李佳娜
- 作品数：7 被引量：31H指数：4
- 供职机构：深圳大学生命科学学院过敏反应与免疫学研究所更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 抗粉尘螨主要变应原Der f1单克隆抗体的制备与鉴定
- 目的制备和鉴定鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体(Monoclonal Antibody McAb)。方法利用重组Der f1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通...
- 李佳娜陈家杰刘志刚吉坤美
- 文献传递
- 时间分辨免疫荧光法测定食物中花生过敏原成分被引量：1
- 2010年
- 目的:建立双抗体夹心时间分辨荧光免疫法[Time-resolved Fluoroimmunoassay(TRFIA)]测定食物中花生过敏原蛋白成分,为进出口食品中花生过敏原成分检测和由花生导致的食物过敏性疾病的预防提供技术基础。方法:提取花生蛋白,免疫小鼠制备抗花生总蛋白的多克隆抗体,用该抗体包被酶标板,并用生物素标记该多抗作为捕捉抗体,Eu3+标记的链酶亲和素和以β-二酮体为主的增强液等试剂,建立双抗夹心TRFIA方法,检测该方法的灵敏度,同时用于13种食品中花生过敏原蛋白成分检测。结果:初步地研制出双抗体夹心TRFIA法检测食品中花生过敏原蛋白成分,具有特异性,和其最低检出限为0.1ng/mL,标准曲线在0.1～160ng/mL范围内线性良好;11种食品检测结果与食物过敏原标签标注内容相符,而2种标示不详的食品检测结果均呈现阳性。
- 刘志刚李佳娜顾耀亮夏立新陈家杰
- 关键词：时间分辨荧光免疫法花生过敏原多克隆抗体食物过敏
- 抗粉尘螨主要变应原Der f1单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的制备和鉴定鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)。方法利用重组Der f1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞。用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。结果获得6株可稳定分泌鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1,且6株单抗均具有良好的效价。ELISA和Western-blotting分析表明,该6株单抗均能识别重组Der f1蛋白和天然的粉尘螨提取物。其中,除了484不识别屋尘螨提取物,其他均能识别。结论成功制备了6株鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Der f1检测及纯化方法奠定了基础。
- 顾耀亮李佳娜陈家杰吉坤美刘志刚
- 关键词：F1粉尘螨主要变应原单克隆抗体
- 双抗体夹心ELISA法测定食物中虾过敏原成分被引量：11
- 2009年
- 通过建立双抗体夹心ELISA法测定食物中虾过敏原成分,为食物过敏的预防与诊断提供理论基础。提取虾中过敏原蛋白,免疫小鼠制备抗虾过敏原的多克隆抗体,并以多克隆抗体包被酶标板,生物素标记多抗,建立双多抗体夹心的ELISA法测定食物中虾过敏原成分。成功地研制出双抗体夹心ELISA法检测食品中虾过敏原蛋白成分,具有特异性,其最低检出限为40ng/mL,标准曲线在40～1000ng/mL范围内线性良好。初步建立了检测虾过敏原蛋白成分的ELISA法,并具有较好的特异性和灵敏度,为进一步研制虾过敏原成分的ELISA检测试剂盒打下了基础。
- 吴序栎吉坤美李佳娜詹政科刘志刚
- 关键词：ELISA多克隆抗体食物过敏
- 胶体金免疫层析法检测食品中花生过敏原蛋白成分被引量：11
- 2009年
- 建立一种简易快速胶体金免疫层析法(GICA)用于检测食品中花生蛋白成分。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记抗花生蛋白成分的抗体,制成免疫层析测试条。食品中花生蛋白成分与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。自制花生抗原标准品并检测该方法的灵敏度,同时检测19种食品中是否含有花生蛋白成分。结果表明:GICA测试条与花生蛋白抗原呈特异性反应,检测自制的花生抗原标准品的灵敏度可达50ng/mL,用GICA试条检测了19种食品中,其中13种食品标签上标注含有花生过敏原成分的食品检测结果均呈阳性,4种食品标签上标注不含花生过敏原成分的食品检测结果均呈阴性,而2种食品标签上没有标注过敏原成分的食品检测呈阳性。
- 吉坤美陈家杰詹群珊李佳娜刘志刚
- 关键词：花生过敏原胶体金免疫层析法食物过敏
- 抗鸡蛋清提取物单克隆抗体的制备与鉴定被引量：4
- 2008年
- 目的:制备和鉴定小鼠抗鸡蛋清提取物单克隆抗体。方法:以纯化后的蛋清提取物为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选可特异性分泌抗蛋清提取物McAb的杂交瘤细胞。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定McAb的Ig类与亚类;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定McAb的特异性。结果:获得2株可稳定分泌抗蛋清提取物McAb的的杂交瘤细胞,分别命名为5E12和4F1,其分泌的McAb均为IgG1。Western Blotting分析表明,McAb 4F1所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为44kD。间接ELISA法检测两株McAb5E12、4F1的冻融前后效价分别为1:3000、1:300。结论:成功制备了两株抗蛋清提取物McAb、5E12和4F1,为变应原的提取、纯化及鉴定提供了有效的实验基础。
- 许静傅颖媛刘志刚李佳娜
- 关键词：单克隆抗体
- 双抗体夹心ELISA法测定食物中牛奶过敏原蛋白成分被引量：8
- 2009年
- 建立双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定食物中牛奶过敏原成分。通过提取牛奶过敏原蛋白,免疫小鼠制备抗牛奶过敏原的多抗,免疫印迹法鉴定多抗与牛奶过敏原蛋白的反应,并建立双多抗夹心ELISA法。结果表明,该法检测牛奶过敏原蛋白的最低检出限为25μg/L,标准曲线在25～1000μg/L范围内线性良好;同时对市场上食物标签标注含有牛奶、未含牛奶成分以及标注不详共12种食品进行检测,结果10种食品检测结果与食物标签标注内容相符,而2种标示不详的食品检测结果一个呈现阳性,一个呈现阴性。这说明本方法对于未标注牛奶过敏原成份的食品检测具有一定的实际应用价值。
- 詹政科刘萍吉坤美李佳娜仇什刘志刚
- 关键词：ELISA多克隆抗体食物过敏
