杨毅
- 作品数：9 被引量：41H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 布鲁氏菌vjbR突变株的构建及其毒力表型分析被引量：4
- 2010年
- 为分析vjbR在布鲁氏菌毒力中的作用,构建了vjbR的突变株和互补株,并分析了它们在巨噬细胞和小鼠体内的存活能力。利用同源重组的方法,用卡那抗性基因替换了16M的vjbR(BMEII1116)基因,得到了vjbR的缺失突变株16M△vjbR。将vjbR基因的ORF克隆到pMD18-T载体中,然后将其转入到突变株16M△vjbR中得到互补株16M△vjbR-C。用16M、16M△vjbR和16M△vjbR-C侵染巨噬细胞和感染小鼠,比较分析它们在巨噬细胞内的生存能力及小鼠毒力。研究结果表明vjbR突变株在巨噬细胞和小鼠体内的毒力减弱,存活能力下降,说明vjbR基因是布鲁氏菌16M的毒力相关基因,对于布鲁氏菌建立慢性感染是必要的。
- 付思美白耀霞曲勍徐杰王玉飞钟志军于爽王同坤杨毅陈燕芬汪舟佳杜昕颖黄留玉甄清陈泽良
- 关键词：布鲁氏菌毒力
- 布鲁杆菌Cu-Zn SOD和GroEL的克隆表达及细胞免疫特性比较分析被引量：3
- 2010年
- 目的分析比较布鲁杆菌两种外膜蛋白Cu-Zn SOD和GroEL的细胞免疫特性。方法以布鲁杆菌16M基因组为模板,PCR扩增Cu-Zn SOD和GroEL蛋白的基因序列。采用Gateway方法构建表达载体,在大肠埃希菌中诱导表达并纯化,用获得的纯化蛋白刺激减毒活疫苗S19免疫小鼠的脾细胞,并测定细胞上清中IFN-γ的水平。结果成功克隆表达了Cu-Zn SOD和GroEL蛋白,用这两种蛋白刺激S19免疫小鼠脾细胞后,细胞上清中的IFN-γ水平明显升高,并且GroEL刺激后的IFN-γ水平高于Cu-Zn SOD刺激后的IFN-γ水平。结论 GroEL和Cu-Zn SOD蛋白均具有细胞免疫反应特性,且GroEL的细胞免疫反应特性强于Cu-ZnSOD。
- 于爽徐杰付思美王玉飞白耀霞钟志军陈燕芬王同坤杨毅杜昕颖汪舟佳李竞黄留玉陈泽良
- 关键词：GATEWAY技术
- 不同种型布鲁氏菌进化中基因获得与缺失研究
- 布鲁氏菌病是一种人畜共患传染病,主要导致家畜流产和人类波状热,该病在全世界均有分布,在部分国家广泛流行。布鲁氏菌是布鲁氏菌病的病原体,能引起家畜和野生动物感染,人布鲁氏菌病主要是由于接触感染的动物而致病。此外,布鲁氏菌容...
- 杨毅
- 关键词：布鲁氏菌比较基因组
- 文献传递
- 家兔实验性动脉粥样硬化主动脉壁中层平滑肌细胞内原位钙含量研究(摘要)
- 1993年
- 近年研究表明,细胞内钙参与多个促成动脉粥样硬化(AS)的细胞过程。钙拮抗剂有抗AS作用,有AS斑块的人主动脉及实验性AS动物的主动脉的总钙含量增高,家兔实验性AS的主动脉平滑肌细胞膜对钙的通透性增加近5倍。然而。
- 徐泽昌孙静平张德添汪宝珍杨毅张学敏
- 关键词：动脉粥样硬化细胞
- 人参抗动脉粥样硬化作用的实验研究——EPMA检测细胞内原位钙含量
- 1993年
- 30只兔分为正常对照组、动脉粥样硬化对照组和人参组。检测血MDA、6-酮-PGF1a、TXB2及主动脉壁中层平滑肌胞质原位钙含量等。结果人参无明显抗动脉粥样硬化作用,无阻止细胞内钙超负荷作用。
- 徐泽昌刘红英董振南张德添汪宝珍杨毅张学敏
- 关键词：人参动脉粥样硬化
- 神经生长因子对糖尿病大鼠背根神经节神经细丝蛋白变化的影响被引量：7
- 1998年
- 目的：观察神经生长因子（ＮＧＦ）对糖尿病神经病变的治疗作用。方法：采用免疫组织化学染色结合电子计算机图像分析技术，测定糖尿病大鼠背根神经节的结构蛋白－神经细丝蛋白（ＮＦ）的相对含量。结果：糖尿病成模后三个月，背根神经节ＮＦ的平均灰度值，糖尿病组（ＤＭ组）明显低于正常对照组（ＮＣ组），ＮＧＦ组（ＮＧＦ２００μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１肌肉注射，３０ｄ）虽低于ＮＣ组，但却高于ＤＭ组，Ｐ均＜０．０１。结论：ＮＧＦ可促进感觉神经结构蛋白的表达。
- 贾军宏马学毅田东华田东华杨毅于国平杨毅
- 关键词：神经生长因子糖尿病背根神经节
- 不同种型布鲁菌间的基因获得与缺失研究
- 2011年
- 目的:了解不同种型布鲁菌间的基因差异及基因的获得与缺失情况。方法:采用生物信息学方法比较分析已测序的10株布鲁菌基因水平的差异,分析它们的核心基因组与泛基因组,对得到的差异基因用PCR验证其在19株不同生物型标准菌株中的分布情况。结果:不同种型布鲁菌在基因水平上存在较大差异,差异基因主要位于Ⅱ号染色体上;根据差异基因,鉴定了42个差异区段,这些差异区段在19株不同生物型标准菌株中存在差异分布。结论:布鲁菌在进化过程中分别获得或失去了不同的基因区段,从而适应不同的宿主环境。
- 杨毅颜焱峰陈燕芬周晓燕王玉飞周冬生杨瑞馥姜海崔步云陈泽良黄留玉
- 关键词：布鲁菌比较基因组学
- 利用T载体克隆快速构建布鲁氏菌缺失突变株被引量：17
- 2010年
- 目的:建立一种基于T载体快速克隆构建布鲁氏菌突变株的方法,提高布鲁氏菌突变株构建的效率。方法:采用融合PCR的方法,将待缺失基因上下游的同源臂与卡那霉素抗性基因融合起来,构建突变盒,然后将突变盒直接与T载体连接,构建突变载体,将载体转入布鲁氏菌感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得布鲁氏菌的缺失突变株。结果:结合融合PCR和T载体快速克隆,能够在48h之内构建好突变载体,与传统的酶切连接相比,效率高、周期短。结论:基于T载体快速克隆是一种非常高效的构建突变株的方法,为布鲁氏菌突变株的构建提供了一种新方法。
- 白耀霞杨毅王玉飞王同坤于爽陈燕芬付思美黄留玉田晋红陈泽良
- 关键词：布鲁氏菌T载体
- 多药耐药相关蛋白基因在乳腺癌中的表达及其临床意义被引量：9
- 1999年
- 目的：检测多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因在乳腺癌组织中的表达水平，并和谷胱甘肽Ｓ－转移酶－ｐｉ（ＧＳＴ－π）的表达作相关性比较，探讨其在临床的应用价值。方法：用定量ＲＴ－ＰＣＲ技术，检测了５５例乳腺癌组织中ＭＲＰ和其中４０例ＧＳＴ－πｍＲＮＡ的表达水平，并和术前化疗比较分析。结果：ＭＲＰ表达的阳性率为７６．４％，高表达占１８．２％，中低表达各占２３．６％和３４．５％。ＭＲＰ和ＧＳＴ－π有４０％的共表达率，虽然ＭＲＰ表达阳性率及水平和术前化疗关系不明显，但化疗后二者表达有正相关趋势。结论：ＭＲＰ在乳腺癌中普遍表达，以中低表达为主，其和ＧＳＴ－π的共表达可能和化疗药物诱导有关。
- 陈高明李春海毛慧生毛慧生孙丽亚王建军孙丽亚王白岚
- 关键词：MRP乳腺癌多药耐药性基因表达
