吉琼梅
- 作品数：16 被引量：49H指数：4
- 供职机构：广州医学院更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金河南省科技攻关计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程理学更多>>
- hIL-2分泌肽序列在HepG2细胞中对hEndostatin表达和分泌差异的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 :了解分泌肽序列在HepG2细胞中对人内皮抑素基因 (hEndostatin)的cDNA表达和分泌差异的影响。方法 :构建不含hIL - 2分泌肽序列的真核表达载体pBlast-hEndo质粒 ,转染人的HepG2细胞株 ,用RT -PCR的方法检测HepG2 (pBlast-hIL2 -hEndo) ,HepG2 (pBlast-hEndo) ,HepG2 (pBlast-Mcs)和HepG2中hEndostatin的mR NA表达水平 ,及制备 4种细胞的总蛋白和收集各自的培养上清 ,进行Westernblot分析蛋白表达和分泌的差异。结果 :发现HepG2 (pBlast-hIL2 -hEndo)中hEndostatin的mRNA的水平显著高于HepG2 (pBlast -hEndo)。而仅在HepG2(pBlast-hIL - 2 -hEndo)的细胞总蛋白和上清 ,及HepG2 (pBlast -hEndo)的细胞总蛋白中检测到hEndostatin表达 ,在其它各株细胞总蛋白及上清中 ,未检测到hEndostatin。结论 :hIL - 2分泌肽序列能促进hEndostatin基因在HepG2细胞中表达及分泌。
- 岳滔刘鹏邓庆丽张平吉琼梅张海涛朱振宇
- 关键词：内皮抑素肿瘤血管生成信号肽白细胞介素2
- Ⅱ型糖尿病的红细胞膜GPA基因表达被引量：1
- 1998年
- 为了研究Ⅱ型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜血型糖蛋白Ａ（ＧＰＡ）的基因表达，采用不连续聚蔗糖（Ｐｅｒｃｏｌ）密度梯度法分离１５名正常人和２５例ＮＩＤＤＭ患者外周血的网织红细胞，提取其总ＲＮＡ，继以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交观测此两组的红细胞膜ＧＰＡ基因的表达水平．采用碱性磷酸酶酶联免疫检测完成红细胞膜ＧＰ的Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹．结果表明，ＮＩＤＤＭ患者组红细胞膜ＧＰＡ的ｍＲＮＡ含量较正常人组显著增加（分别为１１．９２±１０．５和１０．１８±１．０８积分光密度，Ｐ＜０．０１）．免疫印迹图谱显示，有６例ＮＩＤＤＭ患者的区带３ａ、３ｂ界限模糊，３例的区带３ａ、３ｂ和４明显浅染．推测ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜ＧＰＡ减少可能引起其基因表达呈代偿性增强，而障碍或许出现在翻译环节上，这些与ＮＩＤＤＭ患者红细胞变形能力（ＲＣＤ）的明显降低甚为相符．
- 吉琼梅刘俊凡卢义钦
- 关键词：糖尿病GPA基因表达
- 重组人血管内皮细胞生长因子的表达及活性研究
- 2004年
- 目的 :用基因工程的方法在大肠杆菌中诱导表达人血管内皮生长因子 (VEGF) ,分离纯化并检测其生物学活性 ,以研究其在药学领域潜在的药用价值。方法 :利用PCR技术扩增VEGF基因片段 ,克隆到pQE30表达载体中 ,转化E .coliM15菌株后用IPTG进行诱导表达。经裂解细胞、变性、复性和Ni-NTAagarose金属螯合柱层析等方法纯化得到VEGF。用鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)血管生成实验检测VEGF的生物活性。结果 :重组表达质粒在大肠杆菌中成功地表达了相对分子质量为 2 0 6 0 0的融合蛋白 ,它以不溶性的包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白的 30 %左右。经分离纯化融合蛋白SDS -PAGE显示为单一区带。CAM结果表明给药组血管生成数 (2 1 7± 3 1、39 3± 2 8)与对照组 (15 4± 1 9、2 9 2± 4 2 )相比有明显增加 (P <0 0 5 )。结论 :利用原核表达系统得到血管内皮生长因子具有天然VEGF生物学活性 ,为进一步的应用研究奠定了基础。
- 王晓华吉琼梅吴朝霞董文心
- 关键词：人血管内皮生长因子鸡胚绒毛尿囊膜基因表达
- 紫外线诱导小鼠B16黑色素瘤细胞凋亡研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :研究紫外线照射对小鼠B16黑色素瘤细胞凋亡率的影响。方法 :用UV照射培养的小鼠B16黑色素瘤细胞 ,于照射后不同时段分别用流式细胞仪 (FCM )及原位末端标记法 (TUNEL法 )检测B16细胞凋亡率。结果 :UV照射后 0h、12h、2 4h及 36h ,B16细胞的凋亡率分别为 (4 .13± 0 .15 ) % ;(9.2± 0 .74 ) % ;(2 1.6± 1.2 8) % ;(36 .7± 1 5 6 ) %。各时间段B16细胞的凋亡率与对照组B16细胞的 (2 .3± 0 .2 6 ) %相比均有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :紫外线照射可诱导小鼠B16黑色素瘤细胞凋亡。
- 吉琼梅王晓华张东方
- 关键词：细胞凋亡黑色素瘤细胞紫外线
- 棉宝中常见单磷酸核苷酸的高效液相色谱分离与测定被引量：3
- 1999年
- 建立了以浓度为０．０５ｍｏｌ／Ｌ的ＫＨ２ＰＯ４为流动相分离高效液相色谱法测定５′－鸟苷单磷酸（ＧＭＰ）、５′－尿苷单磷酸（ＵＭＰ）、５′－腺苷单磷酸（ＡＭＰ）、５′－胞苷单磷酸（ＣＭＰ）。测定了棉宝中ＡＭＰ、ＣＭＰ、ＧＭＰ、ＵＭＰ的分解率，表明棉宝的热贮和冷处理稳定性良好。
- 吉琼梅张书胜吴养洁
- 关键词：核苷酸高效液相色谱稳定性
- 1-(2,6-二氯苯基)-2-吲哚酮及相关物质的HPLC分离分析
- 2000年
- 应用高效液相色谱方法研究了以2,6二氯苯酚和苯胺为起始原料合成药物中间体1(2,6二氯苯基)2吲哚酮(DCI)过程中,DCI及相关物质在不同色谱条件下的分离情况。结果表明,以CLCCN(150mm×6.0mmi.d.,7μm)为分离柱,以MeOHH2O(体积比为6∶4)为流动相,在流速为1mLmin的情况下,DCI及相关物质可以达到基线分离。建立了快速准确测定DCI纯度和检验杂质种类的高效液相色谱分析方法,方法准确可靠。对两个精品和两个粗品分别进行测定,结果表明精品中的杂质主要为N(2,6二氯二苯胺基)氯乙酰胺,粗品中的杂质主要为N(2,6二氯二苯胺基)氯乙酰胺和2,6二氯二苯胺。
- 吉琼梅张书胜郝庆秀刘玉华吴养洁
- 关键词：高效液相色谱法吲哚酮DCI
- 川芎嗪对缺血后视网膜节细胞的作用
- 2001年
- 林淑冰李锦新马宁芳吉琼梅
- 关键词：川芎嗪视网膜节细胞
- 转染hEndostatin基因对CNE2细胞株裸鼠移植瘤生长的影响被引量：7
- 2003年
- 背景与目的:肿瘤的生长、转移是血管生成依赖性的,血管生成抑制剂有望通过抑制肿瘤血管生成及诱导肿瘤细胞凋亡,有效地抑制肿瘤的生长和转移。本文旨在探讨转染人内皮抑素基因hEndostatin对人鼻咽癌细胞株CNE2裸鼠移植瘤生长的影响。方法:采用脂质体介导法,分别将pBlast-hIL-hEndostatin、pBlast-hEndostatin和pBlast-MCS质粒导入人鼻咽癌细胞株CNE2,MTT法在体外检测转导细胞表达的hEndostatin的活性,并在体内实验中观察转导的CNE2细胞在裸鼠上的致瘤性的差异。结果:转染pBlast-hIL-hEndostatin的CNE2细胞的上清能显著抑制血管内皮细胞ECV304的生长,其在裸鼠体内形成的瘤组织重量和体积均显著低于对照组(P<0.01),生长速度明显慢于对照组细胞。结论:转染hEndostatin基因能有效抑制CNE2细胞在裸鼠体内的生长。
- 岳滔张平刘鹏邓庆丽吉琼梅李秀英朱振宇
- 关键词：裸鼠移植瘤鼻咽肿瘤内皮抑素肿瘤血管生成基因转染
- 人颗粒酶B真核表达载体的构建与表达分析被引量：1
- 2004年
- 目的构建能在Hep2细胞中表达的颗粒酶B的表达质粒pVAX1-GrB。方法用淋巴细胞分离液分离肿瘤组织中的淋巴细胞,并抽提RNA,用RT-PCR方法扩增其分泌蛋白颗粒GrB的全部外显子片段,利用基因重组技术将其定向插入pVAX1多克隆位点。脂质体介导转染Hep2细胞,用间接免疫荧光法观察目的蛋白在细胞中的表达。结果限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实成功获得GrB基因片段,GrB准确克隆入pVAX1的多克隆位点,未改变读码框架。转染Hep2细胞后,检测到目的蛋白的表达。结论成功构建了VAX1-GrB,并在Hep2细胞中得到表达。
- 李秀英夏良平谢金卫赵肃清曾宗渊张海涛吉琼梅李民友朱振宇
- 关键词：颗粒酶B淋巴细胞
- 反义核酸抑制B16黑色素瘤细胞tyr基因的表达
- 2005年
- 目的:用反义核酸技术抑制小鼠B16黑色素瘤细胞酪氨酸酶基因(tyr)的表达。方法:构建tyr反义重组体pcDNA3.1(-)-tyr,用脂质体法导入B16细胞,用酪氨酸酶活性及黑色素含量测定,多巴染色及透射电镜等检测由反义重组体pcDNA3.1(-)-tyr转录产生的tyr反义核酸对B16细胞tyr表达的抑制情况。结果:成功构建了反义重组体pcDNA3.1(-)-tyr,转染了反义重组体的B16细胞其酪氨酸酶活性为0.0498±0.0036,显著低于对未转染组B16细胞的0.0916±0.0132(P<0.01);转染空质粒pcDNA3.1(-)及真核表达重组体pcDNA3.1(+)-tyr组B16细胞的氨酸酶活性分别为0.1015±0.0166和0.0948±0.0096,两者同对照组相比均无显著差异(P>0.05)。多巴染色及电镜观察结果表明转染了反义重组体的B16细胞其黑色素颗粒的含量明显低于对照组。结论:反义核酸可以显著抑制B16黑色素瘤细胞tyr的表达。
- 吉琼梅朱振宇王晓华张东方张海涛李秀英马涧泉
- 关键词：核苷酸反义黑色素瘤基因
