涂玲
- 作品数：41 被引量：107H指数：6
- 供职机构：郑州大学第五附属医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 输血相关急性肺损伤对SD大鼠巨噬细胞活化和共刺激分子CD40表达的影响被引量：4
- 2015年
- 目的观察输血相关急性肺损伤（transfusion—related acute lung injury，TRALI）SD大鼠肺泡巨噬细胞活化及共刺激分子CD40表达，探讨其在TRALI发病机制中的作用。方法SD大鼠60只，随机（随机数字法）分为正常对照组、脂多糖对照组、TRALI组和阳性对照组各15只。正常对照组采用假手术处理；脂多糖对照组大鼠经腹腔注射脂多糖（2ms／kg，≤1min完毕），2h后静脉输注生理盐水（约1mL／只）；TRALI组腹腔注射脂多糖（2mg／kg）2h后静脉输注血浆（约1mL／只）；阳性对照组静脉输注脂多糖（5ms／kg）诱导急性肺损伤。光镜观察肺组织病理变化；应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定活化巨噬细胞（activatedmacrophage，AMφ）中TLR4表达；电泳迁移率变动分析（EMSA）检测AMφ核提取物中NF—KB的活性；Northernblot检测CIM0mRNA表达，流式细胞术检测CD40蛋白表达；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF一α、MIP-2及IL-1β的含量。结果TRALI组和阳性对照组大鼠肺泡隔断裂、肺间质充血及肺泡腔中性粒细胞浸润；活化AM表面TLR4的表达升高、NF．KB活性增强、共刺激分子CD40mRNA和蛋白显著表达，与正常对照组和脂多糖对照组比较差异具有统计学意义（均P〈0．01）。TRALI组BALF中TNF-α、MIP-2、IL-1β的表达水平均显著高于正常对照组和脂多糖对照组（P均〈0．05）。结论AMφ能上调其表面共刺激分子的表达，促进炎细胞因子的释放，增强获得性免疫反应介导的急性肺损伤，提示AM活化可能在TRALI的发生过程中发挥一定作用。
- 魏明涂玲刘佳梁颖红龚艳杰张宜花杨璐
- 关键词：急性肺损伤巨噬细胞TOLL样受体-4
- 乳腺癌CD4^+ CD25^(high) Foxp^(3+)调节性T细胞数量和分布及Foxp3mRNA表达与肿瘤分期的相关性研究被引量：5
- 2012年
- 目的研究乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)的存在数量、分布情况,及其功能基因Foxp3mRNA的表达变化与国际抗癌联盟(UICC)乳腺癌的TNM分期的关系。方法用四色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD25-PE/CD4-PerCP/CD3-PC7抗体组合分析40名健康对照者及40例乳腺癌患者(临床TNM分期T1期9例、T2期10例、T3期12例、T4期9例)外周血、肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)及癌旁淋巴结中CD4+CD25high Foxp3+Treg的数量及分布情况。实时荧光定量PCR技术检测TregFoxp3mRNA表达水平。结果乳腺癌患者外周血CD4+CD25high Foxp3+Treg占CD4T细胞的百分比为(8.91±3.06)%,高于正常健康对照组(5.84±2.63)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者TIL、癌旁淋巴结中Treg占CD4+T淋巴细胞比例均高于外周血,差异有统计学意义(P均<0.01)。乳腺癌组织TIL和癌旁淋巴结中Treg的Foxp3平均荧光强度(MFI)显著高于外周血(P<0.05)。T1、T2、T3、T4期乳腺癌患者Treg比例分别为(5.81±1.89)%、(6.52±2.15)%、(9.65±3.14)%、(11.86±2.43)%。乳腺癌患者外周血单个核细胞Foxp3mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.01)。相关分析显示,Treg数量与肿瘤TNM分期显著相关(r=0.7 576,P<0.01);Foxp3基因mRNA表达水平与乳腺癌TNM各分期呈显著相关性(r=0.6 129,P<0.05)。结论乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+Treg的数量升高,其增高程度与肿瘤临床分期呈显著正相关。乳腺癌患者外周血和癌组织局部Treg的数量、分布情况及特异性转录因子Foxp3mRNA的表达强度均有所不同,提示这可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25high Foxp3+Treg将来可作为乳腺癌患者病情进展的重要判断指标之一。
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：肿瘤分期特异性转录因子
- 臭氧暴露对哮喘大鼠CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞数量和Foxp3mRNA表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的 探讨低浓度臭氧暴露对支气哮喘大鼠CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞数量及转录因子Foxp3mRNA表达的影响.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、臭氧暴露组、哮喘组和臭氧暴露哮喘组,每组15只.哮喘组采用卵清白蛋白（OVA）致敏并吸入激发制备哮喘模型,正常对照组雾化生理盐水,臭氧暴露组予吸入低浓度臭氧,臭氧暴露哮喘组于每日雾化激发OVA前给予低浓度臭氧吸入.流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞占CD4＋T细胞的比例,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血和肺组织γ-干扰素（γ-INF）以及白细胞介素-4（IL-4）含量;聚合酶链反应（PCR）检测肺组织Foxp3mRNA表达水平.结果 哮喘组大鼠CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞占CD4T细胞的比例为6.12％±1.03％,臭氧暴露组为5.87％±1.26％,均低于正常对照组（9.85％±1.34％）;臭氧暴露哮喘组CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞占CD4T细胞的比例为（3.31％±0.85％）,低于正常对照组和哮喘组,差异均有统计学意义（P＜0.01）.哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[血浆：（21.83±5.12） ng/L,肺组织：（0.89±0.13） ng/L]高于正常对照组[血浆：（10.58±2.73） ng/L）,肺组织：（0.32±0.11） ng/L],差异有统计学意义（P＜0.01）;臭氧暴露哮喘组血浆和肺组织中IL-4含量[血浆：（35.47±7.24） ng/L,肺组织：（1.58±0.43） ng/L]高于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义（P＜0.01）.哮喘组血浆和肺组织中γ-INF含量[血浆：（61.78±23.45） ng/L,肺组织：（0.69±0.21） ng/L]低于正常对照组[血浆：（158.89±60.23） ng/L,肺组织：（1.86±0.29） ng/L],差异有统计学意义（P＜0.01）,臭氧暴露哮喘组γ-INF含量[血浆：（10.28±2.63） ng/L,肺组织：（0.46±0.12） ng/L低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义（P＜0.01）.臭氧暴露哮喘组和哮喘组Foxp3mRNA表达低于
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：臭氧哮喘T淋巴细胞转录因子
- 卡介苗多糖核酸对哮喘大鼠CD4＋IL-17＋T细胞与CD4＋Foxp3＋调节性T细胞的影响被引量：3
- 2015年
- 目的 观察卡介苗多糖核酸（BCG-PSN）对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）、外周血和淋巴液中CD4＋IL-17＋T细胞（CD4＋IL-17＋T）与CD4＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋Foxp3＋ Treg）百分比及IL-10、IL-17水平的影响及其可能机制.方法 SD大鼠60只随机分为对照组（n=15）、哮喘组（n=15）、BCG-PSN干预对照组（n=15）和BCG-PSN干预哮喘组（n=15）.哮喘组和BCG-PSN干预哮喘组使用卵白蛋白建立大鼠哮喘模型,对照组和BCG-PSN干预对照组以等量生理盐水代替卵白蛋白,BCG-PSN干预哮喘组和BCG-PSN干预对照组均使用BCG-PSN进行干预.收集各组大鼠BALF、外周血和淋巴液,采用流式细胞术检测CD4＋IL-17＋T和CD4＋Foxp3＋ Treg百分比,酶联免疫吸附法（ELISA）检测IL-10和IL-17水平.结果 各组大鼠淋巴液中CD4＋Foxp3＋ Treg百分比、IL-10水平较BALF和外周血均明显升高（均P＜0.01）,CD4＋IL-17＋T百分比、IL-17水平较BALF和外周血均明显下降（均P＜0.01）.哮喘组大鼠BALF、淋巴液和外周血CD4＋Foxp3＋ Treg百分比、IL-10水平较其余3组均显著降低,而CD4＋IL-17＋T百分比、IL-17水平较其余3组均显著升高（均P＜0.01）.BCG-PSN干预哮喘组大鼠BALF、淋巴液和外周血CD4＋Foxp3＋ Treg百分比和IL-10水平较哮喘组显著升高（均P＜0.01）,与对照组和BCG-PSN干预对照组比较差异无统计学意义（均P＞0.05）.BCG-PSN干预哮喘组大鼠BALF、淋巴液和外周血CD4＋IL-17＋T细胞百分比、IL-17水平较哮喘组均显著下降（均P＜0.01）,与对照组和BCG-PSN干预对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 BCG-PSN可能通过调节哮喘大鼠外周血和淋巴液中CD4＋Foxp3＋ Treg和CD4＋IL-17＋T的百分比及相关细胞因子水平,改善机体免疫功能,从而减轻哮喘的炎性反应.
- 涂玲梁颖红魏明刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：哮喘卡介苗多糖核酸辅助性T细胞白细胞介素10白细胞介素17
- 输血相关急性肺损伤大鼠肺组织细胞间黏附分子1和细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1的表达
- 2016年
- 目的检测输血相关急性肺损伤（TRALI）大鼠肺组织细胞间黏附分子1（ICAM-1）和细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1（CINC-1）的表达，探讨TRALI的发病机制。方法雄性SD大鼠60只按随机数字表法分为正常对照组、脂多糖对照组、TRALI组和阳性对照组，每组15只。（1）TRALI组：腹腔注射脂多糖2 h后进行大鼠股动脉插管，移除大鼠约10%血容量的血液，然后输注等体积的血浆；（2）正常对照组：除腹腔注射生理盐水2 ml，以及移除大鼠血液后输注等体积生理盐水外，其余处理同TRALI组；（3）脂多糖对照组：移除大鼠血液后输注等体积生理盐水，其余处理同TRALI组；（4）阳性对照组：移除大鼠血液后输注等体积脂多糖，其余处理同TRALI组。4组大鼠处理6 h后处死，进行肺组织病理学检查和髓过氧化物酶（MPO）活性测定，检测支气管肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞百分比。采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化法检测4组大鼠肺组织ICAM-1、CINC-1 mRNA和蛋白表达。结果 TRALI组大鼠肺组织病理评分、湿干重比和MPO活性均明显高于正常对照组（均P〈0.05）。与正常对照组比较，TRALI组大鼠支气管肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞百分比均明显升高（均P〈0.05）。TRALI组大鼠肺组织ICAM-1、CINC-1 mRNA表达均明显高于正常对照组（均P〈0.05）。免疫组化显示，TRALI组大鼠肺组织ICAM-1、CINC-1蛋白表达均明显高于正常对照组。结论 ICAM-1和CINC-1参与了TRALI模型大鼠肺组织中性粒细胞与内皮细胞的黏附和聚集，可能在TRALI发病过程中起重要作用。
- 梁颖红张成诗魏明刘佳龚艳杰涂玲张宜花杨璐
- 关键词：输血细胞间黏附分子1SPRAGUE-DAWLEY
- 输血相关性急性肺损伤SD大鼠肺组织细胞间黏附分子-1基因的表达被引量：1
- 2016年
- 目的研究输血相关性急性肺损伤（transfusion-relatedacutelunginjury，TRALI）SD大鼠肺组织细胞间黏附分子（intercellularcelladhesionmolecule，ICAM）一1基因表达和中性粒细胞（polymorphonuclearneutrophil，PMN）数量的变化，旨在探讨ICAM-1和PMN在TRALI发病中的作用。方法60只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、脂多糖组、TRALI组、阳性对照组各15只。①正常对照组采用假手术处理；②脂多糖组经大鼠腹腔注射脂多糖（2mg／kg，≤1min完毕），2h后静脉输注生理盐水（约1mL／只）；（3）TRALI组腹腔注射脂多糖（2mg／kg）2h后静脉输注血浆（约1mL／只）；④阳性对照组静脉输注脂多糖（5mg／kg）诱导急性肺损伤。采用Western印迹法检测血浆CAM-1蛋白表达；采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测大鼠肺组织中ICAM-1基因表达量；采用免疫组化法观察肺组织中ICAM一1蛋白表达。结果阳性对照组、TRALI组血浆ICAM-1蛋白表达均显著高于正常对照组、脂多糖组（0．58±0．09、0．41±0．07VS．0．12±0．03、0．21±0．04，均P〈0．01）；与正常对照组肺组织中ICAM-1蛋白含量和ICAM-1mRNA表达[（0．16±0．03）和（0．36±0．05）]比较，阳性对照组[（0．33±0．09）和（1．53±0．17）]和TRALI组[（0．27±0．07）和（1．24±0．11）]明显升高（P均〈0．05）；TRALI组BALF中细胞总数和PMN百分比[（310±76．6）×10^6／L和（33．5±11．5）％]明显高于正常对照组[（101±63．8）×10^6／L和（9．8±3．5）％，P均〈0．05）]；TRALI组组织含水量和MPO活性明显高于正常对照组（P均〈0．05）。结论TRALI大鼠肺组织中ICAM-1蛋白、ICAM-1mRNA的表达升高，肺组织PMN浸润增加，提示ICAM-1参与了PMN与内皮细胞的黏附和聚集，表明ICAM-1和PMN可能在TRALI的炎症反应过程中发挥重要作用。
- 涂玲魏明刘佳梁颖红龚艳杰张宜花杨璐
- 关键词：急性肺损伤输血相关性细胞间黏附分子-1SD大鼠
- 肺癌患者外周血CEA mRNA、CK19 mRNA和CK20 mRNA的表达被引量：1
- 2014年
- 在肿瘤的治疗中,目前困扰临床医生的主要问题仍是肿瘤的复发与转移。为此本研究采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术对不同临床分期和类型的肺癌患者外周血CEA mRNA、CK19 mRNA和CK20 mRNA的表达水平进行检测,探讨其对肺癌微转移诊断和监测的临床意义。1对象与方法 1.1研究对象肺癌患者60例,男46例,女14例。平均年龄57.8岁,均经病理组织切片确诊。其中小细胞肺癌10例,
- 魏明涂玲梁颖红刘佳张俊华龚艳杰
- 关键词：肺癌聚合酶链反应
- p38MAPK和COX-2 mRNA在创伤后多器官功能障碍综合征患者外周血中的表达被引量：2
- 2011年
- 目的探讨创伤后多功能障碍综合征（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）患者外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）环氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）与p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase，p38MAPK）mRNA的表达以及与MODS病情变化的关系。方法选择符合1995年中华医学会急诊分会危重病专业组制定的MODS病情分期诊断标准和1991年Knaus提出急性生理和慢性健康评分Ⅲ（APACHEⅢ）的患者40例，其中男22例，女18例；与患者年龄、性别相匹配的健康对照组40名。用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测PBMCs培养上清液COX－2与p38MAPK含量；用逆转录一聚合酶链反应（RT．PCR）法检测PBMCs中COX-2与p38MAPK的mRNA表达。并分析它们的表达与APACHEllI评分的相关性。结果MODS组患者PBMCs的COX-2与p38MAPK含量及两者的mRNA表达均显著高于健康对照组（均P〈0．05）；MODS死亡患者PBMCs的COX-2与p38MAPK含量及两者的mRNA表达与存活患者比较，差异具有统计学意义（均P〈0．05）；相关分析显示，PBMCs培养上清液中COX-2与p38MAPK含量呈正相关（r=0．6147，P〈0．01）；患者PBMCs的COX-2和p38MAPK mRNA表达与APACHEⅢ评分呈正相关（r1=0．5009，P1〈0．05，r2=0．5316，p2〈0．05）。结论COX-2与p38MAPK参与了MODS的发病过程，而且可作为判断MODS预后的辅助指标。
- 魏明涂玲梁颖红刘佳张俊华
- 关键词：创伤多器官功能障碍综合征环氧化酶-2P38丝裂原活化蛋白激酶
- 磷酸化c-Jun氨基末端激酶信号通路在强噪声诱导豚鼠前庭毛细胞凋亡中的作用
- 2012年
- 目的探讨强噪声对豚鼠前庭毛细胞死亡的机制及磷酸化c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通道在强噪声诱导前庭毛细胞凋亡中的作用，进一步揭示噪声性耳聋的发病机制，为临床治疗提供理论基础。方法将实验组豚鼠暴露在4kHz窄带噪声120dB SPL噪声环境中4h，噪声刺激停止后1、5、15d组及对照组（每组各8只）在处死前测ABR。取每组4只豚鼠前庭毛细胞作石蜡切片。另外4只豚鼠提取前庭毛细胞总蛋白，采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术（TUNEL）检测前庭毛细胞的凋亡，免疫组织化学法及Western blotting法检测JNK信号途径蛋白质P-JNK、P-c-Jun的表达。结果噪声暴露组前庭毛细胞存在TUNEL阳性细胞，以1d组最多，逐渐减少，15d组最少，对照组未见阳性细胞。免疫组织化学结果显示，噪声暴露组P-JNK、P-c-Jun有免疫反应阳性，定位于细胞核，对照组未见阳性细胞。Western blotting检测JNK信号途径蛋白质P-JNK、P-c-Jun水平在强噪声刺激后，1d迅速增高并快速活化，5d达高峰，随后逐渐下降，但在15d仍然维持较高水平。结论强噪声可以通过诱导细胞凋亡造成前庭毛细胞损伤，同时P-JNK标志着JNK信号途径的激活，提示JNK信号通路可能是介导强噪声诱导豚鼠前庭毛细胞凋亡信号通道之一，在前庭毛细胞损伤中发挥重要作用。
- 魏明王伟涛张涛涂玲梁颖红刘佳张俊华龚艳杰
- 关键词：噪声脱噬作用毛细胞信号转导
- 特应性皮炎患者外周血T细胞磷酸肌醇3激酶信号转导通路的表达被引量：6
- 2015年
- 目的 探讨特应性皮炎（AD）患者外周血T细胞磷酸肌醇3激酶（PI3K）信号转导通路活化情况及其临床意义.方法 检测38例AD患者的T细胞PI3K通路活性,健康对照组38例.外周血T淋巴细胞分离采用Rosettsep T细胞提取试剂盒提取,PI3K活性采用免疫沉淀和酶联免疫吸附试验（ELISA）,Akt及其磷酸化蛋白采用免疫印迹法,T细胞增殖采用噻唑蓝（MTT）,白细胞介素（IL）6和IL-10水平采用ELISA检测.结果 新鲜分离的AD患者外周血T细胞PI3K和Akt活性均显著高于健康对照组（P＜0.05）.AD患者T细胞在体外培养24 h后PI3K和Akt活性与健康对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,健康对照组T细胞用AD患者血清孵育24 h后PI3K和Akt活性显著增高（P＜0.05）.PI3K特异性抑制剂LY294002显著抑制AD患者T细胞增殖[（123±25）％和（195±28）％,P＜0.05]及分泌IL-6和IL-10分别为[（431±64） ng/L和（823±128） ng/L,P＜ 0.05],[（120±21） ng/L和（213±35） ng/L,P＜0.05].新鲜分离的AD患者外周血T细胞PI3K和Akt活性与疾病严重程度指数（EASI）无相关.结论 AD患者外周血T细胞存在磷酸肌醇3激酶信号转导通路活化异常,并与T细胞增殖和细胞因子分泌有关,提示AD患者外周血中可能存在激活该通路的血清因子.
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：信号传导
