孙毅
- 作品数：7 被引量：29H指数：2
- 供职机构：同济大学附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- AEP小分子抑制剂compound#11对小鼠脊髓损伤的修复作用
- 2018年
- 目的研究天冬酰胺内肽酶(asparagine endopeptidase,AEP)小分子抑制剂compound#11对小鼠脊髓损伤的修复作用。方法采用改造动脉夹制作小鼠脊髓损伤钳夹模型。28只健康雌性C57BL/6小鼠随机分为compound#11干预组、丙戊酸(valproic acid,VPA)干预组、生理盐水对照组、假手术组,每组7只。术后7、14、21、28 d,对各组小鼠进行BM S评分、Rotarod检测,评价小鼠后肢运动功能。通过H-E染色和免疫荧光染色观察各组小鼠脊髓组织的病理变化。采用运动诱发电位评价脊髓损伤后脊髓传导功能的完整性。结果 compound#11干预组、VPA干预组小鼠与生理盐水对照组相比后肢运动功能恢复更好(P<0.05);组织学检测显示,相对于生理盐水对照组,compound#11干预组、VPA干预组小鼠胶质细胞增生及疤痕面积更小,神经元凋亡数目更少;电生理检测显示,compound#11干预组、VPA干预组、生理盐水组均呈现延长期波幅逐渐增加,潜伏期缩短趋势,且组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论单独使用compound#11修复脊髓损伤,具有一定的改善趋势,但其药用效价有待进一步提升。
- 林升罗丹丹李琛孙毅
- 关键词：小分子药物神经保护
- 脊髓损伤与修复的关键科学问题——第81期“双清论坛”综述被引量：16
- 2013年
- 脊髓损伤的研究与治疗经过了漫长的探索,目前仍未发现针对脊髓损伤后微环境修复与神经再生的有效治疗方案。为了推动我国脊髓损伤基础和临床研究,国家自然科学基金委员会(以下简称自然科学基金委)近期召开了主题为"脊髓损伤与修复的关键科学问题"的第81期"双清论坛"。会议重点就脊髓损伤的临床研究进展、脊髓继发性损伤机制研究、脊髓损伤后修复和再生等关键科学问题的国内外研究前沿和研究热点展开讨论,同时结合我国的研究现状,分析我国在该领域的优势与不足,凝练并提出我国在脊髓损伤治疗领域中急需解决的重要基础科学问题,为我国未来5—10年的学科资助方向提出专家建议和参考。
- 吴周睿朱元贵程黎明孙毅戴建武曹河圻董尔丹
- 关键词：脊髓损伤继发性损伤干细胞
- 人源脐带间充质干细胞对脑缺血再灌注小鼠神经功能及神经炎症的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探究人源脐带间充质干细胞对脑缺血再灌注损伤小鼠神经功能及神经炎症的影响。方法将96只野生型C57BL/6小鼠随机分为假手术组、磷酸盐缓冲液(PBS)处理组、WJ-MSCs细胞移植组,每组32只。PBS处理组和细胞移植组小鼠通过线栓法构建大脑中动脉阻塞再灌注模型;术后24 h,通过脑立体定位技术注射细胞悬液或PBS溶液。每组取6只小鼠,干细胞移植后对小鼠腹腔注射BrdU溶液,持续5 d。于术前及术后1、6、12、24 d对各组小鼠进行改良神经功能损伤评分;术后6 d时,采用神经元标志物NeuN免疫荧光单标记染色技术检测缺血侧大脑梗死灶及梗死灶周围区皮质神经元的变性丢失情况;采用RT-qPCR技术检测各组小鼠缺血侧大脑半球炎症因子的表达量;采用小胶质细胞/巨噬细胞标志物Iba1及增殖标记物BrdU免疫荧光双标记染色技术检测小胶质细胞/巨噬细胞的活化和增殖情况。结果与PBS处理组相比,WJ-MSCs细胞移植组小鼠神经功能显著改善(P<0.01),且位于缺血侧大脑梗死灶及梗死灶周围区皮质的存活神经元数目显著增多(P<0.01)。与PBS处理组相比,WJ-MSCs细胞移植组小鼠缺血侧脑组织的抗炎因子表达量升高,促炎因子表达量下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与PBS处理组相比,WJ-MSCs细胞移植组小鼠缺血侧梗死灶和梗死灶周围区皮质小胶质细胞/巨噬细胞的活化显著抑制(P<0.05),且小胶质细胞/巨噬细胞的增殖明显降低(P<0.05)。结论人源脐带间充质干细胞可抑制神经炎症反应并改善脑缺血再灌注小鼠的神经功能。
- 石凯燕张春雪王艺静王臻孙毅
- 关键词：脑缺血脐带间充质干细胞神经炎症
- 脊柱脊髓损伤修复重建相关生物力学及生物学研究与临床应用
- 程黎明孙毅薛志刚曾至立靳令经于研张敬王建杰吴周睿朱睿刘海亮徐委胡笑任亦龙贾永伟
- 项目所属学科技术领域：脊柱脊髓损伤致残率高，损伤后脊柱结构功能重建及脊髓神经功能修复迄今仍是一个医学研究热点及难题。该项目所属临床医学科学技术领域，历时10余年，针对脊柱脊髓损伤修复重建的关键问题开展了大量的生物力学和生...
- 关键词：
- 关键词：脊柱损伤脊髓损伤
- 牙本质基质蛋白1突变小鼠血脑屏障通透性变化的分子机制
- 2021年
- 目的通过单细胞转录组数据,探究牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)突变小鼠血脑屏障通透性改变的分子机制。方法通过同源重组的方法,在C57BL/6J背景的小鼠体内敲入一段突变序列,将DMP1糖基化位点的丝氨酸错义突变为分子量更小的甘氨酸,构建S89G-DMP1小鼠模型。前序研究发现DMP1糖基化位点无义突变的S89G-DMP1小鼠会导致血脑屏障(blood brain barrier,BBB)功能障碍。分离小鼠脑组织后通过酶消化制备单细胞悬液,上机测序得到24167个细胞的转录组数据。在R语言中利用Seurat包进行细胞分群,寻找各亚群的差异基因后进行细胞类型定义。结合血脑屏障损伤对神经炎症和神经功能的影响,分析对照组(野生组,简称WT组)与S89G-DMP1组的神经元、小胶质细胞、少突胶质细胞、星形胶质细胞等细胞群体的变化和细胞类型特异性基因表达差异,找到影响血脑屏障完整性的关键细胞和因子。结果在S89G-DMP1小鼠大脑中,少突细胞比例明显上升,神经细胞比例下降。S89G-DMP1组与WT组神经细胞的基因表达较为接近,S89G-DMP1组与WT组星形胶质细胞的基因表达差异较大,共筛选出10个上调基因,85个下调基因,通过GO分析,发现下调基因显著富集在细胞黏附、离子跨膜转运等生理功能上。除此之外,在小胶质细胞、少突胶质细胞中也发现与细胞黏附生理功能的基因在S89G-DMP1小鼠大脑中显著下调。结论S89G-DMP1小鼠大脑神经细胞的比例降低,可能与BBB功能障碍互为因果,但基因表达谱无明显改变,主要通过下调星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞中与细胞黏附功能相关的基因表达来增加小鼠BBB的通透性,导致BBB功能障碍。
- 邵瑾良施佳玉刘佶平孙毅
- 关键词：牙本质基质蛋白1血脑屏障
- 人不同组织间充质干细胞免疫调控能力的比较被引量：9
- 2017年
- 目的比较人5种不同组织来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)免疫调控能力的差异。方法炎症因子干扰素γ(interferon gamma,IFNγ)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)可诱导MSCs高表达吲哚胺-2,3-双加氧酶(indole-amine-2,3-dioxygenase,IDO)和趋化因子,从而抑制抗CD3/CD28抗体激活的T细胞增殖。通过RT-PCR及Western印迹法检测抑制T细胞增殖相关基因表达。使用Cell Tracer Violet的染料对T细胞进行标记,检测其增殖能力变化。同时,使用Ed U染色检测MSCs细胞增殖。过程炎症因子刺激后的MSCs与PBMC进行共培养,检测PBMC的增殖情况,同时检测MSCs相关基因表达及其增殖情况。结果炎症因子刺激的MSCs对抗CD3/28抗体激活的单个核细胞增殖有明显抑制作用,不同组织来源MSCs对单个核细胞增殖的抑制作用无明显区别。结论与骨髓来源MSCs相比,其他组织来源MSCs对单个核细胞免疫调节作用无明显区别。
- 刘贤俊刘海亮刘海亮张春雪孙毅
- 关键词：免疫调控间充质干细胞单个核细胞趋化因子
- IFN-γ调节间充质干细胞免疫应答的分子机制被引量：2
- 2020年
- 目的通过基因芯片数据,比较不同浓度的炎症因子IFN-γ预处理对间充质干细胞(mesenchymal stem/stromal cells,MSCs)免疫应答的影响。方法从GEO数据库下载GSE77814骨髓间充质干细胞经不同浓度的IFN-γ预处理及未处理的基因表达数据,借助GEO2R分析差异基因(differentially expressed genes,DEGs)。随后对差异基因进行GO富集分析(DAVID数据库)、KEGG通路富集分析(KEGG Mapper/GSEA)、蛋白分析(Uniprot数据库)、并构建差异基因蛋白质蛋白质相互作用关系(PPI),筛选hub基因。结果IFN-γ低浓度组与未处理组相比,共筛选出152个差异基因(以下简称IFN-γ-L DEGs),其中133个为上调基因,19个为下调基因。IFN-γ高浓度组与未处理组相比,共筛选出648个差异基因(以下简称IFN-γ-H DEGs),其中431个为上调基因,217个为下调基因。差异基因多与免疫反应、炎症、病毒反应相关。IFN-γ高浓度处理比低浓度处理上调表达更多趋化因子和抑炎因子。IFN-γ-H DEGs同IFN-γ-L DEGs在GO富集分析、KEGG通路富集分析、蛋白分析上的结果接近,但IFN-γ-H DEGs在代谢通路上富集显著。结论炎症因子IFN-γ对MSCs的转录组具有较大影响,尤其是对免疫应答相关的基因,并且与处理浓度有密切关系。此外,MSCs行使免疫抑制能力可能需要较高浓度的炎症因子授权。
- 王艺静高文霞石凯燕施佳玉孙毅
- 关键词：间充质干细胞免疫应答免疫调节IFN-Γ
