孔春林
- 作品数:21 被引量:20H指数:4
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项上海市自然科学基金家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3的分子鉴定与分析
- 钙依赖蛋白激酶(CDPKs)是一类广泛存在于植物的蛋白激酶,目前只在植物、绿藻、纤毛虫和顶复器原虫中发现.CDPKs是依赖于Ca2+而不依赖于钙调素(CaM)的蛋白激酶,它不同于动物细胞中的蛋白激酶C和依赖于Ca2+/钙...
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- 三株早熟株对8种抗球虫药的敏感试验
- 为探讨柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫早熟株对常用抗球虫药的敏感性,选用尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素、二硝托胺、盐酸氯苯胍、拉沙洛西钠、癸氧喹酯和地克珠利8种抗球虫药,分三批进行鸡体试验,通过抗球虫活性百分比...
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- 文献传递
- 柔嫩艾美耳球虫真核翻译起始因子3亚基7(EteIF3s7)的分子鉴定和功能分析
- 在真核生物细胞基因表达调控过程中,蛋白翻译的控制起着重要作用.蛋白翻译包括翻译起始、延伸、终止和核糖体循环等过程,其中真核生物蛋白翻译起始是一系列蛋白高度调控的细胞过程,这些蛋白称之为翻译起始因子(eIFs).目前已发现...
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- 柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3基因在毕赤酵母中的表达及分析被引量:6
- 2012年
- 旨在真核表达系统中高效表达柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3(Eimeria tenellacalcium-dependent protein kinase-3,EtCDPK3),获得有活性的天然蛋白,利用毕赤酵母表达系统对该基因进行了表达。将EtCDPK3基因连接到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,构建重组质粒pPIC9K-EtCDPK3。重组质粒通过电击转化入酵母细胞GS115后,用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选,获得含重组质粒的酵母表达细胞。重组酵母细胞在含1%甲醇的BMMY培养基中诱导产生目的蛋白,培养收集1-4 d的部分上清。经SDS-PAGE检测,所表达的蛋白相对分子质量约为49 kD。Western blotting表明,该蛋白能与兔抗EtCDPK3血清特异性结合。结果表明,柔嫩艾美耳球虫CDPK3基因在毕赤酵母中成功地进行了表达。
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- 关键词:柔嫩艾美耳球虫真核表达毕赤酵母
- 磺胺氯吡嗪处理弓形虫速殖子抑制消减文库的构建和初步分析
- 为了研究和探索磺胺氯吡嗪抗弓形虫的作用机理,构建磺胺氯吡嗪处理弓形虫的抑制性消减文库。将刚地弓形虫(Toxoplasma gondii) RH株速殖子腹腔注射(10 000个/只鼠)感染昆明系小鼠,大量收集并纯化速殖子,...
- 曾艳波孔春林韩红玉黄兵董辉姜连连赵其平朱顺海马卫娇程军李婷
- 柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d基因的酵母表达分析被引量:2
- 2012年
- 在毕赤酵母真核表达系统中表达柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d(Emeria tenella eukaryotic initiation factor 3d,EteIF3d)基因,并获得具有天然构象的活性蛋白。将EteIF3d基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,将构建正确的重组质粒通过电激转化入酵母细胞GS115,用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选,获得含重组质粒的酵母表达细胞。在含1%甲醇的BMMY培养基中诱导培养,收集1~3 d的表达上清。表达产物进行SDS-PAGE检测,并用Western blot进行免疫学分析。结果表明,本研究成功构建了重组质粒pPIC9k-EteIF3d,并成功表达该蛋白,且该蛋白能与兔抗EteIF3d血清特异性结合,具有良好的抗原性。EteIF3d基因可在真核表达系统毕赤酵母中表达,且获得蛋白具有抗原性,从而为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础。
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- 关键词:球虫柔嫩艾美耳球虫毕赤酵母真核表达
- 柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因及其应用
- 本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因,该基因为编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因。本发明还公开了上述基因编码的蛋白质。本发明柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因编码的重组蛋白对鸡球虫具有良好的免...
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- 文献传递
- 五种抗球虫药对肉鸽球虫病的防治研究被引量:4
- 2012年
- 为筛选有效的抗鸽球虫药物,选用地克珠利(1 mg/kg)、磺胺喹恶啉钠(300 mg/kg)、磺胺氯吡嗪钠(300 mg/kg)、托曲珠利(25 mg/kg)、白头翁散(500 mg/kg)等5种抗鸡球虫药物进行了本试验,试验重复3次,每次分为用药感染组和不用药感染组,人工感染主要含有拉氏艾美耳球虫和鸽艾美耳球虫的混合孢子化卵囊,剂量为15×104个,以相对卵囊减少率作为抗球虫效果的指标。结果显示磺胺喹恶啉钠、磺胺氯吡嗪钠效果最好,相对卵囊减少率分别为99.9%和99.5%;其次是托曲珠利、白头翁散,相对卵囊减少率分别为96.7%和92.0%;地克珠利效果最差,相对卵囊减少率仅为75.6%。
- 赵其平朱顺海韩红玉姜连连李婷孔春林黄兵董辉
- 关键词:球虫艾美耳球虫球虫病抗球虫药物
- 柔嫩艾美耳球虫与表型相关基因的研究
- 球虫具有耐药性、生长速率、株特异性免疫力、同工酶等不同表型,不同表型虫株之间在形态、生物学及基因和蛋白表达上都存在着差异,鉴定控制某种特定表型的基因,对于球虫病控制具有重要的意义,而传统的遗传学方法很难达到该目的。连锁群...
- 董辉赵其平韩红玉姜连连郭涛程军李婷孔春林黄兵
- 文献传递
- 柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3(CDPK3)基因在毕赤酵母表达系统的表达及分析
- 为在真核表达系统中高效表达柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3(Emeria tenella calcium-dependent protein kinase,EtCDPK3),获得有活性的天然蛋白,本研究利用毕赤酵母表达系统...
- 孔春林韩红玉李洋董辉姜连连李婷赵其平朱顺海黄兵