应,琼脂糖电泳检测PCR扩增产物的种类和长度判断家蚕吐丝颜色。本发明所述...
- 徐世清邢瑞牛艳山司马杨虎陈息林殷为民袁红霞
- 昆虫细胞内N-糖基化途径及人源化糖蛋白表达被引量:1
- 2011年
- 虽然昆虫杆状病毒表达系统在蛋白表达领域得到了广泛的应用,但由于不能表达复杂的末端唾液酸化的N-糖链,使得该系统在生物制药行业的应用受到了很大的限制。通过比较哺乳动物细胞和昆虫细胞内糖基化途径可知,其起始步骤一致,之后再发生分化,主要表现为3方面,即昆虫细胞内缺乏哺乳动物细胞所具备的N-乙酰葡萄糖氨转移酶II、半乳糖基转移酶/N-乙酰氨基半乳糖转移酶、α-2,3-唾液酸转移酶和α-2,6-唾液酸转移酶等延长N-糖链的糖基转移酶;另外,昆虫细胞内具有能够特异性地将蛋白质末端的N-乙酰氨基葡萄糖残基从GlcNAcMan3GlcNAc(±α3/6-Fuc)GlcNAc上切除的N-乙酰氨基葡萄糖苷酶及核心α-1,3-岩藻糖基转移酶。本文从上述异同出发,综述了克服昆虫细胞内不能表达人源化糖蛋白这一缺陷所进行的N-糖基化途径的改造研究——主要集中在昆虫细胞内GlcNAcase的抑制和昆虫细胞内GnT2,GalT/GalNAcT,ST3及ST6等基因的导入等方面,结果表明经改造的昆虫细胞可表达人源化糖蛋白,这将极大地拓宽昆虫杆状病毒表达系统的应用领域。本文还探讨了选择特殊细胞系及特殊培养条件以在昆虫细胞内表达唾液酸化蛋白的可行性。
- 胡嘉彪张芃牛艳山Bhaskar ROY李兴华杨华军周芳缪云根
- 关键词:昆虫细胞哺乳动物细胞糖蛋白糖苷
- 应用于家蚕F2代分离群体的两种连锁作图方法的作图效果比较被引量:2
- 2008年
- 构建精细的家蚕分子连锁图谱需要合适的作图方法。应用Mapmaker/EXP3.0和F2lnkgsilk两种作图方法,对家蚕F2代91个个体为分离群体的300个AFLP标记和69个个体为分离群体的470个RAPD标记数据进行了比较分析。用F2lnkgsilk作图方法分析得到的分群数与Mapmaker/EXP3.0作图方法相比有所增加,而总的图距却显著增加,平均图距也有较大的增加,但产生的二联体数基本相同。就单个连锁群而言,两种作图分析方法的连锁标记及其数目80%以上相同,但是标记间的排列顺序70%以上有差异;用F2lnkgsilk作图方法分析得到的单个连锁群的总图距和平均图距也相应增大。
- 段雪梅徐海明徐世清牛艳山蔡明文司马杨虎
- 关键词:家蚕分子连锁图谱
- 一种在蚕卵期鉴别家蚕吐丝颜色的方法
- 本发明属于生物技术领域,公开了一种在蚕卵期鉴定家蚕吐丝颜色的方法。本发明所述方法利用基因工程技术提取待测家蚕基因组DNA,用特异引物进行PCR扩增反应,琼脂糖电泳检测PCR扩增产物的种类和长度判断家蚕吐丝颜色。本发明所述...
- 徐世清邢瑞牛艳山司马杨虎陈息林殷为民袁红霞
- 文献传递
- 家蚕3-磷酸甘油脱氢酶基因BmGpd的结构特征与表达谱分析被引量:2
- 2010年
- 3-磷酸甘油脱氢酶(GPDH)是真核细胞的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖性酶,具有能量传递等重要功能。家蚕Bombyxmori是重要的变态和能量代谢研究模式动物,为了明确GPDH在家蚕中的作用,本研究根据果蝇lethal(2)k05713的蛋白质序列,从家蚕C108品种克隆了2个完整的mRNA转录体,长度分别为3456bp和2979bp(GenBank登录号为GQ865685和GQ865686),具有相同的2166bpORF,编码721个氨基酸。克隆拼接了548bp的第9内含子后,参照大造品种的全基因组数据,推测出BmGpd基因全长27983bp(GenBank登录号为EF154335),包含16个外显子和15个内含子。编码蛋白具跨膜螺旋结构,pI为8.22,分子量为80.5kD,1~20氨基酸区域为信号肽序列。分子同源进化和蛋白质基序分析表明,BmGPD是家蚕中一种新GPDH成员,能在大肠杆菌Escherichiacoli中诱导大量表达。RT-PCR分析表明,BmGpd基因表达量在5龄中期最高,在3d的蛹中明显下调,进入滞育时表达量更低;血液中较低,中肠、丝腺、生殖腺和脂肪体中有大量表达。芯片表达谱显示,5龄第3天幼虫头和体壁中表达丰度最高,脂肪体和马氏管中最低,性别差异不显著。EST表达谱显示,4龄第2天中肠中表达丰度最高。RNAi结果显示,家蚕体内存在BmGpd基因产物代谢补偿途径。本研究为深入研究家蚕GPDH的表达调控以及与变态和能量代谢的关系创造了条件。
- 鲁延军季明明牛艳山张升祥司马杨虎徐世清
- 关键词:家蚕3-磷酸甘油脱氢酶结构特征表达谱
- 烘茧对家蚕天然有色茧色素的影响
- 烘茧质量的好坏不仅直接影响到茧丝质量、解舒率等指标,对于天然有色茧,烘茧处理是否引起茧层中色素含量及其性质的变化,这是值得深入讨论的。本文分析了绿茧、黄茧、红茧的鲜、干茧茧层中色素含量,用SPSS13.0forWindo...
- 梁海丽牛艳山司马杨虎徐世清
- 关键词:家蚕烘茧色素光谱
- 文献传递
- 家蚕不同茧色品种中cbp基因的结构和表达分析被引量:6
- 2010年
- 类胡萝卜素结合蛋白(CBP)是唯一已被确认与家蚕黄色茧形成密切相关的主要蛋白质。文章选择12个有色茧和白茧蚕品种,调查了cbp基因结构、转录产物mRNA类型和丝腺类胡萝卜素紫外可见光吸收特征与其茧色的关系。结果表明:黄色茧蚕品种含有2种或3种cbp基因结构,同时转录具有CBP功能性的完整mRNA和缺少第2外显子的mRNA;绿茧品种间cbp基因结构存在差异,转录缺少第2外显子的mRNA;白茧蚕品种cbp基因只有1种结构,转录缺少第2外显子的mRNA。文章在黄茧品种中新发现的cbp基因第1内含子序列可能具有茧色品种特异性,家蚕黄茧品种丝腺的紫外可见吸收光谱特征显著区别于绿茧和白茧品种,cbp基因的结构和表达特征与家蚕茧色密切相关。
- 牛艳山陈亚东席建司马杨虎段雪梅梁海丽甘丽萍徐世清
- 关键词:家蚕天然彩色茧