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人脐带间充质干细胞移植治疗系统性红斑狼疮被引量：6: 2015年; 背景:系统性红斑狼疮是一种以多器官或多系统病变和血清中出现多种自身抗体为特征的自身免疫性疾病,目前缺乏有效的治疗方案,而理论上间充质干细胞可用于治疗系统性红斑狼疮。目的:观察人脐带间充质干细胞移植治疗系统性红斑狼疮小鼠的疗效。方法:分离培养人脐带间充质干细胞,并用深红色荧光DiR标记细胞。实验小鼠分5组:正常对照组(C57BL小鼠),模型对照组(C57BL/lpr小鼠),低、中、高剂量脐带间充质干细胞治疗组(C57BL/lpr小鼠),每组10只。各治疗组通过尾静脉注射低、中、高剂量(2×106,1×106,0.5×106个)脐带间充质干细胞,每周1次,连续3周,治疗结束采血测抗核抗体、抗组蛋白抗体、抗双链DNA抗体变化,定量PCR检测OPG和Foxp3基因表达的变化。结果与结论:细胞移植3次后,外周血抗核抗体、抗组蛋白抗体、抗双链DNA抗体均明显下降,CD4+CD25+T细胞明显升高,OPG和Foxp3基因表达也明显升高,接近正常对照组,与模型对照组相比差异均有显著性意义(P<0.01)。结果表明人脐带间充质干细胞能使C57BL/lpr小鼠的各项相关指标恢复到C57BL正常鼠水平,以高剂量治疗组效果最明显。; 阮光萍姚翔刘菊芬王金祥胡媛媛李自安杨建勇庞荣清潘兴华; 关键词：干细胞系统性红斑狼疮人脐带间充质干细胞

新型慢病毒转染四种细胞及在体内示踪的研究被引量：1: 2017年; 目的探讨最佳的生物标记方法示踪细胞,更好地观察细胞移植后在体内的归巢情况。方法本实验室用一种新型慢病毒(e GFP+PURO Lentivirus)转染了四种细胞,确定了四种细胞的最佳感染复数,细胞转染成功后,用最佳浓度的嘌呤霉素筛选,获得四种稳定的GFP阳性表达细胞株。所用的细胞包括人脐带间充质干细胞(h UC-MSC),树鼩脐带间充质干细胞(TS-UC-MSC),人胚肾细胞(293T),C57BL小鼠骨髓间充质干细胞(C57-BMSC)。结果用新型慢病毒(e GFP+PURO Lentivirus)成功转染四种常用细胞,转染成功率100﹪,细胞成功标记上GFP荧光,并确定了最佳的嘌呤霉素使用浓度,确定了不同细胞的感染复数。最终确定TS-UCMSC的最佳感染复数为240,h UC-MSC的最佳感染复数为150,293T的最佳感染复数为100,C57-BMSC的最佳感染复数为50。用带荧光的C57-BMSC细胞回输C57BL小鼠体内,冰冻切片在肝中找到标记细胞,在脾、肺、肾、心未找到标记细胞,说明外来细胞主要在肝脏中代谢。结论在细胞移植治疗时,细胞成功标记上GFP能在动物体内进行示踪,良好的细胞示踪方法可以很好地反映所研究细胞在体内外的动向。; 刘菊芬阮光萍李自安王金祥庞荣清潘兴华; 关键词：绿色荧光蛋白质类慢病毒属转染间质干细胞荧光抗体技术

一种鸡卵清提取液细胞培养基及其制备方法: 本发明公开了一种鸡卵清提取液细胞培养基，按照体积百分比由以下组分构成：65％-75％的DMEM/F-12 1:1培养基，5％-15％胎牛血清和15％-25％鸡卵清提取液。本发明还提供一种鸡卵清提取液细胞培养基的制备方法，...; 阮光萍潘兴华姚翔刘菊芬王金祥; 文献传递

人脐带间充质干细胞移植治疗系统性红斑狼疮: 背景系统性红斑狼疮是一种以多器官或多系统病变和血清中出现多种自身抗体为特征的自身免疫性疾病,目前缺乏有效的治疗方案,而理论上间充质干细胞可用于治疗系统性红斑狼疮.目的观察人脐带间充质干细胞移植治疗系统性红斑狼疮小鼠的...; 阮光萍姚翔刘菊芬王金祥胡媛媛李自安杨建勇庞荣清潘兴华

鸡蛋白提取液诱导细胞后干细胞蛋白芯片分析: 2015年; 目的:分析鸡蛋白提取液与细胞共培养是否能升高干细胞蛋白的表达,使细胞向干细胞转化。方法:用四种细胞,做一个普通培养,一个50%鸡蛋白提取液共培养,培养3 d后,收集细胞,冻于-80℃,送公司做干细胞蛋白芯片检测。结果:C57-BMSC有3个蛋白发生了统计学意义的改变,TS-UC-MSC有1个蛋白发生了统计学意义的改变,293T有1个蛋白发生了统计学意义的改变,293T-GFP有1个蛋白发生了统计学意义的改变。结论:50%鸡蛋白提取液共培养细胞后,细胞发生了向干细胞转变的现象。; 阮光萍姚翔刘菊芬王金祥李自安胡媛媛潘兴华; 关键词：细胞诱导

鸡卵清提取液不同组分对293T细胞多能因子表达的影响被引量：1: 2016年; 该研究发现,鸡卵细胞提取液有促进239T细胞多能因子表达增加的作用,将在细胞生物学有广泛的应用价值。将鸡卵清提取液分离为大于10 k Da和小于10 k Da的组分,用各提取液50%的终浓度培养293T细胞5 d,用流式细胞术检测多能因子的表达。结果表明,鸡卵清提取液及不同组分都有促进293T细胞多能因子表达增加的作用,而大于10 k Da的组分作用最明显,差别有统计学意义(P<0.01)。结果提示,鸡卵清提取液有促进239T细胞多能因子表达增加的作用,鸡卵清提取液中可能存在促进体细胞重编程作用的物质。; 阮光萍姚翔刘菊芬王金祥庞荣清潘兴华; 关键词：不同组分重编程流式细胞仪

UCMSC对放射伤树鼩淋巴细胞表达Th1/Th2类细胞因子的干预作用: 2018年; 目的观察脐带间充质干细胞(UCMSC)治疗对放射伤树鼩外周血和脾淋巴细胞表达Th1/Th2类细胞因子的影响。方法成年雄性树鼩随机分成模型组、治疗组,每组15只,两组均接受全身一次性4.5 Gy电离辐照,然后治疗组经股静脉输注同种异体UCMSC(3×10~7个/kg),而模型组则给予同体积生理盐水,均1次/w,连续治疗4次。末次MSC治疗后1 w,统计两组的存活率,实时荧光定量PCR检测两组外周血和脾淋巴细胞IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α的m RNA表达水平。结果在末次治疗后1 w,治疗组存活率为86.677%,模型组存活率为53.33%,两组比较有显著差异(P﹤0.05);治疗组外周血和脾淋巴细胞TNF-α、IL-2表达量均低于模型组(P﹤0.05),而IL-4、IL-6表达量均高于模型组(P﹤0.05)。结论 UCMSC治疗可提高全身放射损伤树鼩的生存率,诱导淋巴细胞Th1/Th2类细胞因子表达向Th2优势化。; 郭德镔郭德镔李青青李青青王金祥刘菊芬王强杨建勇朱向情; 关键词：树鼩脐带间充质干细胞 TH1/TH2 细胞因子

BMSC治疗ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠模型的初步研究: 2018年; 目的研究骨髓间充质干细胞(BMSC)对ApoE^(-/-)缺陷小鼠动脉粥样硬化(AS)的治疗作用。方法 ApoE^(-/-)缺陷小鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和实验组,同时设置正常对照组。实验组、阴性对照组于9 w龄时开始分别经尾静脉注射BMSC悬液200μl(1×10~5个BMSC)和同体积生理盐水,正常对照组和空白对照组不做处理。小鼠分别于12 w时和BMSC注射后4 w,采用全自动生化分析仪测定各组血液总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,油红O染色观察主动脉弓斑块形成情况。结果空白对照组与正常对照组小鼠相比,TC、TG、LDL-C明显升高(P<0.05),主动脉弓油红O染色可见空白对照组主动脉弓出现斑块。BMSC治疗后,实验组的TC、TG、LDL-C较阴性对照组明显下降(P<0.05),油红染色发现实验组主动脉弓斑块斑块数量及面积均减少。结论 ApoE^(-/-)缺陷小鼠高脂饮食至12 w龄时出现典型动脉粥样硬化(AS)临床表征,而同种异体BMSC具有一定降低血脂、抑制主动脉弓内斑块形成的作用。; 白盈盈刘菊芬张建平和法莲陈慧芬张梦圆王颖翠潘兴华刘高米洋; 关键词：间充质干细胞动脉粥样硬化斑块

人脐带间充质干细胞用于糖尿病猕猴治疗的研究: 目的建立猕猴糖尿病模型,并进行病理切片评价,用人脐带间充质干细胞治疗,观察猕猴血糖的变化。方法猕猴9只,分为对照组3只和模型组6只,模型组通过高糖高脂饮食及静脉注射链尿佐菌素(STZ)诱导成糖尿病模型,12周时再分为模型...; 阮光萍刘菊芬李自安王金祥庞荣清潘兴华; 关键词：猕猴糖尿病模型病理切片空腹血糖人脐带间充质干细胞

山羊胎肝内定位注射不同体积间充质干细胞对胎羊发育的影响被引量：2: 2018年; 目的探索山羊胎肝内定位注射不同体积间充质干细胞(MSC)对胎羊发育的影响。方法以B超探查10只疑似怀孕的母山羊,观察胎羊数量、胎羊性别,确定胎肝位置。怀孕约3个月时,在B超引导下穿刺至胎肝,注射不同体积和不同数量的雄性山羊骨髓MSC悬液到胎肝实质区域,精心护理并观察穿刺母羊是否流产。结果借助B超探查10只疑似怀孕母羊中的6只怀孕,可以发现胎心跳动和胎肝血流并确定胎肝的位置,在B超引导下能够准确注射MSC悬液至胎肝实质区域,注射1 ml MSC悬液,不会引起流产,安全可行;而注射同等细胞数量的4 ml MSC悬液,则导致穿刺山羊流产。结论 B超显影可确诊山羊怀孕和确定胎肝位置,胎肝内注射1 m山羊骨髓MSC悬液不会导致胎羊流产,MSC数量不变而体积增加至4 ml时易导致胎羊流产。; 黄小昆龙海苏锡雄苏锡雄李自安杨艾梅王强李自安王金祥余璞庞荣清王强; 关键词：超声引导定位注射山羊

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刘菊芬

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