李浩博
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：同济大学医学院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于树突状细胞的肿瘤疫苗构建及其抗肿瘤效应研究
- 本研究构建携带模拟肿瘤抗原的慢病毒载体pHR-CMV-EGFP-OVA;从小鼠骨髓中分离提取树突状细胞,并经流式细胞仪分选,以适宜条件培养扩增;脂质体法转染人胚肾293T细胞包装慢病毒,用包装产生的慢病毒感染DC与LLC...
- 陈帅李浩博李牧李双赵培林
- 小鼠肺癌细胞肿瘤模拟抗原稳定表达株的建立
- 以树突状细胞(dendriticcell,DC)为基础的靶向肿瘤免疫治疗的实验中,建立真核细胞表达的肿瘤模拟抗原重组慢病毒载体三质粒包装系统,构建pHR-CMV-EGFP-OVA和pHRCMV-EGFP两个慢病毒载体;将...
- 李浩博陈帅李牧李双王蕾赵培林
- 靶向树突状细胞的肿瘤疫苗OVA慢病毒载体构建及其体外抗肿瘤效应被引量：4
- 2012年
- 目的构建靶向树突状细胞(dendritic cell,DC)的肿瘤疫苗pHR-CMV-EGFP-OVA慢病毒表达载体,并观察肿瘤抗原特异性DC激活T细胞对小鼠Lewis肺癌细胞(lewis lung carcinoma cell,LLC)的抗肿瘤效应,为肺癌的临床治疗提供实验依据。方法以分子克隆方法构建携带模拟肿瘤抗原鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)的慢病毒表达载体,经XhoⅠ及XbaⅠ双酶切后电泳和DNA测序验证;应用脂质体法三质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒,转导LLC,进行单克隆化筛选培养后,经RT-PCR、Western blot检测所获得的OVA稳定表达细胞株中OVA的表达;分离纯化小鼠骨髓DC;用慢病毒感染DC;分离纯化小鼠脾T淋巴细胞;应用MLR和MTT法检测肿瘤抗原负载的DC刺激T淋巴细胞对LLC的杀伤作用。结果 (1)构建的pHR-CMV-EGFP-OVA慢病毒表达载体经酶切后电泳和DNA测序,结果显示载体构建正确;(2)获得了纯化的小鼠骨髓来源的DC;(3)获得了携带肿瘤抗原OVA的LLC和DC;(4)负载肿瘤抗原的DC刺激T淋巴细胞能有效地杀伤负载相同肿瘤抗原的LLC。结论本研究成功地构建了携带肿瘤模拟抗原OVA的慢病毒表达载体pHR-CMV-EGFP-OVA,并成功地转导LLC与DC,获得了稳定表达OVA的肺癌细胞株和携带OVA的DC,基于肿瘤抗原靶向DC的抗肿瘤策略能有效地杀伤LLC,为靶向DC的肺癌免疫治疗提供了体外实验依据。
- 陈帅李浩博李牧杨耀琴陶惠红赵培林
- 关键词：慢病毒载体肿瘤抗原树突状细胞
