刘飞鹏 作品数:38 被引量:204 H指数:8 供职机构: 暨南大学 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 广东省卫生厅资助课题 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 化学工程 轻工技术与工程 更多>>
载脂蛋白E基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗塞关系的研究 被引量:17 2000年 应用聚合酶链反应(PCR)扩增ApoE基因外显子4中编码112位和158位氨基酸的DNA片段 ,将该长为292bp的PCR产物以HhaI酶切 ,根据其限制性片段长度多态性图谱确定ApoE基因型。对广东汉族人群的50例动脉粥样硬化脑梗塞 (ACI)患者和50例健康对照者的ApoE基因多态性频率的研究结果表明 :所研究的人群中 ,ApoE基因多态性频率与ACI没有关联。ACI患者中各基因型亚组之间血清TG和TC浓度无显著性差异。 王彤歌 何震宇 李月琴 刘飞鹏 黄舜韶 周天鸿关键词:载脂蛋白E 基因多态性 动脉粥样硬化 脑梗塞 BRCA1基因结构及其在乳腺癌中的表达 被引量:2 1997年 利用MPCR技术从乳腺组织分离到抑癌基因BRCA1的cDNA片段,将此914bp的片段克隆进质粒pUC118,并经全序列测定证实。序列分析表明,BRCAIcDNA编码的肽链NN2-末端有一锌指结构,抑癌基因BRCAI的产物可能是DNA结合蛋白,cDNA序列存在两个变异位点:一个是第409位的C→A(Asp→Glu):另一个是第879位的A→T(MIa同义突变)。以该片段为探针,检测6例乳腺癌组织中BRCAImIMA表达,一例表达明显下降,一例没检测到表达的mIMA产物。 周天鸿 李月琴 刘飞鹏 朱嘉明 朱嘉明关键词:乳腺癌 基因表达 LDL受体基因cDNA的RT-PCR分离、克隆及其在RFLP中的应用 被引量:1 1996年 利用RT-PCR技术分离低密度脂蛋白受体基因cDNA,将长为2605bp的cDNA插入质粒pJN6,并经全序列测定证实,该序列与已报道序列相比,存在两个变异碱基,即第754位C→T,和1654位的G→A,这两个变异碱基并不改变编码的氨基酸,利用LDL受体基因cDNA中的ClaⅠ片段作为探针,检测到LDL受体基因上外显子8的StuⅠ位点是个限制性片段长度多态性位点。所克隆的cDNA含有可译框架的全部密码,因此可作为基因表达材料。 周天鸿 王彤歌 李月琴 谢建雄 刘飞鹏关键词:低密度脂蛋白 受体基因 RT-PCR RFLP 肽抗生素及其基因工程研究 被引量:7 2000年 抗生素的滥用带来严重的病菌抗药性问题。肽抗生素能杀死多种微生物及特异性杀死癌细胞 ,通过穿膜打洞的方式使细胞死亡 ,不会导致抗药菌株的产生。从昆虫及高等动物中分离纯化了许多种类的肽抗生素 ,寻找到一些杀菌和杀癌细胞能力强的种类。由于分离天然产物产量极微 ,采用人工合成则成本太高 ,科研人员致力于用基因克隆与表达的技术研究与开发肽抗生素。 刘飞鹏关键词:抗药性 肽抗生素 基因 克隆 限制性酶切位点多态性在家族性高胆固醇血症(FH)基因诊断中的应用研究 1998年 利用长链PCR技术从人白细胞基因组DNA中分离到一个长为5.0kb的PCR产物片段,限制性内切酶酶切证实该片段是LDL受体基因外显子15-内含子15-外显子16片段。利用该片段中存在的PvuⅡ酶切位点多态性,对一个家族性高胆固醇血症家族进行基因连锁分析,证明该技术可以快速。 周天鸿 李月琴 刘飞鹏 朱嘉明 梁志成关键词:高胆固醇血症 基因诊断 酵母细胞的电击高频转化 被引量:8 1996年 用Bio-Rad生产的基因脉冲仪进行酿酒酵母电击转化实验,得到的最适条件为:5kv/cm25μF和200Ω。电击后涂布前的培养时间为2小时。电击后细胞存活率为46%时,每微克质粒DNA得到106以上的转化子。用相同的质粒和受体菌进行原生质体法和醋酸锂法比较实验,转化率分别为2×104和3.5×102个转化子/μgDNA。电击转化是最方便易行和高效率的方法。 刘媛美 刘飞鹏 周天鸿 李月琴关键词:酵母 细胞 电击转化 抗菌肽克隆基因的表达和转基因研究现状 被引量:39 2000年 抗菌活性肽具有抗细菌、真菌、病毒、原虫,还有杀精子活性和抑癌活性,具有潜在的应用价值。本文介绍国内外克隆抗菌肽基因的表达研究状况以及抗菌肽在转基因植物、动物方面的应用成果及存在的问题。 石强 刘飞鹏关键词:抗菌肽 基因表达 转基因 T7启动子 天蚕抗菌肽A与蜂毒素杂合肽基因的合成及在大肠杆菌中的克隆与表达 被引量:21 2002年 根据天蚕抗菌肽A(cecropinA ,CA)N端第 1~ 7个氨基酸残基、蜂毒素 (melittin ,M )N端第 5~ 12个氨基酸残基 ,以大肠杆菌偏爱的密码子设计合成了杂合肽CA(1~ 7) -M(5~ 12 )基因 ,同载体 pGEMEX - 1连接后转化大肠杆菌JM 10 9,经打点杂交筛选和序列测定 ,获得一个与设计一致的克隆。将此克隆中的质粒亚克隆至JM10 3(DE3) ,经IPTG诱导、BrCN切割和抑菌圈试验表明 ,克隆的杂合肽基因在JM 10 9(DE3)中获得了表达。 朱嘉明 刘飞鹏 李月琴 钟振宇 张娜关键词:蜂毒素 基因克隆 T7启动子在哺乳类动物细胞中启动外源基因表达的研究 被引量:5 1997年 人低密度脂蛋白(LDL)受体基因cDNA和氯霉素已酞转移酶基因(CAT)及PolyA信号序列被克隆进pGEM4载体的T7噬茵体启动子下游,构建成质粒pT7LDLR和pT7CAT.两个重组质粒转化CHO细胞.PCR和CAT酶实验显示:两个基因被T7噬菌体启动子所启动.结果证实真核生物RNA聚合酶能够识别T7启动子,转录外源基因.常用的含有T7启动子的质粒可同时作为原核生物和真核生物的表达载体. 周天鸿 李月琴 王彤歌 刘飞鹏关键词:哺乳动物纲 基因表达 T7启动子 先天性糖基化病的研究进展 被引量:3 2003年 Congenital disorders of glycosylation(CDG) are a rapidly growing group of genetic diseases that are due to defects in the synthesis of glycans and in the attachment of glycans to other compounds. Most CDG are multisystemic diseases often involving severe psychomotor retardation. The CDG causing sialic acid deficiency of N-glycans can be diagnosed by isoelectric focusing of serum transferrin. Glycan structural analysis, yeast genetics and knockout animal models are essential tools in the elucidation of novel CDG. In this review, we focus on the current knowledge of the pathogenesis and identification of nine primary glycosylation diseases. 王晓波 刘飞鹏关键词:糖基化 转铁蛋白