张建军
- 作品数:28 被引量:60H指数:5
- 供职机构:天津市第四中心医院更多>>
- 发文基金:天津市自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 高压氧联合NgR基因沉默骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤被引量:5
- 2022年
- 背景:高压氧治疗和Nogo-A/NgR-RhoA/ROCK信号通路的抑制有助于移植细胞的增殖、分化。目的:探讨高压氧联合携带miRNA沉默NgR基因的大鼠骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤修复的影响。方法:靶向NgR的miRNA重组质粒转染大鼠骨髓间充质干细胞,RT-qPCR和Western blot检测转染后NgR的表达。80只SD大鼠,随机选取15只大鼠作为假手术组,其余65只大鼠构建脊髓损伤模型,将造模成功的60只大鼠随机分为脊髓损伤组、高压氧组、骨髓间充质干细胞组和高压氧+骨髓间充质干细胞组。骨髓间充质干细胞组和高压氧+骨髓间充质干细胞组于造模24 h后注射5×106个转染重组质粒的大鼠骨髓间充质干细胞(5μL),脊髓损伤组和高压氧组注射等体积的PBS,随后高压氧组和高压氧+骨髓间充质干细胞组接受连续7 d高压氧治疗。细胞移植后采用BBB评分评估大鼠后肢运动功能,每周1次,连续4周;造模后第4周,检测感觉诱发电位评估神经传导恢复情况,苏木精-伊红染色、TUNEL染色和荧光金逆行追踪观察脊髓组织损伤、细胞凋亡以及轴突再生情况。高压氧治疗后随即对损伤区脊髓组织中Nogo-A、NgR、RhoA、ROCK-1、Lingo-1、p75NTRmRNA相对表达进行RT-qPCR检测。结果与结论:①骨髓间充质干细胞转染后NgR表达明显下降;②造模后2-4周BBB评分:高压氧+骨髓间充质干细胞组>骨髓间充质干细胞组、高压氧组>脊髓损伤组(P<0.05);③与其他治疗组相比,高压氧+骨髓间充质干细胞组感觉诱发电位的潜伏期缩短,波幅升高(P<0.05);骨髓间充质干细胞组与高压氧组差异无显著性意义(P>0.05);④与脊髓损伤组比较,高压氧组和骨髓间充质干细胞组的神经元数量有所增加,具有轴浆运输能力的轴突数量也明显增多,神经元再生效果明显,凋亡细胞减少,而高压氧+骨髓间充质干细胞组的修复效果优于其他2个治疗组;⑤与脊髓损伤组相比,3个治�
- 梅运运张建军王东
- 关键词:干细胞NGR高压氧脊髓损伤电生理
- 脑出血免疫抑制大鼠模型的构建及评估被引量:4
- 2016年
- 背景:研究表明,大鼠脑出血后经治疗可以有效抑制其免疫功能。已有文献研究对缺血性脑卒中后免疫抑制现象进行详细研究,但脑出血后机体免疫功能研究鲜见报道。目的:构建脑出血后免疫抑制大鼠模型并进行稳定性评估。方法:将60只Wistar大鼠随机分为3组,即对照组、假手术组、脑出血组,每组20只。采用自身动脉血50μL注入大鼠基底节方法建造急性脑出血模型;假手术模型注入50μL生理盐水,手术过程同脑出血模型;对照组不做任何处理。分别于造模后24,48,72,96 h用血液分析仪检测白细胞、淋巴细胞、淋巴细胞百分数;采用ELISA测定大鼠血清中促炎细胞因子白细胞介素6和抗炎细胞因子转化生长因子β的水平;剖取大鼠脾组织进行组织学及病理学检查;通过RT-PCR及Western blotting检测转化生长因子β、白细胞介素6基因和蛋白在脾组织中的表达变化。结果与结论:(1)与假手术组及对照组相比,脑出血组大鼠于造模后24,48,72,96 h白细胞数明显升高,淋巴细胞百分数逐渐降低,差异有显著性意义(P<0.05);(2)与假手术组及对照组相比,脑出血组大鼠血液、脾的白细胞介素6在24 h时高表达,72 h达高峰,96 h时表达降低,差异有显著性意义(P<0.05);(3)与假手术组及对照组相比,脑出血组大鼠血液、脾的转化生长因子β于24 h时低表达,72 h逐渐升高,96 h时高表达,差异有显著性意义(P<0.05);(4)结果提示,大鼠在脑出血后先呈现免疫功能亢奋,随即96 h后出现免疫功能抑制,说明脑出血后免疫抑制大鼠模型造模成功,并具有良好的稳定性。
- 张建军史焕昌
- 关键词:实验动物急性期免疫功能
- 微创手术治疗高血压脑出血患者的临床研究进展被引量:5
- 2020年
- 脑出血是高血压患者常见的并发症,具有较高的病死率和致残率。近年来,随着临床医学水平的提升,微创手术成为高血压脑出血患者的重要治疗方法。与传统开颅血肿清除术相比,微创手术具有创伤小、出血量少、恢复快等优势,可快速缓解患者的颅内压,最大限度清除血肿,提高患者的生存率和预后生命质量。该研究主要探讨微创手术治疗高血压脑出血患者的临床研究进展。
- 李树良张建军王东
- 关键词:高血压脑出血微创手术适应证
- 高压氧对大鼠脊髓损伤区水肿及凋亡的影响被引量:2
- 2020年
- 目的研究高压氧(HBO)干预对大鼠脊髓损伤(SCI)区水肿及凋亡的影响。方法选取成年雌性SD大鼠60只,随机分为假手术组、SCI组和HBO组各20只,造模后7d,通过TUNEL法检测神经细胞的凋亡情况,以RT-PCR、Westernblot法检测SCI区MMP9/2基因和蛋白的表达。通过HE染色观察SCI区病理组织形态学变化及水肿情况。结果造模后7d,假手术组凋亡细胞数为(6.03±2.34),HBO组凋亡细胞数为(37.94±4.72),均明显低于SCI组的(58.47±5.98);MMP9/2基因表达水平,假手术组分别为[(0.55±0.09),(1.03±0.15)],HBO组为[(1.02±0.16),(1.65±0.28],均明显低于SCI组的[(1.82±0.35),(2.35±0.46)];MMP9/2蛋白表达水平,假手术组分别为[(0.86±0.16),(1.13±0.24)],HBO组为[(1.22±0.22),(1.76±0.34)],均明显低于SCI组的[(1.98±0.37),(2.52±0.64)],差异均有统计学意义(P<0.05)。假手术组大鼠脊髓SCI区未见脊髓水肿。SCI组大鼠SCI区组织水肿明显,HBO组大鼠SCI区组织水肿程度减轻。结论HBO治疗通过减少大鼠SCI区神经细胞的凋亡和减轻SCI区水肿,对脊髓损伤起到了保护作用。
- 周江波张建军王东
- 关键词:脊髓损伤高压氧神经再生
- NgR基因沉默细胞-PLGA移植对脊髓损伤大鼠后肢功能的影响被引量:1
- 2012年
- 目的观察NgR基因沉默细胞-PLGA共移植对脊髓损伤大鼠后肢功能修复的作用。方法健康成年雌性Wistar大鼠72只,建立脊髓T9半横断损伤模型。随机分为单纯支架组(A组)、骨髓间充质干细胞+施旺细胞+聚乳酸-乙醇酸(PLGA)组(B组)、NgR基因沉默细胞+PLGA组(C组),每组24只。于脊髓缺损处分别植入对应的复合物。造模后1、2、4、6、8周行运动功能检测,4周后行HE染色及免疫荧光观察PKH-26标记的骨髓间充质干细胞的存活和分布情况。结果斜板实验和改良BBB评分结果提示,下肢运动功能评价B组优于A组(P<0.01),C组优于B组(P<0.05);A、B、C组PKH-26阳性细胞数分别为0、(34.43±9.78)、(69.58±8.15)个/高倍视,3组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 NgR基因沉默细胞-PLGA共移植能够明显促进脊髓半横断损伤大鼠的脊髓轴突再生,并改善肢体的运动功能。
- 王东张建军杨卫山庄映辉
- 关键词:脊髓损伤骨髓间充质干细胞
- 人端粒酶反转录酶基因修饰脐带间充质干细胞移植治疗急性肾损伤
- 2015年
- 背景:人端粒酶反转录酶(hTERT)是调控增殖及定向分化的首选生长因子之一,具有多重生物学效应,为建立基因工程的永生化干细胞系奠定了基础。目的:探讨人端粒酶反转录酶基因修饰脐带间充质干细胞移植对大鼠缺血再灌注诱导的急性肾损伤的治疗作用。方法:体外培养人脐带间充质干细胞,构建缺血再灌注诱导的大鼠急性肾损伤模型,建模后将大鼠随机分为3组:对照组尾静脉注射1 mL L-DMEM培养液;空载病毒组:尾静脉注射1 m L经空载病毒转染人脐带间充质干细胞悬液;hT ERT转染组尾静脉注射1 mL经PLXSN-hT ERT转染的人脐带间充质干细胞悬液。结果与结论:移植后第3,28天苏木精-伊红染色检查示hT ERT转染组的肾小管损伤评分<空载病毒组<对照组(P<0.05)。移植后第28天,CM-Dil阳性细胞数为hT ERT转染组>空载病毒组>对照组(P<0.05)。移植细胞后第1,3,14,28天血肌酐、尿素氮水平均为hT ERT转染组<空载病毒组<对照组(P<0.05)。结果证实,hT ERT基因修饰脐带间充质干细胞移植对大鼠急性肾损伤具有明显的修复作用。
- 王天生张建军
- 关键词:干细胞脐带间充质干细胞肾损伤人端粒酶反转录酶基因修饰急性肾损伤端粒酶反转录酶
- 兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞诱导分化的不同培养方法被引量:1
- 2014年
- 背景:目前传统骨髓间充质干细胞的培养方法是应用异种血清为培养基,但其存在种间疾病传播、潜在免疫排斥反应甚至是伦理学争议等问题;且与卫生部公布的《组织工程化组织移植治疗技术管理规范》的要求相违背。自体富血小板血浆是生物自体的全血提取物,内含多种且含量丰富的生长因子。目的:使用自体富血小板血浆替代传统异种血清,探讨其对兔骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞的影响,方法:从兔髂后上棘穿刺抽出8 mL骨髓并加肝素抗凝,密度梯度离心富集骨髓间充质干细胞,分为自体富血小板血浆组、胎牛血清组,分别加入含10%自体富血小板血浆、体积分数10%胎牛血清。在传至4代时将自体富血小板血浆组和胎牛血清组细胞各自分为实验组和对照组,实验组对培养及成分进行改变;对照组培养基不变。通过生长曲线测定各代细胞的增殖情况;通过对各组细胞进行碱性磷酸酶活性测定,判断其成骨分化状况。结果与结论:骨髓间充质干细胞生长曲线可见各代细胞增殖良好。对第4代各组细胞进行碱性磷酸酶活性检测,培养第12天,第4代自体富血小板血浆实验组及胎牛血清实验组的碱性磷酸酶活性均显著高于其相应对照组;自体富血小板血浆组对照组、实验组碱性磷酸酶活性显著高于胎牛血清组的对照组、实验组,差异有显著性意义(P<0.01)。提示使用自体富血小板血浆替代异种血清培养骨髓间充质干细胞是一种安全可靠、操作简单、纯度活性高的诱导骨髓间充质干细胞的成骨分化方法。
- 王辉张建军
- 关键词:干细胞骨髓干细胞自体富血小板血浆骨髓间充质干细胞胎牛血清
- 骨髓间充质干细胞NgR基因沉默静脉移植治疗大鼠脑损伤
- 2010年
- 目的:探讨沉默NgR基因的方法对骨髓间充质干细胞(BMSC)静脉移植治疗大鼠脑损伤效果的影响。方法:体外培养BMSC,经小分子干扰RNA(siRNA)转染以沉默NgR基因表达,用Westernblot法检测BMSC在转染前后NgR基因蛋白的表达。60只SD大鼠制成大鼠重型液压颅脑损伤模型,随机分为3组。A组20只给予NgR基因沉默的BMSC;B组20只给予等量的BMSC悬液;C组20只注射等量的不含干细胞的培养液。对各组静脉移植分别于处理后1d、3d、伤后1周及2周行Bederson评分并评价大鼠神经功能的损伤情况,2周后处死行NF、BrdU免疫组化和HE染色。结果:转染siRNA后,A、B组NgR基因蛋白表达量较C组明显降低,移植后1周大鼠神经学缺损评分A组B组>C组(均P<0.05),BrdU阳性细胞数A组>B组(P<0.05),C组中未检出。结论:BMSC的沉默NgR基因静脉移植治疗大鼠脑损伤可明显改善大鼠的神经学功能。
- 王东张建军庄映辉
- 关键词:脑损伤间质干细胞基因沉默NGR
- 神经内镜治疗脑积水患者的研究进展被引量:1
- 2020年
- 随着医学技术的发展,神经内镜治疗取得了阶段性的成功。目前,神经内镜在脑积水患者的治疗中起到了十分重要的作用。临床上常用的神经内镜技术为神经内镜下第三脑室底造瘘术、中脑导水管成形术及囊肿造瘘术。该研究就应用神经内镜治疗脑积水患者的研究进展展开了论述,旨在为该领域的研究提供参考。
- 周江波张建军
- 关键词:神经内镜神经外科手术脑积水
- 高压氧对脊髓损伤后凋亡相关基因影响的研究进展
- 2017年
- 脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)可以分为原发性的损伤与继发性损伤两大类。目前SCI的治疗方法可以有很多种,如手术治疗、高压氧治疗、基因治疗及药物治疗等。其中,高压氧治疗方式在临床中的应用已有较长的历史,也取得了一些可喜的成就;同时,高压氧可以使SCI引起的神经细胞出现凋亡这一过程发生逆转。作者主要论述高压氧对SCI后凋亡相关基因影响的研究进展。
- 张建军王东
- 关键词:脊髓损伤高压氧凋亡基因