汪培华 作品数:51 被引量:245 H指数:9 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 湖北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
果糖诱导大鼠胰岛素抵抗和高血压的机制及人组织型激肽释放酶基因的治疗作用 被引量:10 2003年 目的 研究果糖诱导高血压合并高胰岛素血症、胰岛素抵抗时内皮素 1(ET -1)及其受体 (ETA)、血管紧张素Ⅱ受体 1(AT1)的变化和人组织型激肽释放酶 (HK )基因的治疗作用。方法雄性Sprague -Dawley (SD)大鼠饮用 10 %果糖水诱导形成高血压和胰岛素抵抗动物模型后 ,静脉注入含HKcDNA的重组质粒 (pcDNA HK )。监测血压 ,血清胰岛素及血糖等。 2周时处死动物 ,测定脏器中HK的表达及ET 1、ETA和AT1的表达情况。结果 饮高果糖水 2周后 ,动物血压、血胰岛素水平明显高于正常饮水组 ,静脉注射pcDNA HK后第 3天即可明显降低果糖诱导高血压大鼠的血压 ,最大降压效应在导入基因后第 14天 (达 15mmHg) ,其降压效应持续 3周以上。HK基因导入后第 2周 ,HK治疗组动物ET 1、ETA及AT1明显低于对照组 ,与正常组接近。并且在血压下降的同时 ,血胰岛素浓度亦明显降低。结论 动物高果糖饮水可导致高血压及高胰岛素血症 ,其机理可能与ET 1、ETA和AT1表达增加有关 ,HK基因的导入可能通过降低血管ET 1、ETA和AT1表达而降低血压 ,并纠正高血压伴随的高胰岛素血症 。 赵春霞 汪培华 李宏伟 Lee Chao Julie Chao 肖啸 汪道文关键词:果糖诱导 胰岛素抵抗 高血压 重组腺相关病毒介导的细胞色素P450表氧化酶基因对TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞炎症的影响 被引量:2 2006年 目的研究过度表达细胞色素P450表氧化酶基因引起内源性EETs产生增加是否能抑制由TNF—α诱导的内皮炎症。方法以携带三种不同表氧化酶基因的重组腺相关病毒rAAV- CYP2C11、rAAV—CYP2J2和rAAV—CYPF87V转染人脐静脉内皮细胞,然后再以TNF—α干预,来研究它们对内皮VCAM-1的表达及外周血单核细胞PBMC与内皮细胞粘附的影响。结果TNF-α诱导了 HUVEC中VCAM-1蛋白质的表达,rAAV—CYP2C11、rAAV—CYP2J2能明显抑制TNF-α的这一作用。 TNF-α诱导了PBMC与HUVEC的粘附(100±0.0% vs 620.1±65.3%),rAAV-CYP2C11、rAAV- CYP2J2能明显抑制TNF-α的这一作用(分别为120.3±33.4% vs 387.7±27.4%.131.0±28.7% vs 535.0±69.7%)。结论CYP2C11和CYP2J2基因具有显著的保护内皮细胞、对抗炎症介质介导的内皮损伤的作用。 王家宁 汪璐云 汪培华 杨仕林 汪道文关键词:重组腺相关病毒 花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶 血管细胞粘附分子-1 激肽释放酶基因过表达对5/6肾切除大鼠肾脏细胞凋亡和炎症的影响和机制 2011年 目的探讨凋亡和炎症在人组织型激肽释放酶基因(hum an tissue kallire in,HK)肾脏保护中的作用和机制。方法健康雄性Wistar大鼠32只,随机分为假手术组(sham)、手术组(operation),手术+绿色荧光蛋白(GFP)尾静脉注射组(GFP组)以及手术+人组织型激肽释放酶基因组(HK组)。尾静脉注射病毒后3周,采取5/6肾切除术构建动物模型。术后第12周处死动物,肾组织石蜡切片行HE染色和M asson染色检测肾脏结构和胶原沉积。Tunnel染色和Caspase-3活性测定以检测凋亡细胞。Western blot技术检测肾组织Bcl-2、Bc l-xl、Bax、VCAM-1和MCP-1表达水平。结果 HE染色显示HK过表达明显抑制了5/6肾切除大鼠肾小管扩张和组织节段性硬化。Masson染色表明HK明显抑制了5/6肾切除大鼠肾脏胶原沉积(P<0.05)。Tunnel染色和Caspase-3活性测定结果显示HK显著减少肾脏细胞的凋亡(P<0.05)。W estern b lot显示HK明显降低了促凋亡蛋白Bax和炎症相关蛋白MCP-1和VCAM-1的表达,上调了凋亡抑制蛋白Bc l-2和Bc l-xl的表达(P<0.05)。结论 HK基因的肾脏保护作用至少部分是通过抑制细胞凋亡和炎症。机制至少包括下调促凋亡蛋白Bax和上调凋亡抑制蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达,抑制炎症相关蛋白MCP-1和VCAM-1的表达。 赵刚 高静 郑晓菲 冯文静 赵俊杰 汪培华 凃玲关键词:炎症 冠状动脉综合征时血中C-反应蛋白、纤维蛋白原和白细胞的变化 被引量:46 2000年 目的 :探讨炎症反应和冠状动脉综合征 (CAS)之间的关系。方法 :测定 42例 CAS患者和 2 0例可疑冠心病 (KP)患者的血脂、C-反应蛋白 (CRP)、纤维蛋白原 (FIB)含量和白细胞 (WBC)总数 ,CAS患者经冠状动脉造影证实冠状动脉有异常性改变 ,KP患者经冠状动脉造影证实其冠状动脉正常。 CAS组患者又分为 3组 ,稳定型心绞痛 (SAP)组 17例 ,不稳定型心绞痛 (U AP)组 12例 ,急性心肌梗死 (AMI)组 13例。比较 CAS和 KP组之间 ,AMI、UAP、SAP与 KP组之间各项指标的差异。结果 :CAS和 KP组之间的血脂水平相比无显著性差异 ;CAS组的 CRP、FIB和 WBC水平明显高于 KP组 (P <0 .0 5 ) ;AMI、UAP组的 CRP、FIB和 WBC水平明显高于 KP组 (P值分别为 P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ;但 SAP和 KP组之间的 CRP、FIB和 WBC水平相比无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :CAS的发生与炎症反应有关 ,CRP、FIB和 WBC水平的增高与 CAS的发生显著相关。 杨晓云 王琳 汪培华关键词:C-反应蛋白 纤维蛋白原 白细胞 冠状动脉综合征 腺相关病毒介导的转人C-反应蛋白基因诱导大鼠高血压形成 2008年 目的研究过度表达人C-反应蛋白(hCRP)对大鼠血压的影响及其相关机制。方法以重组腺相关病毒为载体,介导hCRP基因(CRP组)或对照基因(GFP组)在大鼠体内表达,观察实验动物血压变化,并以western blot方法检测大鼠主动脉血管紧张素1型受体(AT_1),血管紧张素2型受体(AT_2)的表达。结果CRP组大鼠血压从基因注射后2月开始升高,升高血压的效应在基因导入3月后保持稳定(与对照组相比约升高21 mm Hg)并持续到实验结束。而GFP组血压无明显变化。Western blot结果显示,与对照组相比,CRP组大鼠主动脉AT_1蛋白水平升高,而AT_2蛋白水平降低。结论重组腺相关病毒介导的hCRP过表达可以导致大鼠血压升高,其机制与增加主动脉AT_1表达,降低AT_2表达有关。 关红菁 汪培华 周昌清 倪黎 汪道文关键词:炎症 C-反应蛋白 高血压 血管紧张素受体 重组腺相关病毒介导核心蛋白聚糖基因转染对SiHa细胞周期和凋亡的影响 被引量:11 2005年 背景与目的:核心蛋白聚糖(decorin,DCN)是一种多效性分子,具有许多重要功能。本研究旨在通过重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virusv ector,rAAV)载体介导DCN基因转染宫颈癌细胞(SiHa),观察其在SiHa细胞的表达及其对细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:根据GenBank报道的DCN基因cDNA序列,克隆含开放读码框的DCN基因片段,测序后克隆至质粒UF1(UF1·DCN),通过磷酸钙鄄DNA沉淀法共转染293细胞,产生高滴度的含DCN基因的重组腺相关病毒(rAAV·DCN)。用rAAV·DCN转染处于对数生长期的SiHa细胞,并以rAAV·LacZ转染和非转染细胞作对照。通过Westernblot分析DCN的表达,PI染色流式细胞仪分析细胞周期的变化及DCN对细胞凋亡的影响。结果:获得了含开放读码框的人DCN基因片段(1080bp)。成功包装至重组腺相关病毒载体获得高滴度的rAAV·DCN重组体,转染SiHa细胞后能有效表达DCN并使细胞周期发生明显变化,G1期细胞百分率[(72.3±2.3)%vs.(59.5±2.5)%]明显增加,S期[(11.9±1.9)%vs.(17.8±0.8)%]和G2期[(13.4±1.1)%vs.(21.5±0.9)%]细胞百分率明显降低;对细胞凋亡无明显影响。结论:DCN高表达对SiHa细胞增殖周期有明显阻滞作用。 赵春霞 赵荫涛 汪培华 肖啸 汪道文关键词:宫颈癌细胞 核心蛋白聚糖 细胞周期 凋亡 表达人类反义受磷蛋白基因的重组腺相关病毒及其制备方法 本发明涉及一种表达人类反义受磷蛋白基因的重组腺相关病毒及其制备方法,属于生物工程技术领域,用于心力衰竭及其他相关疾病的基因治疗。该重组腺相关病毒由天然状态的腺相关病毒和腺病毒经分子生物学方法人工剪切、修饰和加工而成,该载... 汪道文 肖啸 赵春霞 汪培华文献传递 组织型激肽释放酶对血管保护及脑卒中预测 汪道文 徐西振 张琴 唐家荣 杨德业 王涛 赵春霞 凃玲 严江涛 汪培华 汪道文小组历时十余年研究了内源性组织型激肽释放酶-缓激肽系统对心脑血管的保护作用和作用机制,研究发现:1、应用基因治疗的方法阐明了激肽释放酶基因高表达显著降低各种模式动物的血压和保护靶器官的作用(心血管内科学;学科代码:...关键词:关键词:脑卒中 激肽释放酶 基因治疗 冠心病患者血清中C-反应蛋白纤维蛋白原和白细胞的变化 2001年 目的测定冠心病(CAD)患者血清中某些炎性指标,探讨炎性反应与CAD之间的关系.方法42例经冠脉造影证实其冠脉有异常改变的CAD患者和20例经冠脉造影证实其冠脉无异常改变的可疑冠心病患者(SCAD组)作为实验对象,测定各组患者血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),载脂蛋白(apoA、apoB)、C-反应蛋白(CRP)、纤维蛋白原(FIB)和白细胞(WBC)含量.结果①CAD和SCAD组之间的血脂水平相比无明显差异;②CAD组的CRP、FIB和WBC水平明显高于SCAD组.结论CAD的发生与炎性反应有关,CRP、FIB和WBC水平的增高与急性冠心病事件的发生密切相关. 杨晓云 刘湘 王琳 汪培华关键词:C-反应蛋白 纤维蛋白原 白细胞 炎症反应 冠心病 心脏病患者血清中抗心律失常肽浓度的变化 被引量:1 2001年 为建立血清中抗心律失常肽 (antiarrhythm ic peptide,AAP)的放射免疫检测方法 ;观察心脏病患者血清中AAP分泌变化 ,部分阐明 AAP分泌的影响机制 ,采用 3- (4 -羟基苯 )丙酸 - N-琥珀酰亚胺酯为连接剂 ,将 1 2 5 标记在AAP上 ,运用放射免疫方法测定心肌梗死、慢性心力衰竭、心房纤颤患者及对照组血清中 AAP的浓度并加以比较。结果显示 :心力衰竭、心房纤颤患者血清中 AAP的浓度较对照组高 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;心肌梗死患者血清中 AAP的浓度与对照组相比差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结果表明 :AAP的分泌与心肌缺血无关 ;血流动力学异常会导致 汪培华 齐敬华 张立博 汪道文 赵春霞关键词:抗心律失常肽 放射免疫 心肌梗死 心房纤颤