潘敏慧 作品数:153 被引量:286 H指数:8 供职机构: 西南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
一种家蚕类浓核病毒的组织病理学特征(英文) 2009年 本文从家蚕病蚕中分离到一种家蚕类浓核病毒(BmDNV-Like),对它的组织病理学研究表明:该病毒首先寄生家蚕中肠柱状细胞,继而引起其细胞核的膨大和破裂;组织原位杂交结果表明该病毒既能在家蚕中肠柱状细胞中增殖,也能在中肠的杯形细胞中增殖,甚至在感染后期能在家蚕幼虫的大部分组织细胞中感染和增殖。 潘敏慧 肖仕全 李娜 鲁成 向仲怀关键词:浓核病毒 家蚕 组织病理学特征 柞蚕核多角体病毒lef-12基因序列及转录分析(英文) 2008年 为加强柞蚕核多角体病毒(Anthraea pernyinucleopolyhedrovirus,ApNPV)的分子基础研究,对ApNPVlef-12基因进行序列及转录分析。ApNPVlef-12基因长516个核苷酸,编码171个氨基酸,预测分子质量19.0 kD。Ap-NPVlef-12基因5′端非编码区含有杆状病毒晚期基因启动子模序(ATAAG),但终止密码子(TAG)下游没有典型的多聚腺苷酸信号(AATAAA)。PSI-BLAST表明18种鳞翅目NPV编码ApNPV LEF-12同源蛋白;ApNPV LEF-12蛋白与类群ⅠNPVLEF-12的氨基酸一致性高于其与类群ⅡNPVLEF-12的氨基酸一致性。ApNPVLEF-12蛋白及与其关系较近的同源蛋白的有效密码子数较低。转录分析表明,ApNPVlef-12基因属晚期表达基因。 石生林 潘敏慧 王强 鲁成关键词:柞蚕 核多角体病毒 转录分析 家蚕原代细胞有丝分裂观察 被引量:3 2004年 在28℃,pH值6.4-6.8的条件下,用Grace培养基辅以20%的标准胎牛血清培养半消化法接种的家蚕晚期胚。原代培养细胞能够长期存活,观察到了家蚕原代培养过程中分化细胞的有丝分裂过程,发现了原代细胞分裂过程中赤道板的异常和染色体分离的异常现象;培养6个月和10个月的原代细胞分裂百分比分别为0.02±0.01和0.35±0.10,原代细胞异常的有丝分裂细胞百分比逐渐减少,分别为8.0±1.6和3.2±1.0。 丁裕斌 潘敏慧 肖仕全 陈敏 洪锡钧 鲁成关键词:家蚕 原代细胞 有丝分裂 体外培养 家蚕热休克蛋白HSP90相互作用蛋白的筛选与鉴定 2022年 【目的】HSP90 是热休克蛋白家族的成员之一,在昆虫的抗逆性和变态发育中发挥重要作用,已有研究表明 HSP90能够促进家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)的增殖,但作用机制尚不清楚。本研究通过鉴定 BmHSP90 的相互作用蛋白,为其促进 BmNPV 增殖的作用机制解析提供参考。【方法】构建连接在 pIZ/V5-His 的BmHSP90;真核过表达载体,在家蚕 BmN-SWU1 细胞中转染 48 h 后,感染 BmNPV 继续培养 48 h 后收集蛋白,保留总蛋白后将这些蛋白均分两管,进行免疫共沉淀,分别用抗 HA 抗体和 IgG 抗体钓取相互作用蛋白,对蛋白胶进行硝酸银染色后,获取差异条带并做质谱分析,将质谱结果与信息分析结合进行候选互作蛋白筛选,并克隆鉴定互作蛋白。通过免疫荧光验证 HSP90 与互作蛋白的共定位情况,并进一步采用免疫共沉淀试验确定其是否存在相互作用关系。【结果】硝酸银染色结果显示,试验组与对照组在 90、70 和 60 kD 附近处存在差异条带,并验证了 90 kD 处的差异条带为诱饵蛋白;将另外两条差异带进行质谱分析,共鉴定到 7 个候选相互作用蛋白,通过分析选择其中两个候选蛋白作后续研究,分别为Tubulin-specific chaperone E(Tbce)和 Golgin subfamily A member 5(Golga5)。BmTbce 的最大开放阅读框长度为 1 728bp,编码 576 个氨基酸,BmGolga5 的最大开放阅读框长度为 1 854 bp,编码 618 个氨基酸;同源比对和系统进化树显示 BmTbce的微管结合结构域(cytoskeleton-associated protein-glycine-rich,CAP-Gly)位于 N 端且在不同物种之间保守性较高,BmGolga5 的跨膜区(transmembrane domain,TMD)位于 C 端,也较为保守;荧光共定位显示 BmHSP90 与 BmTbce 和 BmGolga5在细胞质中发生共定位,并进一步通过免疫共沉淀证明 BmHSP90;和 BmTbce;、BmHSP90;和 BmGolga5;具有相互作用关系。【结论】经过筛选与鉴定,在 BmNPV 感染家蚕细胞的过程中,与家� 龙艳碧 吴云飞 张倩 陈鹏 潘敏慧关键词:家蚕 家蚕核型多角体病毒 HSP90 家蚕基因组框架图 夏庆友 周泽扬 鲁成 向仲怀 代方银 程道军 李斌 赵萍 潘国庆 潘敏慧 沈以红 李春峰 蓝希钳 袁联伟 该项目为中国家蚕功能基因组研究。完成第一个家蚕基因框架图,也是第一个鳞翅目昆虫基因组框架图;构建了国内外最大的家蚕EST数据库;发现了1874个丝腺特异基因,发现了与生成生物钢的蜘蛛有107个共有基因;发现了87个神经肽...关键词:关键词:家蚕 基因组 框架图 蛋白荧光定位检测系统及其快速检测蛋白相互作用的方法和应用 本发明公开了一种蛋白荧光定位检测系统及其快速检测蛋白相互作用的方法和应用,所述蛋白荧光定位检测系统由四种融合蛋白组成:(1)荧光蛋白A和待测蛋白A组成的融合蛋白;(2)荧光蛋白A、核定位信号和待测蛋白A组成的融合蛋白;(... 潘敏慧 鲁成 董战旗 陈婷婷 胡楠 董非凡细胞凋亡抑制蛋白IAPs的研究进展与系统进化分析 凋亡抑制蛋白(inhibitors of apotosis protein,IAP)是细胞凋亡过程中的重要调控因子,具有抑制细胞凋亡的作用。本文综述国内外学者在IAPs 蛋白结构和功能及家族新成员鉴定等方面的研究成果,重... 宋娟 易华山 户艳芬 何倩 刘太行 潘彩霞 鲁成 潘敏慧家蚕微粒子病血清学检验技术的研究 Ⅲ—N.b碳素凝集反应用于原种母蛾检微 被引量:1 1996年 对700个母蛾用N.b碳素凝集反应法进行检微,碳检检出率为95.45%,对检的镜检检出率为22.72%.碳、镜检检出率的比值是4.2倍(即碳检有微数>镜检有微数);碳检发生的阳性反应样品,再用显微镜复检有微吻合率达100%,准确性大,误判率为零.检出微孢灵敏度高,最高N.b浓度是7.5×10~6个/ml,最低N.b浓度是2.5×10~3个/ml,可视为碳检700个母蛾批的检微浓度范围,以上数据证实用N.b致敏碳素检查母蛾微孢是可行的. 陈祖佩 冯丽春 潘敏慧 万永继 祝仁英 邹康 张明阶 尹泽佑 许毅 刘晓平家蚕核型多角体病毒39k诱导型启动子及其应用 本发明公开了家蚕核型多角体病毒(BmNPV)39k诱导型启动子及其应用,该启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,其具有明显的BmNPV诱导启动活性,能使细胞在受到BmNPV感染时启动外源基因的表达;利用该启动子... 潘敏慧 鲁成 李娜 赵爱春 夏庆友 向仲怀家蚕Caspase家族基因BmCaspase-X的克隆与功能分析 被引量:4 2015年 【目的】本研究旨在克隆获得家蚕Bombyx mori Caspase家族基因,并通过RNAi技术初步分析其在家蚕细胞水平细胞凋亡中的功能。【方法】用c DNA末端快速扩增方法(rapid amplification of c DNA ends,RACE)克隆家蚕Caspase家族一个新基因,用RNAi和流式细胞术初步分析该基因在家蚕细胞凋亡中的功能。【结果】将克隆获得的家蚕Caspase家族基因命名为Bm Caspase-X,其全长为2 105 bp,开放阅读框长为1 494 bp,编码497 aa,分子量为57.8 k Da,等电点为5.29。Bm Caspase-X含有Caspase特有的结构位点。系统进化分析表明,Bm Caspase-X与家蚕ICE同其他昆虫Caspase-4同源物先聚在一起,再与具有长前体结构域的昆虫其他因子聚为一类。RNAi初步结果显示该基因干扰后没有出现明显的细胞凋亡。【结论】Bm Caspase-X具有典型Caspase特征,属于Caspase家族成员。目前RNAi实验结果表明Bm Caspase-X未能引起家蚕细胞凋亡的改变。本文为进一步研究该基因的功能奠定基础。 张金叶 赵元莙 潘敏慧 刘迪 鲁成关键词:家蚕 RNAI