温新宇 作品数:86 被引量:309 H指数:10 供职机构: 中国人民解放军总医院 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 哲学宗教 理学 更多>>
人CD38分子的克隆表达、单克隆抗体的制备及其功能的初步研究 淋巴瘤、骨髓瘤是严重威胁人类生命的恶性肿瘤,对于这类疾病的治疗,传统的化疗、放疗、免疫调节等治疗方法,难以取得令人满意的疗效。近年来,针对细胞表面分子的抗原靶向性治疗已取得了巨大进展,并成为一种非常有发展前途的治疗方法。... 温新宇关键词:CD38 基因克隆 基因表达 单克隆抗体 文献传递 肿瘤标志物联合检测在宫颈癌诊断中的应用价值 被引量:44 2011年 为探讨血清肿瘤标志物SCC、CA125、CA15-3和CA19-9联合检测在宫颈癌诊断中的意义,检测了31例宫颈癌患者、22例宫颈良性病变患者术前及53名正常对照者上述血清肿瘤标志物的水平。结果显示,宫颈癌组血清SCC、CA125和CA15-3水平显著高于宫颈良性病变组(P<0.05)和正常对照组(P<0.05)。四种血清肿瘤标志物中,单项检测宫颈癌的灵敏度以SCC最高(41.9%)。血清CA125与SCC联检可将宫颈癌检测的灵敏度提高到58.1%,特异性为72.0%,对宫颈癌的辅助诊断具有重要的意义。 童红莉 李娟 温新宇 田亚平 向荣关键词:宫颈癌 肿瘤标志物 临床血清循环miRNAs定量技术的建立 2010年 目的建立可靠的临床血清(浆)循环miRNAs定量技术。方法常规收集血清(浆)标本,mirVana PARIS试剂盒法抽提血清(浆)总RNA,采用DNaseI消化总RNA提取液,以miRNAs特异性茎-环引物引导反转录,通过TaqMan实时荧光定量PCR对U6及靶miRNAs进行检测。结果10份新鲜血浆总RNA浓度介于3.5~35.4ng/μl之间。对常规收集的400μl临床血清标本中U6、miR-16、miR-224均能实现特异扩增及定量,相应的平均Ct值约为30、25及32。6份不同留置时间血清标本总RNA浓度分别10.24和4.46ng/μl,定量PCR结果显示其中相应miR-16和miR-224的丰度却相对稳定。结论血清(浆)总RNA抽提及循环miRNAs定量切实可行。 桂俊豪 田亚平 温新宇 邓心新 董振南 贾兴旺 高静 闰玮 田丽媛关键词:血清 实时荧光定量PCR 四生汤对阴虚证小鼠自由活动能力和血清丙二醛含量的影响 被引量:9 2008年 目的:探讨四生汤对甲状腺激素致阴虚证小鼠的治疗作用及机制。方法:选取健康昆明小鼠60只,随机分成6组。正常组和阴虚模型组予蒸馏水灌胃,低、中、高剂量四生汤组为治疗组,生脉饮为阳性对照药物,观察各组小鼠的一般生活状况并检测其自由活动能力和血清丙二醛的含量。结果:四生汤能明显改善阴虚模型小鼠的口干、烦躁和体温升高(P<0.05),提高小鼠的自由活动能力(P<0.05),降低血清丙二醛的含量(P<0.05);但与生脉饮比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高、中剂量四生汤具有良好的养阴清热、生津止渴作用,可提高机体的活动能力和抗氧化损伤。 张素芳 陈喆 李柏 陈红云 凌昌全 温新宇关键词:四生汤 阴虚 身体活动 小鼠 健康人补体受体1基因单核苷酸多态性位点与其红细胞表面分子水平的相关性 2015年 目的探讨健康人补体受体1(complement receptor type 1,CR1)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点与红细胞表面CR1分子水平的相关性。方法采用多重PCR-荧光标记单碱基延伸-标签微阵列杂交基因分型技术,检测215例受试者CR1基因5个标签SNP,并采用流式细胞术测定其中81例样本红细胞CR1分子水平。采用Arlequin3.11软件对各SNP位点基因型频率进行哈温平衡(Hardy-Weinberg equilibrium,HWE)检验,采用SPSS 13.0软件对健康人CR1基因SNP位点基因型及等位基因分布的性别差异、不同基因型人群红细胞CR1分子水平差异和影响红细胞CR1分子水平的单因素和多因素进行统计学分析。结果健康人CR1基因SNP位点基因型及等位基因分布性别间的差异无统计学意义(P>0.05);健康人红细胞CR1几何平均荧光强度比值(the geometric mean fluorescence intensity ratio of CR1,CR1-GMFIR)为3.36±1.26。rs11118167T>C和rs9429945C>T位点各基因型组对应的红细胞CR1分子水平总体比较,差异具有统计学意义(分别为P<0.01和P<0.05),两两比较时,rs11118167T>C位点TC、CC基因型携带者低于TT基因型者,rs9429945C>T位点CT、TT基因型携带者低于CC基因型者(P值均<0.01)。在年龄、性别、5个标签SNP位点各基因型中,CR1-GMFIR与rs4844600G>A(GG/GA/AA)、rs9429945C>T(CC/CT/TT)、rs11118167T>C(TT/TC/CC)均呈负相关(分别为P<0.05,P<0.01,P<0.01),影响CR1-GMFIR的最主要因素为rs11118167T>C(P<0.01),其次为rs9429945C>T(P<0.01)。结论 rs11118167T>C和rs9429945C>T是红细胞CR1分子水平的主要影响因素。 胡金川 田亚平 刘丽丹 温新宇 王玲 高艳红 田卫东 张立敏 陈松楠关键词:单核苷酸多态性 分子水平 红细胞免疫 七种恶性肿瘤患者血清CK和CK-MB含量分析 被引量:9 2013年 目的比较肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)在正常人群和恶性肿瘤患者的含量及其异常率。方法检测前列腺癌组患者108例,胃癌组患者139例,乳腺癌组患者101例,胰腺癌组患者160例,结肠癌组患者101例,肺腺癌组患者71例,宫颈癌组患者72例,和健康对照组200名人群血清CK和CK-MB含量。结果前列腺癌组CK含量与正常对照组相比较,有显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);而六种恶性肿瘤组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。七组恶性肿瘤患者CK-MB含量与正常对照组相比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。七组恶性肿瘤患者CK-MB异常率与正常对照组相比,均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),胃癌组的异常率最高,乳腺癌组次之。结论前列腺患者CK含量会异常升高,胃癌与乳腺癌患者CK-MB异常率较高。 丁慧 董振南 温新宇 田亚平关键词:肌酸激酶 肌酸激酶同工酶-MB 前列腺癌 全自动生化分析仪 元素标记免疫分析联合电感耦合等离子体质谱技术在HCG检测中的应用 被引量:3 2020年 目的:使用元素标记免疫分析联合电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)技术的免疫检测分析方法建立用于的人绒毛膜促性腺激素(HCG)的定量检测方法。方法:方法性能评价。以稀土元素Sm为标记物,建立双抗体夹心法的HCG定量检测体系,对其生物素化抗体用量、反应时间进行优化;参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP系列文件和相关标准,通过检测限、线性范围、批内和批间精密度、准确度、交叉反应、干扰试验等指标评价所建立的检测体系的分析性能。之后,收集88例临床用电化学发光法(ECLIA)检测过HCG的血清标本,使用所建方法进行检测,检测结果与ECLIA方法检测结果进行相关性分析。结果:优化后整个检测可在30 min内完成,最佳的生物素化抗体用量为0.5μl;所建立体系的空白检出限(LOB)为0.29 mIU/ml,在1.16~8365.62 mIU/ml范围内线性良好,线性相关系数大于0.995(R^2=0.9980),回收率为97.53%~102.01%,高浓度样本与低浓度样本的批内和批间变异系数均小于10%,与促甲状腺激素(TSH)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)无明显的交叉反应,不同浓度干扰物质引起的干扰偏倚均小于10%;所建立检测体系的检测结果与ECLIA的检测结果进行比对,相关性良好(R2=0.9600)。结论:元素标记免疫分析联合ICP-MS技术的免疫分析方法检测HCG具有精密度高、特异性强、准确度好等优点,其方法确认和性能验证结果满足临床要求,为该方法的临床应用提供了实验依据。 蒲丹娜 姜文灿 温新宇 郭广宏 李萍 王成彬关键词:绒毛膜促性腺激素 免疫测定 原子 质谱分析法 从随机9肽库中筛选HCV抗原表位 被引量:1 2002年 目的 :用患者血清中抗HCV抗体从随机 9肽库中筛选HCV抗原表位。方法 :将病人血清用硫酸铵粗提后 ,用ProteinA亲和层析柱纯化和制备抗HCV多克隆抗体 ;以此为筛选配基 ,对噬菌体表面展示的随机 9肽库进行亲和筛选。结果 :三轮筛选的投入产出比逐轮升高至 5 0× 10 - 3 、假阳性率逐轮降低至 0 2 % ,提示具有良好的富集效果。从第三轮挑选出的 15个克隆进行结合试验 ,发现 7个克隆只与HCV抗体有较强的结合力而不与正常人血清反应 ;测序表明 6个克隆的外源肽含有核心序列SPVAXVLXT。用阳性噬菌体克隆检测 2 0例病人血清 ,有程度不等的阳性反应。结论 :用多克隆抗体从噬菌体随机肽库中筛选得到了有一定功能的模拟表位。 柯屾 戚中田 温新宇 施明 赵平 沈倍奋关键词:噬菌体随机肽库 抗原表位 丙型肝炎病毒 HCV 肽质量指纹图谱鉴别诊断IgA肾病和非IgA肾病的可行性分析 被引量:2 2011年 目的探索肽质量指纹图谱(PMF)在IgA肾病和非IgA肾病的分类中是否可行。方法采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)分析IgA肾病和非IgA肾病患者的血清肽质量指纹图谱。结果 IgA肾病和非IgA肾病的血清肽质量指纹图谱具有9个差异多肽;其中,最显著的两个多肽峰是4476.46和1968.10,ROC曲线下面积分别为86.18%和79.77%;主因素分析(PCA)表明前8个因素(差异峰)的累积解释变异量超过95%,说明该模型的鉴别诊断能力较MA好L。DI比-T对OF蛋质白谱质技数术据在库Ig,A多肾肽病53和3非8.0I8gA为肾粘病蛋的白分4类同中工,型具的有片可段行;性而,此多技肽术20在82系.7统7为疾α病1-的Ⅱ亚型类胶分原类同中工具型有的广片阔段的。前景结。 高静 王涌 温新宇 鲁鸿昊 董振南 田亚平关键词:IGA肾病 肽质量指纹图谱 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 用抗HCV多抗从随机15肽库中筛选抗原表位 被引量:5 2003年 目的:分析丙肝患者血清中抗HCV抗体的抗原表位。方法: 制备Protein A亲和层析柱,从丙肝患者血清中纯化、制备抗HCV多克隆抗体;并以此为筛选配基,对噬菌体表面展示的随机15肽库进行亲和筛选。结果:三轮筛选的投入产出比逐轮升高至3.3×10-3,假阳性率逐轮降低至0.2%,提示具有良好的富集效果。对从第3轮挑选出的16个克隆进行结合试验,发现9个克隆只与HCV抗体有较强的结合力而不与正常人血清起反应。测序表明,8个克隆的外源肽含有核心序列WPWS。用阳性噬菌体克隆检测20例丙肝患者血清,有程度不等的阳性反应。结论:用多克隆抗体从噬菌体随机肽库中,筛选到有一定功能的模拟表位。 柯屾 朱继萍 温新宇 施明 贺永怀 沈倍奋 赵平 姚志建关键词:噬菌体随机肽库 抗原表位 丙型肝炎病毒