宣俊文
- 作品数：15 被引量：16H指数：3
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：甘肃省科技重大专项计划“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 易致污染的支原体在固体培养基上的形态特征被引量：3
- 2015年
- 目的：研究不同条件下、不同生长期易致污染的支原体在固体培养基中的形态特征。方法通过改变支原体菌体浓度、培养时间及培养基组成，观察支原体在固体培养基中的形态变化。结果支原体菌体浓度小于103 cfu／mL时，培养至2～3天后可在固体培养基中形成典型的“油煎蛋”状形态，以蔗糖作为碳源培养支原体会导致葡萄糖发酵型支原体（肺炎支原体）不能在固体培养基中形成典型菌落，当使用牛血清代替马血清为支原体提供外源胆固醇时，猪鼻支原体在固体培养基中不能形成典型菌落。结论支原体的不同生长期、菌体浓度、培养基的组成都会使易致污染的支原体在固体培养基上的形态发生变化。
- 傅元欣魏然宣俊文于佳王轶峰姜宝芹刘晓凡
- 关键词：肺炎支原体固体培养基
- 应用快速贮存试验测定人白细胞干扰素的稳定性
- 1995年
- 杨金波陈冬星张宏李克寒宣俊文
- 关键词：人白细胞干扰素稳定性药品检验
- 霍乱灭活口服疫苗效力的测定方法及检测试剂盒
- 本发明公开一种用于检测霍乱灭活口服疫苗效力的检测方法，和这种检测方法使用的检测试剂盒。本发明的方法是分别从霍乱弧菌O1菌群和O139菌型提取脂多糖，以O1菌群和O139菌群的脂多糖为抗原，或者以抗O1LPS、O139LP...
- 李生迪陈翠萍朱卫华宣俊文王永谦
- 文献传递
- VITEK 2 Compact微生物检测系统在生物制剂无菌环境监测中的应用被引量：4
- 2015年
- 目的通过收集生物制剂生产中洁净间环境微生物、微生物限度检测样品,应用全自动微生物检测系统(VITEK 2 Compact)进行监测分析,评价其适用性。方法利用革兰染色法和VITEK 2 Compact系统对4种标准菌株和291个纯菌鉴定样本进行方法学验证;对人员及设备表面微生物、沉降菌及微生物限度样本共313个进行菌型鉴定,确认此系统在生物制剂生产中的应用价值。结果共在收集的313个样本中,共检出微生物268株,其中人员及设备表面微生物18株、沉降菌188株、微生物限度62株。可信度均在93%以上。其中革兰阳性菌:藤黄/里拉微球菌46次,库克菌属35次,葡萄球菌属70次;阴性菌:少动鞘氨醇单胞菌38次,鲁氏不动杆菌7次。结论 VITEK 2 Compact微生物检测系统具有高度特异性、敏感性和重复性,并具有操作简便、检测速度快等优点,可广泛应用于医院及疾控中心,尤其对无菌生产环境中微生物的质控和微生物数据库的建立具有重要意义。
- 房世娣赵小洁刘晓凡宣俊文钱秋娟马军兰魏然
- 关键词：VITEKCOMPACT生物制剂细菌鉴定
- 肝源性肝细胞再生刺激因子(HSS)的制备及鉴定
- 1998年
- 本文采用新鲜乳牛肝脏作为原料。经酸处理、超滤、分离得到肝源性肝细胞再生刺激因子（ＨＳＳ）。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得ＨＳＳ的蛋白质分子量为１２，０００～１５，０００Ｄａ。经动物试验和生物学活性鉴定，表明本法制备的ＨＳＳ符合《中国生物制品规程》（１９９５版）的有关要求，且工艺简便。
- 张宏吴兵李玉如宣俊文阮峰王祖森
- 工程菌种子制备方法对rEPA表达量影响的研究
- 2006年
- 由重组E.colirPE553D所表达的基因缺失突变脱毒的重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA),目前大量以载体蛋白用于多种细菌多糖蛋白结合疫苗研究。rEPA的表达量受众多因素的影响,种子的制备方式就是重要因素之一。本文用长期冷冻保存的和新鲜提取的质粒分别转化宿主菌E.coliBL21(λDE3)后制备种子,并将它们和冻干保存的E.colirPE553D在相同条件下培养和诱导,经SDS-PAGE分析表明长期保存的质粒转化宿主后的重组工程菌生长速度较慢,但rEPA的表达量和新鲜质粒转化制备的工程菌基本相同,而冻干保存的工程菌E.colirPE553D几乎丧失了表达rEPA的能力。
- 王永谦赵志强宣俊文谢贵林王燕杜琳
- 关键词：表达量工程菌
- 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因的克隆及其高效表达被引量：1
- 2008年
- 目的克隆幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)基因,构建原核表达载体,并进行高效表达。方法以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增UreB基因,双酶切后,与质粒pET-22b(+)连接,构建表达载体pET-22b(+)/UreB,分别转化E.coliBL21(DE3)、Origam(iDE3)和Rossetta(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果经酶切及测序,证明幽门螺杆菌UreB基因的原核表达载体构建正确。3种重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,均可见相对分子质量为64000的目的蛋白条带,Rossetta(DE3)重组菌目的蛋白表达量最高,约占菌体蛋白的35%。Western blot结果表明,表达的目的蛋白具有良好的反应原性。结论已成功克隆了幽门螺杆菌UreB基因,并在大肠杆菌Rossetta(DE3)中获得了高效表达。
- 朱卫华李生迪宣俊文陈翠萍
- 关键词：幽门螺杆菌尿素酶B亚单位克隆原核表达
- 炭末明胶改良安瓿法应用研究
- 2008年
- 为了证实炭末明胶改良安瓿管法替代其他方法检测细菌是否产明胶酶,实验中采用营养明胶法、X线胶片法和炭末明胶改良安瓿管法对486株质控菌株、临床分离菌株进行明胶液化试验。结果显示,以营养明胶法培养的359株呈阳性反应,X线胶片法274株呈阳性反应,炭末明胶改良安瓿法423株呈阳性反应。营养明胶法明胶液化平均天数为3.3d,而炭末明胶改良安瓿法明胶液化平均天数仅为1.5d。炭末明胶改良安瓿法由于简单快捷,易于观察,而且试剂用量小、能够室温长期保存,该方法值得推广应用。
- 刘刚魏莲花宣俊文邹凤梅
- 关键词：菌株细菌检测
- b型流感嗜血杆菌结合物纯化过程不同部分的生化及免疫学特性被引量：3
- 2006年
- 目的分析Hib结合物纯化过程不同部分的生化及免疫学特性。方法制备的Hib结合物经SepharoseCL4B层析柱纯化,从中选5个不同位点取样,检测其生化特性及免疫原性。结果1、2和3部分多糖蛋白质比例在0.4左右,高分子结合物含量均在80%以上,经高压液相分析,这3部分的相对分子质量均在1400000以上,免疫小鼠后均能产生较好的免疫应答。第4部分高分子结合物含量在70%左右,相对分子质量约在670000,免疫小鼠后也能产生较好的免疫应答。第5部分高分子结合物含量为23.7%,相对分子质量在50000左右,基本是以游离状态存在的多糖和载体蛋白,免疫小鼠后仅能产生很低的免疫应答。结论1、2和3部分是Hib结合物纯化中需收集的部分,第4部分虽也以结合状态存在,但相对分子质量相对较低,第5部分主要是游离的多糖和蛋白质。
- 杜琳谭小梅宣俊文蒋奕刘月萍谢贵林
- 关键词：B型流感嗜血杆菌结合物生化特性免疫学特性
- 痢疾结合疫苗LPS制备条件的优化研究
- 2010年
- 通过对痢疾杆菌LPS提取过程中主要制备环节的优化和改进,确立最佳提取条件和纯化过程,并应用优化后的工艺路线分别制备八批次福氏2 a痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌LPS;福氏2 a痢疾杆菌LPS批平均产量为1.633g,宋内氏痢疾杆菌LPS批产量平均为1.251g,批产量相对稳定,平均产量比优化改进前提高20%以上。LPS经过酸水解、柱层析纯化获得目标O-SP,福氏2 a痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌O-SP的得率分别为20%和28%。检测结果证明,LPS和O-SP各项指标均符合规程(草案)相关要求。实验为今后痢疾结合疫苗大规模制备工艺的改进和提高打下了基础。
- 宣俊文董勇前王晶赵庆萱赵志强谢贵林
- 关键词：结合疫苗福氏2A痢疾杆菌
