吴坚
- 作品数：104 被引量：456H指数：13
- 供职机构：江苏省中医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省中医药领军人才培养项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学交通运输工程轻工技术与工程更多>>
- 辛开苦降法在功能性消化不良治疗中的运用被引量：1
- 2009年
- 吴坚沈洪
- 关键词：功能性消化不良辛开苦降法器质性疾病《伤寒论》
- 健脾消癥方对人胃癌细胞MGC803凋亡和细胞周期的影响被引量：16
- 2012年
- 目的:观察健脾消癥方对胃癌细胞株MGC803增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法:(1)采用MTT法观察不同浓度的健脾消癥方对胃癌细胞株MGC803增殖的抑制作用;(2)使用Annexin V/PI荧光双染法检测健脾消癥方诱导肿瘤细胞进入凋亡的比例;(3)应用流式细胞仪检测健脾消癥方对MGC803细胞周期的影响。结果:(1)健脾消癥方对MGC803细胞有较强的抑制增殖的作用,并呈一定的浓度依赖性。(2)健脾消癥方高、中、低浓度组对胃癌细胞株MGC803作用24h后,早期凋亡率分别为49.83%、55.29%、16.73%。健脾消癥方高、中、低浓度组对胃癌细胞株MGC803作用48h后,早期凋亡率分别为84.52%、55.58%、51.76%。(3)与阴性对照组相比,健脾消癥方各浓度组对胃癌细胞株MGC803作用48h后,可将细胞阻滞于G2-M期,健脾消癥方高浓度组在G0-G1期前出现较明显的亚二倍体峰。结论:(1)健脾消癥方可明显抑制胃癌细胞株MGC803的增殖作用。(2)健脾消癥方对人胃癌细胞株MGC803有明显的诱导凋亡及阻滞细胞周期在G2-M期的作用。
- 胡守友刘沈林吴坚徐佳丽邹玺
- 关键词：胃癌增殖细胞周期
- 一种抗肿瘤药物及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种抗肿瘤药物及其制备方法和应用，该药物包括由如下原料药制成：乌梅、五味子按生药重量比为4∶1～1∶4。它有三种制备方法，分别是超微粉碎的方法、复方水提液的制备方法和复方醇提液的制备方法。本发明的优点是五味子...
- 刘沈林邹玺吴坚
- 健脾养正方调控肿瘤相关巨噬细胞外泌体诱导胃癌细胞失巢凋亡的机制研究
- 2024年
- 目的 探讨健脾养正方调控肿瘤相关巨噬细胞(TAM)外泌体对胃癌失巢凋亡的影响及其机制。方法 体外诱导人单核细胞THP-1建立TAM模型;超速离心法提取M0、TAM及TAM+健脾养正方外泌体,与胃癌细胞共孵育。流式细胞术检测各组外泌体对胃癌细胞失巢凋亡的影响。构建BALB/c移植瘤小鼠模型,Western blot检测移植瘤中凋亡蛋白的表达水平。Label-free质谱蛋白组学及生物信息学分析干预前后胃癌细胞中的差异蛋白;Western blot及qPCR实验检测差异蛋白异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)表达水平,泛素化实验检测IDH1的泛素化水平;试剂盒检测α-酮戊二酸(α-KG)、NADPH/NADP~+、谷胱甘肽(GSH/GSSG)水平及活性氧(ROS)含量。结果 TAM外泌体干预胃癌细胞后其失巢凋亡率降低(P<0.05,P<0.01);而TAM+健脾养正外泌体干预后则显著升高(P<0.05,P<0.01)。小鼠体内实验中,TAM外泌体组瘤体内Cleaved Caspase-3/Caspase-3的比值降低(P<0.05),而TAM+健脾养正方外泌体干预后比值明显增高(P<0.05)。蛋白组学分析显示IDH1在干预前后差异明显,且与三羧酸循环代谢相关。相较于M0组,TAM组外泌体干预的胃癌细胞IDH1泛素化水平升高,α-KG、NADPH/NADP~+及GSH/GSSG水平明显增加,ROS含量降低(P<0.05),而TAM+健脾养正外泌体则可逆转上述现象。结论 健脾养正方通过调控TAM外泌体使胃癌细胞IDH1发生泛素降解,降低胃癌细胞三羧酸循环代谢水平,促进ROS积累,诱发胃癌失巢凋亡,进而抑制胃癌发展。
- 郑姗姗吴坚张瑞娟张翔郑晓霞卢雨佳黄磊孙庆敏
- 关键词：胃癌外泌体肿瘤相关巨噬细胞IDH1失巢凋亡
- 健脾化瘀方对肝癌耐药细胞P-糖蛋白的影响被引量：16
- 2015年
- 目的:研究健脾化瘀方对肝癌耐药细胞bel-7402/5-FU表面耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)表达的影响,探寻健脾化瘀方可能的逆转耐药的机制。方法:选择肝癌细胞bel-7402、肝癌耐药细胞bel-7402/5-FU做为实验细胞,并建立BALB/c裸鼠肝癌耐药细胞皮下移植瘤模型,运用PCR及western blot法检测健脾化瘀方给药后P-gp蛋白的表达水平。结果:经健脾化瘀方给药后,bel-7402/5-FU细胞P-gp的表达水平下降;中药组瘤体质量小于bel-7402组;中药组瘤体中P-gp的表达水平下降。结论:健脾化瘀方可以降低耐药细胞中P-gp蛋白的表达水平,并可能是通过该途径逆转细胞的耐药性。
- 凌博凡侯茜邹玺吴坚王瑞平
- 关键词：肝癌健脾化瘀方耐药P-GP
- 论刘完素学术思想对于治疗中风病的指导意义被引量：5
- 2015年
- 本文主要讨论刘完素学术思想对于临床治疗中风做出的贡献。通过理论剖析和收集近期相关临床试验、实验室研究报道,阐述刘氏对治疗中风病提出的学说以及其为治疗中风所创之方取得的成就。刘完素在中风病学上提出的学说以及其为治疗中风所创之方在临床试验和实验中取得了一定的验证。
- 吴坚杭爱武
- 关键词：刘完素中风热极生风气血阻滞
- 半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠模型血浆P物质及胃窦黏膜CGRP的影响被引量：28
- 2011年
- 目的:观察半夏泻心汤对功能性消化不良(FD)大鼠模型血浆P物质(SP)和胃窦组织降钙素基因相关肽(CGRP)的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:以FD大鼠为实验对象,应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血浆中SP含量,并用免疫组化技术检测大鼠胃窦组织CGRP的水平。结果:①各组大鼠胃窦黏膜均未见明显损伤。②与正常组相比,模型组血浆SP和胃窦组织CGRP水平升高(P<0.01);与模型组相比,给药组大鼠血浆SP和胃窦组织CGRP水平升高(P<0.05)。结论:半夏泻心汤具有促进胃排空和降低内脏敏感性的作用。这可能是其治疗功能性消化不良的机制之一。
- 沈天华沈洪吴坚朱长乐申龙树
- 关键词：半夏泻心汤功能性消化不良大鼠模型
- 肿瘤患者髓源抑制性细胞的免疫抑制及临床应用分析被引量：2
- 2020年
- 髓源抑制性细胞(MDSCs)是处于不同分化阶段的异质性、未成熟髓系细胞,对维持肿瘤患者免疫逃逸和耐受,促进肿瘤生长、增殖及转移等方面具有重要作用。由于缺少特异性标志物及MDSCs异构性,人MDSCs表型尚未完全明确。人MDSCs能够通过上调关键酶降解氨基酸、诱导氧化应激、辅助性与调节性T细胞、激活PD-1/PD-L1轴、诱导高丰度肠道真菌及高表达抑制性细胞因子等机制抑制免疫应答,作为肿瘤预测标志物和治疗靶点应用于临床。检测外周血、腹腔液、肿瘤组织中MDSCs有助于肿瘤临床诊疗和预后判断,通过抑制MDSCs功能、促进其分化为更成熟的细胞、破坏细胞内在结构链等可降低MDSCs的比例和表型。本文就国内外关于MDSCs临床应用相关分析的研究进展,探讨其可能存在的免疫抑制机制并分析其临床应用现状,从MDSCs入手改善肿瘤微环境免疫抑制状态,有望为肿瘤免疫治疗提供新途径。
- 陈彦臻吴坚刘沈林
- 关键词：免疫抑制肿瘤患者生物标记物
- 基于多组学探讨川陈皮素调控脂质合成氧化逆转胃癌顺铂耐药的机制
- 2023年
- 目的运用脂质代谢组学和网络药理学寻找川陈皮素对胃癌顺铂耐药细胞(AGS-DDP)的核心靶点,并结合细胞实验进一步探究川陈皮素逆转胃癌顺铂耐药的机制。方法采用UPLC-Orbitrap质谱系统进行非靶向脂质组学分析。利用GENE Card、TCMSP数据库挖掘川陈皮素和甘油磷脂代谢通路的潜在靶点,通过微生信在线作图工具平台整合二者的交集靶点,并进行基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,通过STRING数据库绘制蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,运用Cytoscape软件将川陈皮素的核心靶点可视化。川陈皮素给药后,通过CCK-8法检测AGS和AGS-DDP细胞的存活率;流式细胞术检测AGS-DDP细胞的凋亡情况;划痕实验检测AGS-DDP细胞的迁移能力;Western blotting检测AGS-DDP细胞的B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)和三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶(adenosine triphosphate citrate lyase,ACLY)蛋白表达。结果AGS和AGS-DDP细胞通过脂质组学分析检测得到31个亚类中的1450个差异的脂质化合物,主要富集在甘油磷脂代谢通路,对川陈皮素潜在靶点进行KEGG富集分析结果显示川陈皮素具有逆转铂类耐药的潜力。细胞实验结果显示,与对照组比较,川陈皮素剂量相关性地抑制AGS-DDP细胞的存活率(P<0.05、0.01),增加AGS-DDP细胞对顺铂的敏感性(P<0.05),且能诱导AGS-DDP细胞凋亡并抑制其迁移能力(P<0.05、0.01)。Western blotting实验结果显示川陈皮素组Bax、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05、0.01),Bcl-2、N-cadherin、Vimentin、ACLY和PPARγ蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01)。结论AGS和AGS-DDP细胞的差异脂质代谢产物主要富集在甘油磷脂代谢通路,川陈皮素通过调�
- 申隽于李怀志陈梦麟郑姗姗张粲粲韩博吴坚孙庆敏
- 关键词：胃癌川陈皮素网络药理学顺铂耐药过氧化物酶体增殖物激活受体Γ
- 一种健脾化瘀中药复方组合物及其应用
- 本发明公开了一种健脾化瘀中药复方组合物，其包括如下重量份数的组分：潞党参10～20份、炒白术8～15份、茯苓10～20份、淮山药10～20份、生苡仁15～25份、煨木香8～15份、陈皮3～8份、莪术8～15份、石见穿25...
- 刘沈林张小琴朱萱萱吴坚
- 文献传递
