幸定坤
- 作品数：7 被引量：33H指数：3
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：江苏省青年科技基金江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 粟酒裂殖酵母质膜ATP酶的制备及活性测定被引量：2
- 1999年
- 用小玻璃珠破碎处于对数生长中期的粟酒裂殖酵母（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｐｏｍｂｅ）细胞，将所得到的匀浆液经差速离心，酸处理，不连续蔗糖密度梯度离心，得到质膜ＡＴＰ酶，并对其进行鉴定及活性测定．发现所制备的质膜ＡＴＰ酶对ＮａＮ３不敏感，而对Ｎａ３ＶＯ４具有高度的敏感性，半抑制浓度为１２μｍｏｌ／Ｌ，表明所制备的质膜ＡＴＰ酶较纯，不混杂线粒体ＡＴＰ酶．该酶的最适ｐＨ为６．３，对Ｍｇ２＋有很强的依赖性，对ＡＴＰ有较强的亲和性，Ｋｍ值为１．３ｍｍｏｌ／Ｌ．
- 林玲袁生幸定坤陆玲张如海
- 关键词：粟酒裂殖酵母质膜ATP酶活性酿酒酵母
- 水霉(Saprolegnia ferax)顶端生长菌丝细胞壁Ca<'2+>性质及其调节顶端生长的机制
- Ca<'2+>在菌丝顶端生长的调节过程中起重要作用.研究顶端生长中菌丝胞壁Ca<'2+>的性质有助于阐明Ca<'2+>对顶端生长调节作用的机制.但真菌细胞壁Ca<'2+>的性南目前尚没有详细报道.该文以水霉(Saprol...
- 幸定坤
- 关键词：水霉细胞壁
- 文献传递
- 轮梗霉原生质体的制备被引量：12
- 2001年
- 本文比较了酶浓度、菌龄、渗透压稳定剂以及酶解温度和时间等因素对轮梗霉原生质体得率的影响。结果基本获得了制备原生质体的适宜条件:用0.6mol/L甘露醇稳渗剂配制成的4%纤维素酶和0.5%蜗牛酶混合酶,35℃酶解培养了30h的菌丝1.0h,即可得到较高产量的原生质体。对该原生质体进行了再生实验,其再生率约为23.8%。
- 董宏平袁生徐旭士幸定坤
- 关键词：原生质体EPA多不饱和脂肪酸
- 菌种储藏对一株头孢霉菌产DHA的影响被引量：3
- 2000年
- 将一株头孢霉菌 (Cep halosporium.sp.)斜面菌种分别在 2 0 ,4和 - 2 0℃三种温度存放 0～ 2 5d,将菌种分别经活化和不活化后转接入液体 PDA 培养基中发酵 ,发现 DHA(Docosahexaenoic acid,2 2∶ 6 )产量和储藏时间、储藏温度、发酵前菌种是否转接活化有关系 .在- 2 0℃储藏的菌种 ,DHA最高产量可达 2 7.86 mg/ L ,此时每克干菌丝中 DHA含量为 4 .2 6 mg,生物量为 6 .54g/ L;在 4℃储藏的菌种 ,其 DHA产量最高可达 2 4 .58mg/ L,此时每克干菌丝中DHA含量为 3.77mg,生物量为 6 .52 g/ L;在 2 0℃储藏的菌种 ,其 DHA产量达到最大 ,为 6 6 .91mg/ L ,每克干菌丝中 DHA可达 10 .57mg,生物量达 6 .33g/ L .
- 戴传超袁生幸定坤刘吉华李霞
- 关键词：DHA发酵二十二碳六烯酸
- Ca^(2+)、CaM及CaM拮抗剂对粟酒裂殖酵母质膜H^+-ATP酶活性的影响
- 2006年
- 经差速离心,酸处理,蔗糖密度梯度离心制备粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pom be)质膜H+-ATP酶,以研究Ca2+、CaM以及CaM拮抗剂对纯化的质膜H+-ATP酶活性的影响.结果表明Ca2+强烈的抑制该酶的活性,而CaM对该酶的活性没有影响,但TFP与Compound R24571这两类CaM拮抗剂又都能强烈地抑制该酶的活性.推测TFP等抑制该酶的活性不是通过与CaM结合作为CaM的拮抗剂竞争性抑制该酶的活性,而是直接对该酶发生作用或者通过磷脂或其它的CaM依赖性的膜蛋白间接对该酶产生作用.
- 林玲袁生陆玲幸定坤戴传超
- 关键词：CA^2+CAM
- 缓冲液条件对水霉细胞壁结合Ca^(2+)的影响
- 2000年
- 用原子吸收光谱研究了pH值、Tris 马来酸缓冲液浓度对水霉 (Saprolegniaferax)顶端生长菌丝细胞壁与Ca2 + 结合的影响 .发现在 pH 3.5～ 6 .0范围内 ,细胞壁结合的Ca2 + 随 pH值升高而增加 ,pH >6 .0时 ,细胞壁结合的Ca2 + 呈下降趋势 .细胞壁结合的Ca2 + 随Tris 马来酸缓冲液浓度升高而增加 ,Tris浓度高于 9mmol/L时 ,细胞壁结合的Ca2 + 则减少 .细胞壁最多可结合Ca2 + 量>6 0 μmol/L .证明细胞壁Ca2 + 确实是水霉顶端生长赖以维持的胞外Ca2 + 库 .
- 幸定坤袁生陆玲戴传超林玲
- 关键词：水霉细胞壁原子吸收光谱钙离子缓冲液
- 培养条件对头孢霉菌丝体脂肪酸组分的影响被引量：18
- 2001年
- 研究了头孢霉 (Cephalosporiumsp .)菌丝体最大生产力和多不饱和脂肪酸形成积累的条件。菌丝体最适培养条件为 :麦芽糖 60 g/L、KNO33g/L、起始 pH为 6 0、50 0mL三角瓶装 1 0 0mL培养基、接种 2 5%、2 5℃培养 1 0d则菌丝体达到最大干重。多不饱和脂肪酸形成积累的最适条件为 :葡萄糖 1 0～ 2 0 g/L、(NH4) 2 SO4或NH4Cl 3g/L、培养基起始 pH为 4 0、50 0mL三角瓶装 1 0 0mL培养基、接种 1 0 %～ 2 0 %、1 0℃下照光培养。因此 ,在整个生产流程中可采用不同条件分段掌握的技术原则。同时提出在多不饱和脂肪酸的形成和积累途径中油酸 (1 8∶1 )向亚油酸 (1 8∶2 )的转化是关键 ,为进一步探索最适培养条件和关键酶的调节提供依据。
- 戴传超袁生李霞刘吉华幸定坤陆玲
- 关键词：头孢霉菌丝体脂肪酸多不饱和脂肪酸
