张连峰
- 作品数：232 被引量：837H指数：16
- 供职机构：卫生部更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学航空宇航科学技术更多>>
- 利用dCas9-FokI编辑大鼠Dnmt1基因
- 目的 CRISPR/Cas9的发现为多种生物的基因编辑提供了强有力的工具。然而,该系统在提供靶向性基因修饰的同时,会产生一些不需要的突变,即脱靶现象。为提高CRISPR/Cas9的特异性,我们将野生型FokI核酸内切酶的...
- 张旭于磊陈炜高珊潘硕张连峰马元武
- 关键词：DNMT1
- MKP1基因对小鼠造血干细胞功能的影响
- 2009年
- 目的通过构建MKP1转基因小鼠模型,研究MKP1基因对造血干细胞自我更新能力的影响。方法运用显微注射法建立MKP1转基因小鼠;PCR和RT-PCR检测MKP1基因在转基因小鼠的表达水平;流式细胞术测定小鼠骨髓干细胞和外周血单个核细胞的比例;通过竞争性骨髓移植实验检测MKP1转基因小鼠骨髓干细胞的功能。结果建立了MKP1转基因小鼠;MKP1转基因小鼠骨髓干细胞数量减少;竞争性骨髓移植实验显示MKP1转基因骨髓干细胞来源的外周血细胞总数、B细胞、粒细胞显著减少(P<0.001),提示MKP1转基因小鼠骨髓干细胞的功能下降。结论在MKP1转基因小鼠模型中,MKP1基因的过表达影响了小鼠的骨髓干细胞的功能。
- 刘红霞李万波全雄志张连峰鞠振宇
- 关键词：转基因小鼠干细胞丝裂原活化蛋白激酶
- 人肠道病毒71型动物模型研究进展被引量：7
- 2010年
- 人肠道病毒71型是婴幼儿手足口病的致病原之一,其严重的并发症可导致神经系统疾病,甚至死亡,是近期威胁中国儿童健康的因素之一。目前尚无临床疫苗可以预防该病毒感染,而EV71的动物模型是进行致病机理、疫苗评价和药物等研究的基础。本文对EV71的两种常用动物模型:小鼠和猕猴(Macaca mulatta)模型进行了描述,并对其在研究中的应用给与概括,为研究者选择合适的动物模型提供了依据。
- 刘江宁张连峰
- 关键词：人肠道病毒71型手足口病
- 人载脂蛋白C3基因转基因小鼠的建立及血脂变化分析被引量：1
- 2012年
- 目的制备系统性表达人载脂蛋白C3(APOC3)基因的转基因小鼠,建立高血脂小鼠模型。方法将人APOC3基因插入系统性表达启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立人APOC3转基因C57BL/6J小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测基因表达水平,血生化分析检测不同月龄转基因小鼠与同龄野生型小鼠的血脂指标,脂肪染色观察肝脏脂肪水平。结果建立了高表达人APOC3基因的转基因小鼠品系;转入的人APOC3基因在血液、肝脏、小肠、肌肉、心脏、肾脏、脾脏中均有明显表达;不同月龄转基因小鼠的血浆甘油三酯水平明显高于同龄野生型小鼠;转基因小鼠的肝脏脂肪含量高于野生型小鼠。结论系统性表达人APOC3基因的转基因小鼠表现高脂血症表型,可以作为高血脂以及高血脂相关的心血管病的工具动物。
- 全雄志高翔张旭葛文萍关菲菲董伟张连峰
- 关键词：转基因小鼠甘油三酯高脂血症
- 心肌α-MHC启动子驱动的人KIAA0174基因转基因小鼠的建立
- 2009年
- 目的:建立心肌高表达人KIAA0174基因转基因小鼠,研究该基因在心肌表达水平的变化对动物的影响,探索该基因的功能。方法:RT-PCR法克隆人KIAA0174基因,把该基因插入心肌α肌球蛋白重链启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立心肌高表达人KIAA0174基因转基因C57BL/6J小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测基因表达水平。测定小鼠的心率、收缩压,以及扩张压的平均值。结果:建立了3个心肌高表达人KIAA0174基因转基因小鼠系。血压检测结果显示转基因小鼠的收缩压和扩张压均显著高于对照组。结论:成功建立了心肌α肌球蛋白重链启动子驱动的心肌高表达人KIAA0174基因转基因小鼠,为进一步探索KIAA0174基因的功能奠定了基础。
- 宋铭晶陈炜施海霞梁虹潘思丹张连峰
- 关键词：转基因小鼠
- 一个灵长类种属特异基因--XAGE-3转基因
- 2010年
- 目的分析XAGE-3基因在灵长类和啮齿类动物的基因组中的同源性,通过转基因研究XAGE-3基因在小鼠中的功能及生物学意义。方法根据Homologene及Taxplot数据库,通过Blast比对方法分析XAGE-3在两类动物基因组中的同源性;从人胎盘组织克隆XAGE-3基因,转入真核表达载体pCDNA3.1(+),显微注射方法得到转基因动物,基因组PCR鉴定基因型,反转录PCR分析基因的表达;Brdu标记3周龄动物显示睾丸内细胞的增殖。结果XAGE-3在人、黑猩猩和猕猴中存在高度同源基因,而在小鼠和大鼠中无同源区域;在基因型鉴定阳性的5个首建系中3个品系睾丸组织目的基因表达较高,在传代的两个品系中,在小肠,胸腺,睾丸等组织中目的基因均有表达;睾丸组织Brdu标记显示XAGE-3转基因动物有更多的发育晚期的精细胞被标记。结论XAGE-3作为灵长类种属特有基因在转基因小鼠中影响了精细胞发育。
- 向志光陈炜全雄志董伟曹兴水高珊张晓娟张海涛张连峰
- 关键词：转基因
- 三硝基甲苯中毒性白内障的实验动物研究被引量：2
- 1994年
- 大鼠皮下注射２０％ＴＮＴ甘油悬液８个月后晶状体开始出现混浊，１０个月白内障发病率２４．６％，服用中药合剂ＣＢ组大鼠其发生率仅４．１％，差异显著（Ｐ＜０．０５）．白内障大鼠晶状体可溶性蛋白质含量下降明显， Ｈ及 晶体蛋白含量降低， 晶体蛋白相对升高。中药合剂ＣＢ能升高ＧＳＨ－Ｐｘ、ＧＳＨ－Ｓ及ＳＯＤ酶活性，抑制脂类过氧化、阻止Ｎｐ－ＳＨ含量下降，从而起到防治白内障作用。
- 王克维张连峰蔡有余
- 关键词：白内障三硝基甲苯TNT实验动物中毒
- 阿茨海默氏病与自身免疫被引量：1
- 1996年
- 阿茨海默氏病与自身免疫冯颖，张连峰，蔡有余（中国医学科学院，中国协和国科大学实验动物研究所，北京）阿茨海默氏病（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓ ｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）是一种渐进性脑退行性疾患，主要特征是患者智力、记忆力、感觉、定向能力、推理和判断力都产生不可...
- 冯颖张连峰蔡有余
- 关键词：自身免疫病理学改变胆碱能神经元退行性渐进性判断力
- 机体的免疫状态与肿瘤被引量：2
- 1996年
- 机体的免疫状态与肿瘤刘雪丰，张连峰，蔡有余（中国医学科学院，中国协和医科大学实验动物研究所，北京）肿瘤是一类多因素多环节性疾病，其发生与机体的免疫状态虽然没有必然的直接因果关系，但肿瘤的发展却与机体的免疫状态密切相关。一方面，肿瘤细胞有弱的免疫原性（...
- 刘雪丰张连峰蔡有余
- 关键词：肿瘤抗原免疫状态机体免疫原性免疫抑制因子性疾病
- PiggyBac转座酶转基因小鼠模型的建立被引量：4
- 2012年
- 目的建立表达PiggyBac转座酶转基因小鼠模型,为研究PiggyBac转座子介导基因修饰在小鼠中的应用提供工具。方法利用Cytomegalovirus(CMV)启动子驱动PiggyBac转座酶基因的表达,经显微注射法建立C57BL/6J表达PiggyBac转座酶的转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,RT-PCR检测PiggyBac转座酶在小鼠生殖系睾丸中的表达情况。PiggyBac转座酶转基因小鼠活性的检测,是通过与转座子供体转基因小鼠杂交检测供体位置变化来确定的。结果显微注射产生7只转基因小鼠并能传代,经RT-PCR筛选出一株在睾丸中相对高表达PiggyBac转座酶的转基因小鼠。随后与转座子供体转基因小鼠杂交,子代双阳小鼠与野生型小鼠杂交基因型分离,产生的子代转座子供体单阳性小鼠中具有转座子供体片段的转座反应。结论成功建立了表达Piggy-Bac转座酶转基因小鼠动物模型,该模型为PiggyBac转座子技术在小鼠中的应用提供了有价值的工具动物。
- 马元武王冬梅廉虹王贵利张连峰
- 关键词：PIGGYBAC转座酶转基因小鼠
