朱海涛
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胆道可吸收支架的体内实验研究被引量：6
- 2011年
- 评价一种可吸收胆道支架在家犬胆肠吻合术中应用的安全性和有效性。将18只急性梗阻性黄疸家犬随机分为实验组和对照组,每组9只。对照组单纯行Roux-en-Y胆肠吻合术;实验组行Roux-en-Y胆肠吻合术,并在胆肠吻合口置入可吸收支架。通过为期3个月的观察,了解支架体内降解特点和组织相容性。结果显示:对照组胆漏发生率明显高于实验组,但组间无显著差异(P>0.05);体外X线摄影发现:体内胆管支架轮廓完整,固定良好;术后对照组较实验组家犬胆肠吻合口直径明显缩窄(P<0.05);支架内无明显胆泥附着。组织学检查显示实验组胆管及十二指肠黏膜未见明显炎症反应和上皮增生。因此,左旋聚乳酸(PLLA)和聚乳酸乙醇酸(PLGA)共混制成的胆道支架具有体内降解周期较长(>3月),组织相容性良好的特点,能有效防止胆肠吻合术后胆漏、胆肠吻合口狭窄的发生。
- 樊超翟超吕毅朱海涛田敏于良
- 关键词：左旋聚乳酸聚乳酸乙醇酸胆管肠吻合术胆道狭窄生物降解
- 猪胰岛细胞分离纯化研究进展被引量：4
- 2012年
- 目的综述猪胰岛细胞分离纯化的常用方法及最新研究进展。方法查阅近年来国内外关于猪胰岛细胞分离纯化的相关文献,进行总结分析。结果分离纯化的效果主要取决于供体的前期筛选、高质量胰腺的获取与有效保存,以及分离纯化方法的选择与改进。结论猪胰岛分离纯化操作的优化与标准化的建立,极大促进了异种胰岛移植研究的发展,有望解决目前移植供体短缺的问题。
- 朱海涛于良王博
- 关键词：胰岛细胞纯化异种移植
- 胆道可吸收支架的体外实验研究被引量：3
- 2009年
- 目的:在我们前期工作基础上,研制出一种降解时间较长的胆道可吸收支架.方法:通过反复调整PLLA和PL-GA材料的合成方法,研制出具有不同降解周期的不透X光胆道支架试件,将其分为A,B,C3个组,置于人新鲜胆汁中,恒温37℃并匀速震荡,每10d为一个观察单位,动态观察支架降解过程中一般性状的变化.结果:PLLA和PLGA(PLA:PGA摩尔比为50:50)以质量比为70:30,90:10共混的方法得到的胆肠支撑支架具有较长的降解周期和良好的力学性能.结论:通过改变PLLA和PLGA的比例和制作工艺可以得到理想的胆道可吸收支架.
- 于良樊超吕毅翟超朱海涛田敏
- 关键词：PLGA胆道狭窄生物降解
- 猪源性CTLA4Ig基因重组腺病毒载体的构建及鉴定
- 2011年
- 目的为进行基因转移阻断T细胞共刺激通路诱导异种胰岛细胞移植免疫耐受的研究,构建携带猪源性CT-LA4Ig融合基因的重组腺病毒载体。方法分离猪外周血单个核细胞,经RT-PCR扩增pCTLA4胞外段基因。将PCR产物克隆入pGH-IgG,阳性克隆以双酶切及测序鉴定。将目的融合基因pCTLA4Ig克隆入腺病毒穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-1,与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183内进行同源重组,重组质粒经酶切线性化转染入293A细胞进行包装。结果构建了携带pCTLA4Ig融合基因的重组腺病毒载体,病毒滴度达1×1013PFU/L。结论成功构建了携带pCTLA4Ig融合基因的重组腺病毒载体,为进一步研究异种胰岛细胞移植排斥反应提供了有力的手段与工具。
- 朱海涛田敏于良吕毅王博
- 关键词：腺病毒基因转移
- 负载pCTLA4-Ig基因的猪未成熟树突状细胞抑制异种脾细胞的增殖被引量：1
- 2010年
- 目的:建立猪外周血来源的未成熟树突状细胞(im-DC)体外诱导、扩增方法。探讨负载猪源性pCTLA4-Ig重组腺病毒的猪imDCs对大鼠脾细胞增殖的影响。方法:家猪外周血单个核细胞(PBMC),以rpGM-CSF(30μg/L)和rpIL-4(20μg/L)体外诱导培养,收集悬浮细胞经电镜、流式细胞仪鉴定。利用Adv-pCTLA4-Ig转染猪imDCs,RT-PCR鉴定。对比转染组与未转染组imDCs刺激SD大鼠脾细胞增殖的能力。结果:获得第4～5天悬浮细胞具有典型的imDCs形态特征,表达猪源性DC的特异性标志SLA-DR、CD172a,而CD80/CD86表达较低。Adv-pCTLA4-Ig转染猪imDCs行RT-PCR出现pCTLA4-Ig、吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)基因的表达。混合淋巴细胞培养转染组与未转染组imDCs刺激指数有显著性差异(P<0.05)。结论:联合应用rpGM-CSF和rpIL-4可诱导猪PBMC衍生成大量的imDCs。负载pCTLA4-Ig基因的猪imDCs,能够表达IDO,降低对异种抗原的免疫应答,显著抑制异种脾细胞增殖。
- 田敏吕毅翟超朱海涛王博于良张晓刚
- 关键词：树突状细胞重组腺病毒CTLA4-IG免疫耐受
- 负载猪源性CTLA4Ig的猪胰岛细胞阻断直接识别途径在异种移植中的作用
- 2011年
- 目的:探讨负载供体源性CTLA4Ig的胰岛细胞通过阻断直接识别途径,诱导异种胰岛细胞抑制免疫耐受的可行性及有效性。方法:使用本实验小组前期构建的携带供体源性(猪)CTLA4-Ig的腺病毒载体(Adv-pCT-LA4-Ig)转染猪胰岛细胞,植入糖尿病大鼠肾包膜下,建立猪-大鼠异种胰岛移植模型,监测移植术后大鼠血糖变化及IL-4、γ-IFN的水平变化,检测移植物中pCTLA4-Ig、猪源性胰岛素(p-Insulin)表达情况。结果:1.大鼠血糖在移植术后即开始明显下降,于第3 d左右降至正常,三组大鼠血糖分别在移植术后6、7、35 d左右开始升高;2.三组大鼠术后胰岛平均存活时间为7.43±1.72 d、7.22±1.72 d、34.50±4.14 d,实验组胰岛细胞存活时间较对照组明显延长(P<0.01);3.细胞因子变化:(1)γ-IFN:对照组在移植术后第1 d开始轻度升高,于第3 d后开始明显升高,第7 d达到高峰,此后缓慢升高;实验组在移植术后第1～28 d波动较小,同术前相比无明显变化,在移植后第28 d开始上升,第35 d开始急剧上升;(2)IL-4:实验组在移植术后第1 d开始下降,第7 d达到谷值;对照组在移植术后第3～5 d轻微上升,在移植后第28 d开始下降至移植术前水平,第35 d开始急剧下降;4.病理学检查:实验组移植物无明显破坏,炎细胞浸润不明显;免疫组化可见大量pCTLA4-Ig、p-Insulin表达。结论:转染供体源性CTLA4-Ig的胰岛细胞通过阻断直接识别途径,可诱导异种胰岛细胞产生较长时间的免疫耐受。
- 翟超于良田敏朱海涛王博
- 关键词：异种移植
- 猪胰岛细胞异种移植治疗糖尿病的研究进展被引量：2
- 2012年
- 猪胰岛细胞移植是一种极具潜力治疗糖尿病的方法.目前仍以实验室研究为主,其临床应用主要面临两大挑战:高质量的活性胰岛短缺与异种免疫排斥反应.近年来随着胰岛分离纯化技术的改进、新型免疫耐受诱导策略的出现及移植技术的发展等,猪胰岛细胞异种移植取得了巨大的进展并进入临床前期研究.本文就猪胰岛移植物的制备、排斥反应与防治措施、移植安全性及临床研究等方面的进展作一综述.
- 朱海涛于良王博
- 关键词：猪胰岛细胞异种移植糖尿病免疫排斥
- 胰岛移植治疗糖尿病的细胞来源研究进展
- 2018年
- 目的综述糖尿病胰岛替代治疗的供体细胞来源及选择的研究进展。方法查阅近年来国内外关于糖尿病胰岛替代治疗及供体细胞来源的相关文献,进行总结分析。结果供体来源短缺仍是胰岛移植(pancreatic islet transplantation,PIT)面临的主要难题。目前,除同种异体/自体供胰外,异种(猪)胰岛、干细胞诱导胰岛及胰岛细胞株制备和应用等方面也取得了重要进展,潜在扩大了可植入细胞来源。结论充足、合适的供体细胞来源是临床广泛开展PIT治疗1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus,T1DM)的前提。社会捐赠体系的完善,免疫耐受诱导、基因与生物工程等技术的发展有望解决供体细胞短缺问题,并为临床细胞替代治疗T1DM奠定了基础。
- 朱海涛朱海涛贺雅毅贺雅毅于良吕毅王博王博
- 关键词：胰岛移植供体1型糖尿病异种移植
