潘群兴
- 作品数：91 被引量：217H指数：7
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 嵌合O型口蹄疫病毒多表位基因猪细小病毒VLPs载体疫苗的构建被引量：8
- 2013年
- 综合运用生物信息学和分子生物学技术,模拟PPV VP2蛋白表面不同Loop区插入O型FMDV VP1蛋白上多表位基因(VP1:21～40、141～160和200～213残基)空间构象,并在VP2 N端引入通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE),人工合成嵌合基因并克隆到杆状病毒转移载体pFastBac HTA中,转化E.coli DH10Bac感受态细胞,经三抗筛选,获得重组杆状病毒表达质粒rBac-FMDV VP1∶PPV VP2,用脂质体法转染Sf9细胞。对rBac-FMDVVP1∶PPV VP2感染的Sf9细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;用Western-blotting分析,在64 000处出现一条特异蛋白条带;电镜观察,重组VP2蛋白能够自主组装成病毒样颗粒。红细胞凝集试验证实,表达的嵌合蛋白PPV∶VP2-FMDV∶VP1具有与全病毒类似的血凝活性。
- 潘群兴诸玉梅王永山何孔旺王晓丽欧阳伟毕振威夏兴霞
- 关键词：猪细小病毒O型口蹄疫病毒病毒样颗粒
- 犬流感病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株F112及应用
- 本发明涉及一种犬流感病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株F112，属于生物技术领域。本发明是运用淋巴细胞杂交瘤技术，用犬流感病毒流行毒株A/Canine/Nanjing/11/2012(H3N2)制备免疫抗原，从中筛选出一株强效杂...
- 夏兴霞王永山王晓丽安欣欧阳伟诸玉梅潘群兴王晶宇楼晶瑶姚凌云吴世妍毕振威芮荣刘永杰
- 传染性法氏囊病病毒自然重配株全基因组序列分析
- 从具有新的流行病学特征的传染性法氏囊病(IBD)发病鸡群中分离到两株传染性法氏囊病病毒(IBDV),分别命名为QL和ZZ-11,对4周龄SPF鸡的致死率分别为94％和86％。为分析该毒株的分子生物学特征,对其全基因组序列...
- 朱向东王永山欧阳伟潘群兴毕振威李月华范红结王笑梅
- 关键词：传染性法氏囊病病毒基因组结构
- 文献传递
- 华东地区传染性法氏囊病病毒流行株的分离及其生物学特性分析被引量：15
- 2016年
- 为了解华东地区近年来传染性法氏囊病病毒(IBDV)的遗传变异现状,从该地区近三年来IBD疫苗免疫失败鸡群中分离到7株IBDV,遂被命名为J3、A4、S8、S9、A11、S14和J17。这7株IBDV均能直接适应于鸡胚培养,但对CEF、DF-1以及DF-EGFP-mi R-9三种细胞的适应性和细胞培养中的病毒效价有显著差异,较易适应于DF-EGFP-mi R-9细胞,A11毒株在DF-EGFP-miR-9细胞中的TCID_(50)高达1×10^(11)/0.1m L。用第3代鸡胚毒分别感染6周龄SPF雏鸡,均表现出临床症状和死亡情况,发病率为100%,死亡率在50%~70%之间,而用第20代细胞毒感染的SPF雏鸡,均未出现临床症状和死亡情况。将这7株IBDV分离毒VP2基因全长序列进行同源性分析,核苷酸和编码氨基酸序列的同源性分别为97.4%~99.6%和98.7%~99.8%。遗传进化分析显示,这7株IBDV分离毒均属于血清Ⅰ型,分布在三个相对独立的超强毒力IBDV(vvIBDV)分枝中。VP2特征性氨基酸位点分析,在第222、242、253、256、279、284、299、330、451位的氨基酸残基分别是A(S14毒株为L)、I、Q、I、D、A、S、S和L,位于第326~332位的七肽基序为SWSASGS,均具有IBDV强毒株的特征性氨基酸序列。在VP2基因高变区的第一个亲水区,J17毒株有212N,S14毒株有222L,不同于其他强毒株或弱毒株。上述研究结果表明,近年来在华东地区IBD免疫失败的鸡群中流行着超强毒力vv IBDV,毒株的生物学特性有明显差异,毒株的来源比较复杂,这对于IBD的防控面临着新挑战。
- 梅永杰王永山欧阳伟潘群兴孟凯王晓丽夏兴霞诸玉梅董晨红毕振威王晶宇吴红玲姚火春
- 关键词：病毒分离VP2基因
- 一种表达IBDV VP2和法氏囊素三肽嵌合蛋白重组火鸡疱疹病毒
- 本发明涉及一种表达IBDV VP2和法氏囊素三肽嵌合蛋白重组火鸡疱疹病毒，属于基因工程和生物制品研究领域。将10拷贝法氏囊素三肽（BS10）嵌合IBDV VP2基因表达盒与火鸡疱疹病毒（HVT）结合在一起，获得了一种全新...
- 潘群兴王永山欧阳伟王晓丽毕振威夏兴霞诸玉梅董晨红何孔旺肖琦
- 文献传递
- 犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌多重PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3
- 2019年
- 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究根据3种真菌基因内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)区域的序列差异设计4条引物,通过优化多重PCR反应条件,建立了一种可同时快速检测这3种真菌的多重PCR,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286、596、188 bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6、8.8、13.6pg/μL;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示阳性检出率分别为74.07%(20/27)和83.72%(36/43);采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56);两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本研究建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。
- 钱晶欧阳伟王晶宇姚凌云吴世妍王晓丽潘群兴夏兴霞诸玉梅刘军刘国芳王永山
- 关键词：真菌病犬小孢子菌石膏样小孢子菌多重PCR
- 传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的制备及其抗病毒活性分析
- <正>引言传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease,IBD）是由传染性法氏囊病病毒（Infectious Bursa1 Disease Virus,IBDV）引起的以侵害雏鸡淋巴组织,特别是中枢...
- 夏兴霞欧阳伟诸玉梅王晓丽潘群兴吴晓悠王晶宇王永山
- 文献传递
- 一株H3N2亚型犬流感病毒的分离及其分子变异性分析
- 为了解近期犬流感病毒的病原学特性及分子变异情况,2012年从南京地区宠物医院采集的20份犬鼻拭子中分离到1株犬流感病毒,命名为A/Canine/Nanjing/11/2012(H3N2).该病毒分离株的血凝(HA)效价为...
- 王晓丽毕振威王永山潘群兴欧阳伟夏兴霞诸玉梅董晨红
- 关键词：H3N2亚型系统发育进化树
- 传染性法氏囊病病毒株VP2基因在重组腺病毒中的表达被引量：2
- 2010年
- 用RT-PCR方法从传染性法氏囊病(IBD)免疫预防失败的病鸡法氏囊组织AH1与AH2中扩增传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因。序列分析结果显示,AH1与AH2病毒VP2基因长度均为1350nt,编码450aa,核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为98.2%、99.3%,七肽基序均为SWSASGS,在222、253、256、279、284、294和299位上的氨基酸残基分别是A、Q、I、D、A、I和S,具有IBDV强毒的分子特征。进一步将VP2基因克隆入人5型腺病毒穿梭载体(pShuttle-CMV),与腺病毒骨架载体(pAdEasyTM)共转化大肠杆菌BJ5183进行同源重组并转染HEK-293A细胞,经多次亚克隆获得了重组腺病毒rAd-(IBDV)VP2。利用Western-blot、IFA等方法检测IBDVVP2蛋白的体外表达情况,结果证明VP2基因在腺病毒中获得了表达。
- 潘群兴王永山何孔旺欧阳伟王晓丽王忠灿唐雨德
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP2重组腺病毒
- 猪细小病毒样颗粒B细胞表位插入位点的分子设计
- 本发明涉及猪细小病毒样颗粒B细胞表位插入位点的分子设计，属于基因工程疫苗领域。使用生物信息学软件对猪细小病毒(PPV)衣壳蛋白VP2结构建模，经三维结构分析确定VP24个突出的Loop结构所在区；首先在分子模拟和文献支持...
- 潘群兴何孔旺温立斌郭容利王晓丽王永山欧阳伟李彬肖琦
