杨朝晖
- 作品数：12 被引量：62H指数：3
- 供职机构：兰州生物制品研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳中LPS样品制备方法的改进被引量：2
- 2007年
- 为了对革兰阴性细菌的LPS进行快速分析,观察LPS的产量、分子量分布,进行菌种筛选和抗原传代稳定性研究,实验中对热酚法、酶水解法、冷酚法三种制备LPS的方法进行了比较。结果证明,改进的水饱和冷酚LPS提取方法,需要时间短、经济、方便,只须几个细菌菌落就可以提取LPS进行SDS-PAGE电泳分析,说明该方法有很好的实用性。
- 杨朝晖计永莉周园王军赵志强
- 关键词：脂多糖SDS-PAGE抽提
- 幽门螺杆菌感染实验动物模型的建立
- 1999年
- 杨朝晖陈翠萍
- 关键词：幽门螺杆菌感染实验动物模型小鼠
- 两株中国腮腺炎野毒SH基因cDNA直接测序和克隆测序被引量：2
- 1998年
- 对来源于兰州和上海两市的两株腮腺炎病毒野毒的小疏水蛋白（ＳＨ）基因及其旁侧区ｃＤＮＡ的ＰＣＲ扩增产物，分别进行直接测序和克隆测序。用直接测序法测定２株腮腺炎野毒３７８个核苷酸序列，在此范围内存在１６个核苷酸（４．２％）差异，其中１１个（２．９％）位于编码区序列中，所推导的ＳＨ蛋白序列有６个氨基酸（１０．５％）差异。克隆测序法测定的这两株腮腺炎野毒的核苷酸序列相当于直接法的７８－３７８位核苷酸。两种方法在所测３０１个核苷酸（ｎｔ）的共同区域内序列完全一致。证明ＰＣＲ产物直接测序用于腮腺炎病毒分子流行病学研究不仅特异性强，敏感度高，而且比克隆测序法更为快速简便。
- 武力白植生李益民周旭宁小军杨朝晖
- 关键词：腮腺炎病毒测序
- 一株腮腺炎野毒分离传代前后其SH基因cDNA的测序比较
- 1997年
- 为证实鸡胚分离传代是否引起腮腺炎病毒基因组高变区小疏水蛋白（ＳＨ）基因的变异，用来源于上海的腮腺炎野毒Ｗｓｈ３株在鸡胚尿囊腔分离前和传代５次后测定ＳＨ基因及其旁侧区３８０个核苷酸的ｃＤＮＡ序列，两者结果相同，未见该基因的突变。该基因核苷酸测序可用于腮腺炎病毒的分子流行病学和毒株基因鉴别研究。
- 武力白植生李益民宁小军杨朝晖
- 关键词：腮腺炎病毒CDNA
- 甲型副伤寒结合疫苗的制备及其免疫原性研究被引量：9
- 2006年
- 目的研制预防沙门菌属A组甲型副伤寒沙门菌感染的多糖蛋白结合疫苗。方法通过对甲型副伤寒沙门菌尼泊尔株NTP-6的发酵培养,热酚水法提取脂多糖(LPS),酸水解脱毒,纯化出有效的型特异O-SP抗原；然后用CDAP对O-SP活化、ADH衍生后,在EDAC的缩合作用下,结合到破伤风类毒素TT上,制备出甲型副伤寒结合疫苗。用含2．5μg多糖甲型副伤寒结合疫苗免疫小鼠,以LPS为包被抗原,用间接ELISA法测定血清抗甲型副伤寒LPS IgG抗体；并测定血清多糖抗体的补体介导杀菌活性；在小鼠和豚鼠体内观察甲型副伤寒结合疫苗的安全性。结果甲型副伤寒结合疫苗第2次免疫NIH后,小鼠血清抗甲型副伤寒LPS IgG抗体平均几何滴度(GMT)均较第1次有4倍以上升高,第3次免疫后,有明显的加强效应；抗体的补体介导杀菌活性效价达1：1280以上；小鼠和豚鼠体内甲型副伤寒结合疫苗安全性良好。结论成功建立了甲型副伤寒结合疫苗的制备工艺；制备的甲型副伤寒结合疫苗有良好的免疫原性,并具有明显的加强效应；刺激的血清多糖抗体有较高的补体介导杀菌活性效价；安全性达到人用生物制品相关要求。
- 赵志强杨朝晖计永莉杜琳谢贵林
- 关键词：甲型副伤寒沙门菌结合疫苗免疫原性
- IgY抗体在体外和体内对幽门螺杆菌作用的研究被引量：40
- 2002年
- 目的 通过口服IgY抗体制剂中和幽门螺杆菌 (Hp)的毒性蛋白 ,以达到根除Hp感染的目的。方法 将空泡毒素基因阳性Hp株培养后 ,用超滤浓缩的上清和超声破碎的菌体蛋白免疫产蛋母鸡 ,从鸡蛋中提取 2种IgY抗体 ,用MTT法进行IgY抗体对Hp毒素细胞毒活性的中和作用试验 ,将此 2种IgY抗体间隔 2d分 3次口服已感染Hp的小鼠 ,2、4、6、8周后分批处死小鼠 ,进行细菌培养、尿素酶试验和病理检查。结果 2种IgY抗体分别能够中和培养上清和菌体蛋白诱导的Vero细胞毒活性。感染小鼠经治疗后细菌培养阴转率分别达 6 6 .7%、10 0 %、10 0 %、10 0 %。病理切片显示 ,炎症明显减轻甚至消失。
- 陈翠萍杨朝晖王永谦
- 关键词：幽门螺杆菌IGY抗体细胞毒性胃疾病药物
- 鼠伤寒结合疫苗研制的初步探讨被引量：2
- 2006年
- 通过对鼠伤寒沙门菌LH株的发酵培养,热酚水法提取脂多糖LPS,1%乙酸沸水浴水解90m in脱毒,Super-dex 200柱层析,收集第一峰为鼠伤寒O-SP抗原;然后用CDAP对O-SP活化、ADH衍生后,在EDAC的缩合作用下,结合到破伤风类毒素TT上,制备出鼠伤寒结合疫苗;用含2.5μg多糖鼠伤寒结合疫苗免疫小鼠,以2.5μgO-SP多糖生理盐水溶液以及生理盐水溶液为对照组,间隔14天,免疫三针;以LPS为包被抗原,用间接ELISA法测定血清中抗鼠伤寒LPS IgG抗体。鼠伤寒结合疫苗三针免疫后,小鼠血清抗鼠伤寒LPS IgG抗体效价达到1:80以上的比例为84.2%,而总的几何平均滴度(GMT)达到796;说明制备的鼠伤寒结合疫苗有良好的免疫原性,而且鼠伤寒结合疫苗在小鼠和豚鼠体内有良好的安全性。
- 杨朝晖赵志强计永莉马庆华杜琳谢贵林
- 关键词：鼠伤寒沙门菌结合疫苗免疫原性
- 应用环糊精代替血清培养幽门螺杆菌被引量：9
- 2003年
- 目的 应用环糊精代替培养基中的血清和血液衍生物培养幽门螺杆菌。方法 将同样菌量的细菌接种于 2种布氏培养基中 (分别含 0 .1%环糊精和 7%小牛血清 ) ,培养 3d和 6d后 ,分别检测其A值 ,计算细菌浓度。将取自患者的胃粘膜标本接种于上述培养基上 ,6d后观察其分离培养效果。结果 含 0 .1%环糊精培养基的细菌生长浓度略高于其他配方的培养基。 2 4个胃粘膜标本在 2种培养基上的分离效果完全相同。结论 用环糊精代替培养基中的血清和血液衍生物 。
- 陈翠萍杨朝晖蒋奕
- 关键词：环糊精血清幽门螺杆菌培养基
- 液相色谱-ELISA测定结合疫苗中游离蛋白含量可行性的初步探讨被引量：1
- 2008年
- 用适宜分离范围的色谱柱,预先确定细菌多糖蛋白结合疫苗载体蛋白的洗脱峰出峰时间;然后将细菌多糖-蛋白结合疫苗用相同条件进行分离,分部收集各洗脱峰并直接包被酶标板,与适宜浓度的载体蛋白特异抗体反应后,加入酶标二抗测定各洗脱峰样品中载体蛋白的吸光值;把载体蛋白出峰后的吸光值总和计为游离载体蛋白质吸光值;以游离载体蛋白吸光值占所有洗脱峰吸光值的比例计算游离载体蛋白含量。以伤寒Vi结合疫苗(载体蛋白rEPA)和甲型副伤寒结合疫苗(载体蛋白为TT)作为实验材料探讨方法的可行性。结果说明,该方法具有较好的特异性和敏感度。
- 谭小梅杨朝晖周园赵志强张萍刘月萍计永莉杜琳谢贵林
- 关键词：结合疫苗ELISA液相色谱
- O1/O139新型霍乱疫苗口服免疫动物后的自动免疫保护及被动保护试验研究
- 2003年
- O1/O139霍乱口服疫苗是一种新型疫苗。本文通过 2种不同途径免疫动物 ,检测血清抗菌抗体和肠道分泌性IgA抗体以及保护力试验 ,并探讨了它们之间的关系。通过家兔肠袢试验和细胞四甲基偶氮唑盐 (MTT)试验检测免疫后抗血清的被动保护作用。试验提示 :在霍乱的保护性免疫应答中 ,除粘膜免疫可能占主导作用外 。
- 陈翠萍宣俊文王永谦杨朝晖
- 关键词：霍乱疫苗保护性免疫粘膜免疫
